Luận văn Khảo sát thành phần hóa học rễ cây đinh lăng lá tròn Polyscias balfouriana Bail. họ nhân sâm (araliaceae)

giaûi ly Troïng löôïng cao (mg) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù EC41 1-09 E 100% 90 E : AE (90:10) dô Khoâng khaûo saùt EC42 10-16 E : AE (9:1) 110 E : AE(7:3) 1 veát baàu roõ Khaûo saùt EC43 17-27 28-32 E : AE (9:1) E : AE (8:2) 120 E : AE(7:3) 1 veát daøi dô Khoâng khaûo saùt EC44 33-45 E : AE (7:3) 60 E : A E(7:3) C 100% Veät dô Khoâng khaûo saùt Toång 380 E: eter daàu hoûa; AE: acetat etyl; C: cloroform Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 27 Khaûo saùt phaân ñoaïn EC42 cuûa baûng 2.5 Phaân ñoaïn EC42 thaáy coù caùc chất dạng sáp, maøu traéng. Ñöôïc naïp leân coät vaø giaûi ly tieáp vôùi heä dung moâi khôûi ñaàu laø eter daàu hoûa : acetat etyl (9:1). Theo doõi quaù trình saéc kyù coät baèng SKLM thu ñöôïc keát quaû nhö trình baøy trong baûng 2.6. Baûng 2.6: Keát quaû saéc kyù coät aùp duïng treân phaân ñoaïn EC42 cuûa baûng 2.5 Saéc kyù lôùp moûng N0 Soá thöù töï loï Dung moâi giaûi ly Troïng löôïng cao (mg) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù EC421 1-05 E 100% 30 E : AE (90:10) Dô Khoâng khaûo saùt EC422 05-09 E : AE (9:1) 27 E : AE(7:3) 1 veát roõ Khaûo saùt EC423 10-17 E : AE (9:1) 29 E : AE(7:3) 1 veát baàu Khoâng khaûo saùt EC424 18- 23 E : AE (9:1) 20 E :AE (7:3) 1 veát roõ Khaûo saùt Toång 106 E: eter daàu hoûa; AE: acetat etyl Nhaän xeùt: Saéc kyù treân phaân ñoaïn EC42 thu ñöôïc 4 phaân ñoaïn. - Phaân ñoaïn EC422 coù daïng saùp, maøu traéng. SKLM vôùi heä giaûi ly eter daàu hoûa : acetat etyl (7 : 3) cho hieän hình vôùi thuoác thöû H2SO4 cho thaáy coù 1 veát troøn roõ, coù maøu vaøng, ñaët teân laø BALE-2 - Phaân ñoaïn ECA424 cho thaáy 1 veát roõ maøu vaøng khi soi UV treân SKLM. Hôïp chaát daïng saùp, maøu traéng. Ñaët teân laø BALE-3 2.4.3 Khaûo saùt cao CB cuûa sô ñoà 2.1 Cao CB thu ñöôïc coù khối lượng10,4g, saéc kyù lôùp moûng ban ñaàu cho thaáy coù 2 veát ñaäm roõ. Toaøn boä cao ñöôïc naïp leân ñaàu coät silica gel đñể thực hiện sắc kyù Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 28 cột. Laàn löôït giaûi ly baèng caùc dung moâi coù ñoä phaân cöïc taêng daàn, töø eter dầu hoûa 100% ñeán eter daàu hoûa : acetat etyl (5:5). Dung dòch giaûi ly qua coät ñöôïc höùng vaøo caùc loï, moãi laàn 50ml. Theo doõi quaù trình saéc kyù coät baèng phöông phaùp saéc kyù lôùp moûng. Keát quaû saéc kyù coät ñöôïc trình baøy trong baûng 2.7 Baûng 2.7: Keát quaû saéc kyù coät aùp duïng treân cao CB cuûa sô ñoà 2.1. Saéc kyù lôùp moûng N0 Soá thöù töï loï Dung moâi giaûi ly Troïng löôïng cao (mg) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù CB1 1-10 E 100% 963 A : E (95:5) 1 veát, dô Khoâng khaûo saùt CB2 11-20 21-73 E : AE (9:1) E : AE (8:2) 4200 C : M (9:1) 2 veát roõ Khaûo saùt CB3 74-80 81-89 E : AE (7:3) E : AE (6:4) 3560 C: M (9:1) Veát dô Khoâng khaûo saùt CB4 90-97 E : AE (5:5) 702 C : M (9:1) Veät daøi dô Khoâng khaûo saùt Toång 9.425 E: eter daàu hoûa; AE: acetat etyl; C: cloroform, M : metanol Nhaän xeùt: Saéc kyù coät treân cao CB thu ñöôïc 4 phaân ñoaïn (CB1-CB4), trong ñoù coù phaân ñoaïn CB2 cho 2 veát roõ, ñaäm, treân SKLM neân ñöôïc choïn ñeå tieáp tuïc khaûo saùt. Caùc phaân ñoaïn coøn laïi coù saéc kyù lôùp moûng cho veät dô keùo daøi neân khoâng khaûo saùt tieáp. Khaûo saùt phaân ñoaïn CB2 cuûa baûng 2.7 Phaân ñoaïn CB2 thaáy coù chaát daïng hình kim, maøu traéng. Keát quaû SKLM cho thaáy coù 2 veát roõ ôû xa nhau neân tieán haønh saéc kyù coät tieáp tuïc vôùi phaân ñoaïn naøy. Cao ñöôïc naïp leân ñaàu coät vaø giaûi ly laàn löôït baèng caùc dung moâi phaân cöïc taêng daàn töø eter daàu hoûa 100% ñeán eter daàu hoûa : acetat etyl (5:5). Theo doõi quaù trình saéc kyù coät baèng SKLM thu ñöôïc keát quaû nhö baûng 2.8. Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 29 Baûng 2.8 : Keát quaû saéc kyù coät aùp duïng treân phaân ñoaïn CB2 cuûa baûng 2.7 Saéc kyù lôùp moûng N0 Soá thöù töï loï Dung moâi giaûi ly Troïng löôïng cao (mg) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù CB2.1 1-15 16-30 E 100% E : AE (95:5) 482 E : AE (95:5) 1 veát môø, dô Khoâng khaûo saùt CB2.2 31-40 E : AE (9:1) 718 C : M(9:1) 1 veát roõ Khaûo saùt CB2.3 41-45 46-72 E : AE (9:1) E : AE (8:2) 1790 C : M(9:1) 1 veát roõ Khaûo saùt CB2.4 73-104 E : AE (8:2) 456 C : M(8:2) Veät daøi Khoâng khaûo saùt Toång 3.446 E: eter daàu hoûa; AE: acetat etyl; C: cloroform, M : metanol Nhaän xeùt: Saéc kyù coät phaân ñoaïn CB2 thu ñöôïc 4 phaân ñoaïn nhoû, trong ñoù phaân ñoaïn CB2.2 vaø CB2.3 cho thaáy coù veát roõ vaø löôïng cao cuõng khaù lôùn neân ñöôïc giöõ laïi ñeå tieáp tuïc khaûo saùt. Khaûo saùt phaân ñoaïn CB2.2 cuûa baûng 2.8 Phaân ñoaïn CB2.2 thu ñöôïc chaát daïng tinh theå hình kim, maøu traéng. Keát quaû SKLM hieän hình vôùi thuoác thöû H2SO4 cho thaáy coù 1 veát troøn roõ, luùc ñaàu coù maøu tím caùnh sen coøn laãn ít veät dô. Tieáp tuïc söû duïng phöông phaùp saéc kyù coät ñoái vôùi phaân ñoaïn naøy, giaûi ly baèng heä dung moâi eter daàu hoûa : acetat etyl (8:2) thu ñöôïc hôïp chaát daïng tinh theå hình kim maøu traéng, kyù hieäu laø BALC-1. Keát quaû saéc kyù lôùp moûng hôïp chaát BALC-1 ñöôïc trình baøy trong hình 2.3b. Khaûo saùt phaân ñoaïn CB2.3 cuûa baûng 2.8 Phaân ñoaïn CB2.3 thu ñöôïc chaát cuõng coù daïng tinh theå hình kim maøu traéng, keát quaû SKLM cho 1 veát troøn roõ, luùc ñaàu coù maøu tím caùnh sen nhöng coù voøng Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa beân ngoaøi khaùc vôùi hôïp chaát BALC-1 vaø hieän hình ôû vuøng phaân cöïc hôn so vôùi BALC-1 coøn laãn ít veät dô. Tieáp tuïc söû duïng phöông phaùp saéc kyù coät ñoái vôùi phaân ñoaïn naøy, giaûi ly baèng heä dung moâi eter daàu hoûa : acetat etyl (6:4) thu ñöôïc hôïp chaát daïng boät maøu traéng, kyù hieäu laø BALC-2. Keát quaû saéc kyù lôùp moûng hôïp chaát BALC-2 ñöôïc trình baøy trong hình 2.3b. a b c d Hình 2.3: Keát quaû SKLM caùc hôïp chaát BALE-1, BALE-2, BALE-3, BAlC-1, BALC-2, BALAE-1, BALM-1, BALM-2, BALM-3. Hình 2.3 a : Dung moâi giaûi ly eter daàu hoûa : acetat etyl (8:2) Hình 2.3 b : Dung moâi giaûi ly cloroform: metanol (8,5:1,5) Hình 2.3 c : Dung moâi giaûi ly cloroform: metanol (8:2) Hình 2.3 d : Dung moâi giaûi ly metanol : nöôùc (7 :3) E : cao eter daàu hoûa phaân ñoaïn C. C : cao cloroform phaân ñoaïn B. M : cao metanol. Trang 30 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 31 2.4.4. Khảo sát cao M của sơ đồ 2.1 Cao M thu ñöôïc töø sô ñoà 2.1, coù khoái löôïng 65,1 g. Cao ñöôïc naïp leân ñaàu coät silica gel vaø giaûi ly laàn löôït vôùi caùc dung moâi phaân cöïc taêng daàn töø acetat etyl 100% ñeán acetat etyl : metanol : nöôùc (10 : 6 : 1) vaø cuoái cuøng laø nöôùc 100%, höùng moãi loï 100ml. Theo doõi quaù trình saéc kyù coät baèng SKLM thu ñöôïc keát quaû nhö baûng 2.11. Baûng 2.9 : Keát quaû saéc kyù coät aùp duïng treân cao M cuûa sô ñoà 2.1. Saéc kyù lôùp moûng N0 Soá thöù töï loï Dung moâi giaûi ly Troïng löôïng cao (g) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù MA 1-18 AE 5,4 C : M (8 :2) Veát dô Khoâng khaûo saùt MB 19-60 AE 16,6 C : M (8 :2) nhieàu veát dô Khoâng khaûo saùt MC 61-100 AE : M :N (20 : 6 :1) 23,7 C : M : N (16 : 7 : 1) veâát daøi dô Khoâng khaûo saùt MD 101-120 AE : M : N (20 : 6 :1) 11,2 C : M : N (16 : 7 : 1) 2 veát chính Khaûo saùt ME 121-125 AE : M : N (14 : 6 :1) 8,5 C : M : N (16 : 7 : 1) 3 veát chính Khaûo saùt MF 126- 140 AE : M : N (10 : 6 :1) N (100%) 15,3 C : M : N (13 : 7 : 1) Veát dô Khoâng khaûo saùt Toång 80,7 AE: acetat etyl; C: cloroform; M: metanol;N: nöôùc Nhaän xeùt: Saéc kyù coät aùp duïng treân cao M cho thaáy coù 2 phaân ñoaïn MD vaø ME cho nhieàu veát roõ maøu tím, löôïng cao lôùn, tieáp tuïc ñöôïc khaûo saùt tieáp. Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 32 Khaûo saùt phaân ñoaïn MD cuûa baûng 2.11 Phaân ñoaïn MD thu ñöôïc coù khối lượng11,2g, saéc kyù lôùp moûng ban ñaàu cho thaáy coù 2 veát chính roõ. Toaøn boä cao ñöôïc naïp leân ñaàu coät silica gel đñể thực hiện sắc kyù cột. Laàn löôït giaûi ly baèng caùc dung moâi coù ñoä phaân cöïc taêng daàn töø cloroform : metanol : nöôùc (20 : 6 : 1) ñeán cloroform : metanol : nöôùc (13 : 7 : 1). Höùng thaønh nhieàu loï, moãi loï 100ml. Theo doõi quaù trình saéc kyù coät baèng SKLM thu ñöôïc keát quaû nhö baûng 2.12. Nhaän xeùt: Phaân ñoaïn MD2 saéc kyù lôùp moûng cho 1 veát roõ coøn laãn veát khaùc. Ñöôïc tieáp tuïc khaûo saùt. Baûng 2.10 : Keát quaû saéc kyù coät aùp duïng treân phaân ñoaïn MD cuûa baûng 2.9 Saéc kyù lôùp moûng N0 Soá thöù töï loï Dung moâi giaûi ly Troïng löôïng cao (g) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù MD1 1-13 C : M : N (20 : 6 :1) 1,67 C : M : N (20 : 6 :1) Veát dô Khoâng khaûo saùt MD2 14-22 23-45 C : M : N (20 : 6 :1) (18 : 6 :1) 2,5 C : M : N (14 : 6 :1) 1 veát chính laãn nhieàu veát Khaûo saùt MD3 46-79 C : M : N (17 : 6 :1) 3,3 C : M : N (14 : 6 :1) 2 veát roõ Coøn laãn dô Khaûo saùt MD4 80-95 C : M : N (13 : 7 :1) 1,53 C : M : N (10 : 6 :1) Veát dô Khoâng khaûo saùt Toång 9 C: cloroform; M: metanol; N: nöôùc Khaûo saùt phaân ñoaïn MD2 cuûa baûng 2.12 Phaân ñoaïn MD2 vôùi löôïng cao laø 2,5 g ñöôïc naïp leân ñaàu coät silica gel. Giaûi ly laàn löôït vôùi caùc dung moâi coù ñoä phaân cöïc taêng daàn. Höùng thaønh nhieàu loï, Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 33 moãi loï 50ml. Theo doõi quaù trình saéc kyù coät baèng SKLM thu ñöôïc keát quaû nhö baûng 2.13. Baûng 2.11: Keát quaû saéc kyù coät aùp duïng treân phaân ñoaïn MD2 cuûa baûng 2.10 Saéc kyù lôùp moûng N0 Soá thöù töï loï Dung moâi giaûi ly Troïng löôïng cao (mg) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù MD21 1-11 12 – 38 C : M : N (20 : 6 :1 ) (19 :6 :1) 245 C : M : N (18 : 6 :1) Veát dô Khoâng khaûo saùt MD22 39-47 C : M : N (19 : 6 :1) 355 C : M : N (18 : 6 :1) 1 veát roõ Khaûo saùt MD23 48-55 C : M : N (19 : 6 :1) 800 C : M : N (14 : 6 :1) Veát dô Khoâng Khaûo saùt MD24 56-70 C : M : N (14 : 6 :1) 600 C : M : N (13 : 7 :1) Nhieàu veát dô Khaûo saùt Toång 2100 C: cloroform; M: metanol; N: nöôùc Nhaän xeùt: Saéc kyù coät treân phaân ñoaïn MD2 thu ñöôïc 4 phaân ñoaïn. Trong ñoù chuùng toâi nhaän thaáy coù phaân ñoaïn MD22 thu ñöôïc laø chaát raén coù maøu hôi vaøng, SKLM cho 1 veát maøu tím. Tinh cheá laïi baèng saéc kyù coät, cho chaát raén coù maøu traéng, ñöôïc kyù hieäu laø BALM-1. Khaûo saùt phaân ñoaïn MD3 cuûa baûng 2.12 Phaân ñoaïn MD3 vôùi löôïng cao laø 3,3g ñöôïc naïp leân ñaàu coät silica gel. Giaûi ly vôùi heä dung moâi taêng daàn töø cloroform : metanol :nöôùc (18 : 6 :1) ñeán cloroform : metanol : nöôùc ( 10 : 10 : 1). Höùng thaønh nhieàu loï, moãi loï 50 ml. Theo doõi quaù trình saéc kyù coät baèng SKLM thu ñöôïc keát quaû nhö baûng 2.14. Nhaän xeùt: SKLM silica gel pha ñaûo aùp duïng cho phaân ñoaïn MD34 vaø MD35 treân vôùi heä dung moâi metanol : nöôùc (6 : 4) cho moät veát chính coøn dô maøu tím. Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Baûng 2.12: Keát quaû saéc kyù coät aùp duïng treân phaân ñoaïn MD3 cuûa baûng 2.9 Saéc kyù lôùp moûng N0 Soá thöù töï loï Dung moâi giaûi ly Troïng löôïng cao (mg) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù MD31 1-20 C : M : N (18 : 6 :1) 120 C : M : N (17 : 6 :1) 1 Veát coøn baån M1 ñaõ khaûo saùt MD32 21-39 C : M : N (15 : 6 :1) 570 C : M : N (14 : 6 :1) 3 veát Khoâng khaûo saùt MD33 40-53 C : M : N (14 : 6 :1) 600 C : M : N (13 : 6 :1) 2 veát Khoâng khaûo saùt MD34 54-56 C : M : N (14 : 6 :1) 650 C : M : N (13 : 7 :1) 1 veát roõ Khaûo saùt MD35 57- 90 C : M : N (14 : 7 :1) 1300 C : M : N (13 : 7 :1) 1 veát roõ coøn dô Khaûo saùt Toång 3240 C: cloroform; M: metanol; N: nöôùc Khaûo saùt phaân ñoaïn MD34 cuûa baûng 2.14 Phaân ñoaïn MD34 coù 650mg, laáy 250mg naïp leân coät silica gel pha ñaûo C18. Giaûi ly vôùi heä dung moâi giaûm daàn ñoä phaân cöïc töø nöôùc : metanol ( 7 : 3) ñeán nöôùc : metanol (5 : 5). Höùng thaønh nhieàu loï, moãi loï 20 ml. Keát quaû saéc kyù coät ñöôïc trình baøy ôû baûng 2.15. Nhaän xeùt: Phaân ñoaïn MD342 coù daïng raén, maøu traéng. SKLM cho 1 veát coøn laãn baån, ñöôïc tinh cheá laïi baèng saéc kyù coät treân silica gel ñaûo nhieàu laàn, vôùi heä dung moâi nöôùc : metanol (6:4), thu ñöôïc hôïp chaát coù daïng boät, kyù hieäu laø (BALM-2). Khaûo saùt phaân ñoaïn MD35 cuûa baûng 2.14: Laáy 650mg phaân ñoaïn MD35 naïp leân coät silica gel pha ñaûo C18. Giaûi ly vôùi heä dung moâi giaûm daàn ñoä phaân cöïc töø nöôùc : metanol ( 7 : 3) ñeán nöôùc : metanol (5 : 5). Höùng thaønh nhieàu loï, moãi loï 20 ml. Keát quaû saéc kyù coät ñöôïc trình baøy ôû baûng 2.16. Trang 34 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 35 Nhaän xeùt: Phaân ñoaïn MD354 coù daïng raén, maøu traéng. SKLM cho 1 veát coøn laãn baån, ñöôïc tinh cheá laïi baèng saéc kyù coät treân silica gel ñaûo nhieàu laàn, vôùi heä dung moâi nöôùc : metanol (6:4), thu ñöôïc hôïp chaát coù daïng boät, kyù hieäu laø (BALM-3). Baûng 2.13: Keát quaû saéc kyù coät aùp duïng treân phaân ñoaïn MD34 cuûa baûng 2.12 Saéc kyù lôùp moûng N0 Soá thöù töï loï Dung moâi giaûi ly Troïng löôïng cao (mg) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù MD341 1-12 N : M (7:3) 40 N : M (5:5) 1 Veát dô Khoâng khaûo saùt MD342 13-16 N : M (6:4) 180 N : M (4:6) 1 veát coøn laãn Khaûo saùt MD343 17-25 N : M (6:4) 20 N : M (4:6) 2 veát dô Khoâng khaûo saùt Toång 240 N: nöôùc; M: metanol Baûng 2.14: Keát quaû saéc kyù coät aùp duïng treân phaân ñoaïn MD35 cuûa baûng 2.12 Saéc kyù lôùp moûng N0 Soá thöù töï loï Dung moâi giaûi ly Troïng löôïng cao (mg) Dung moâi giaûi ly Keát quaû Ghi chuù MD351 1-20 C : M : N (18:6:1) 120 C : M : N (17:6:1) 1 Veát coøn baån M1 ñaõ khaûo saùt MD352 21-39 C : M : N (15:6:1) 570 C : M : N (14:6:1) 3 veát Khoâng khaûo saùt MD353 40-53 C : M : N (14:6:1) 600 C : M : N (13:6:1) 2 veát Khoâng khaûo saùt MD354 54-56 C : M : N (14:6:1) 650 C : M : N (13:7:1) 1 veát roõ Khaûo saùt MD355 57- 90 C : M : N (14:7:1) 1300 C : M : N (13:7:1) 2 veát Khoâng khaûo saùt Toång 3240 C: cloroform; M: metanol; N: nöôùc Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 36 2.5. KHAÛO SAÙT CAÁU TRUÙC HOÙA HOÏC CAÙC HÔÏP CHAÁT COÂ LAÄP ÑÖÔÏC 2.5.1. Khaûo saùt caáu truùc hoùa hoïc cuûa hôïp chaát BALAE-1 Hôïp chaát BALAE-1 laø tuûa, thu ñöôïc trong quaù trình coâ bôùt dòch chieát acetat etyl, coù nhöõng ñaëc ñieåm sau: * Chaát raén daïng boät, maøu traéng. * Ñieåm noùng chaûy: 276-2780C (keát tinh trong cloroform). * Saéc kyù lôùp moûng, giaûi ly baèng heä dung moâi cloroform : metanol (8:2), hieän hình baûn baèng H2SO4 ñaäm ñaëc, saáy baûn ôû nhieät ñoä cao cho veát maøu tím than (hình 2.3b) * Phoå 1H–NMR, DMSO-d6, (phuï luïc soá 1a, ab) cho caùc tín hieäu coäng höôûng ñöôïc trình baøy ôû baûng 2.17. * Phoå 13C keát hôïp DEPT- NMR (phuï luïc soá 2, 3) cho caùc tín hieäu coäng höôûng ñöôïc trình baøy ôû baûng 2.17. Bieän luaän caáu truùc Hôïp chaát BALAE-1 coù daïng boät maøu traéng, saéc kyù lôùp moûng hieän hình baèng H2SO4 ñaäm ñaëc cho veát maøu tím than, neân coù theå laø moät glycosid. Treân phoå 13C keát hôïp vôùi DEPT-NMR nhaän thaáy : - ÔÛ vuøng töø tröôøng thaáp coù caëp muõi ôû δppm = 140,4 (=C<); 121,1 (-CH=) vaø caëp muõi ôû δppm = 137,9 (-CH=); 128,8 (-CH=) cho thaáy söï hieän dieän cuûa hai lieân keát ñoâi >C=CH- vaø -HC=CH-. Tín hieäu coäng höôûng ôû δppm = 100,7 ñaëc tröng cho carbon acetal -O-CH-O-. - ÔÛ vuøng töø 80 ñeán 61 ppm coù caùc tín hieäu 76,92 (>CH-OH); 76,71 (>CH-OH); 73,44 (>CH-OH); 70,10 (>CH-OH); 61,08 (-CH2-OH) ñaëc tröng cuûa caùc carbon >CH-OH cuûa ñöôøng. So saùnh caùc tín hieäu naøy thaáy töông ñoái truøng khôùp vôùi caùc tín hieäu cuûa ñöôøng glucose. Nhö vaäy coù theå thaáy hôïp chaát BALAE-1 laø moät glycosid vôùi phaàn ñöôøng laø glucose. Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Beân caïnh ñoù coøn coù muõi coäng höôûng ôû 76,5 (loaïi carbon >CH-O-), keát hôïp vôùi caùc tín hieäu treân phoå 1H- NMR cho thaáy coù söï töông hôïp vôùi caùc soá lieäu cuûa stigmasterol. Vì vaäy chuùng toâi choïn hôïp chaát 3-O-β-D-glucopyranosyl stigmasterol ñeå so saùnh[34]. Keát quaû so saùnh trình baøy trong baûng 2.17 cho thaáy coù söï töông hôïp, do ñoù ñeà nghò hôïp chaát BALAE-1 laø 3-O-β-D-glucopyranosyl stigmasterol vôùi coâng thöùc hoùa hoïc nhö sau : 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 161718 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 O OH OH HO HO O1'2 ' 3' 4' 5' 6' 3-O-β-D-Glucopyranosylstigmasterol (BALAE-1) 2.5.2 Khaûo saùt caáu truùc hoùa hoïc cuûa hôïp chaát BALE-1 Hôïp chaát BALE-1 thu ñöôïc töø phaân ñoaïn EC42 cuûa cao eter daàu hoûa trong baûng 2.4 vôùi caùc ñaëc ñieåm sau: * Tinh thể hình kim, màu trắng. * Điểm nóng chảy: 145 – 147oC (kết tinh trong cloroform). * Sắc ký lớp mỏng giải ly bằng hệ dung môi eter dầu hỏa : etyl acetat (8:2), hiện hình bằng dung dịch acid H2SO4 50%, sấy bản ở nhieät ñoä cao cho một vết màu tím, sau đó chuyển thành xanh đen, có giá trị Rf = 0,48 (Hình 2.3a). * Phổ 1H–NMR, CDCl3 (Phụ lục 4a, 4b), δppm 5,35 (2H, d, J = 5 Hz, –CH=, H–6, H–6’); 5,15 (1H, dd, J = 8,5 Hz & J = 15 Hz, –CH=, H–23); 5,03 (1H, dd, J = 8,5 Hz & J = 15 Hz, –CH=, H–22); 3,52 (2H, m, >CH–OH, H–3, H–3’). * Phổ 13C (Phụ lục 5a, 5b) kết hợp với DEPT–NMR (Phụ lục 6a, 6b), δppm: 140,8 (>C=, C–5, C–5’); 138,3 (–CH=, C–22); 129,3 (–CH=, C–23); 121,7 (–CH=, C–6, C–6’); 71,8 (>CH–OH, C–3, C–3’) (Bảng 2.18). Trang 37 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 38 Baûng 2.15: So saùnh phoå 13C-NMR cuûa hôïp chaát BALAE-1 vôùi 3-O-β-D-glucopyranosylstigmasterol [34] Hôïp chaát BALAE-1 (DMSO-d6) 3-O-β-D-Glucopyranosyl stigmasterol[34](DMSO-d6) N0 δH (ppm); J (Hz) 13C-NMR (δppm) 13C-NMR (δppm) 1 36,8 37,0 2 29,2 28,9 3 3,65 (1H, d, 10,5) 73,4 72,5 4 39,3 39,3 5 140,4 140,6 6 5,32 (1H, d, 4,5) 121,1 121,3 7 30,3 31,6 8 31,4 33,6 9 49,6 49,8 10 36,2 36,4 11 20,5 20,8 12 38,3 45,4 13 41,8 42,1 14 56,2 56,4 15 23,8 24,1 16 28,4 28,0 17 55,3 55,7 18 19,0 19,3 19 12,0 12,0 20 40,1 40,1 21 21,1 21,1 22 5,16 (1H, dd, 9,0/8,5) 138,0 138,2 23 5,03 (1H, dd, 9,0/8,5) 128,8 129,0 24 50,5 50,8 25 31,3 35,1 26 19,6 21,3 27 20,8 19,9 28 24,8 25,7 29 12,1 12,3 1’ 4,22 (1H, d, 8,0) 100,7 101,0 2’ 74,3 73,7 3’ 76,7 76,9 4’ 70,1 70,3 5’ 76,9 77,2 6’ 61,1 61,3 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Biện luận cấu trúc hóa học Kết quả sắc ký lớp mỏng hợp chất BALE-1 cho một vết màu tím, khi hiện hình bản bởi dung dịch acid H2SO4 50% (Hình 2.3a) nên hợp chất BALE-1 có thể là một sterol hoặc triterpen. Phổ 1H–NMR (Phụ lục 4a, 4b): δH (ppm) 5,35 (2H, d, J = 5 Hz, –CH=); 5,15 (1H, dd, J = 8,5 Hz & J = 15 Hz, –CH=); 5,03(1H, dd, J = 8,5 Hz & J = 15 Hz, –CH=). Kết hợp với 13C–NMR và DEPT (Phụ lục 5 và Phụ lục 6): 4 mũi cộng hưởng tại δC (ppm) (140,8; 121,7) và (138,3; 129,3) là hai cặp mũi đặc trưng của nối đôi >C=CH- trong các hợp chất của stigmasterol và β–sitosterol. Do đó, chúng tôi chọn phổ 13C–NMR của hai hợp chất stigmasterol và β–sitosterol để so sánh với phổ 13C–NMR của hợp chất BALE-1 đã cô lập được. Kết quả so sánh cho ở Bảng 2.18. Kết quả ở Bảng 2.18 cho thấy có sự tương đồng giữa phổ 13C–NMR của hợp chất BALE-1 với phổ 13C–NMR của δH (ppm); J (Hz) stigmasterol và β– sitosterol, như vậy, hợp chất BALE-1 là hỗn hợp của stigmasterol và β–sitosterol. HO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 HO 1' 2' 3' 4' 5' 6' 7' 8' 9' 10' 11' 12' 13' 14' 15' 16' 17' 18' 19' 20' 21' 22' 23' 24' 25' 26' 27' 28' 29' H H H (BALE-1) Stigmasterol β-SitosterolH Khảo sát diện tích tích phân (S) của một số tín hiệu cộng hưởng trên phổ 1H–NMR của hợp chất BALE-1 ở hình 2.4 nhận thấy như sau: Ở δH (ppm) 4,12 (1H, m, >CH–OH, H–3’) có S = 0,4; 3,52 (1H, m, >CH–OH, H–3) có S = 0,6. Vậy : SH-3= 0,6 ; SH-3’ = 0,4 Từ kết quả trên cho thấy BALAE-1 là hỗn hợp của stigmasterol và β–sitosterol với tỷ lệ (3 : 2). Trang 39 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Hình 2.4 : Một phần phổ 1H-NMR của hợp chất BALE-1 Bảng 2.16: So sánh phổ 13C–NMR của hợp chất BALE-1 với hai hợp chất stigmasterol và β–sitosterol [16]. BALE-1 Stigmasterol β–Sitosterol Số TT 13C– NMR Vị trí carbon 13C– NMR Loại C Vị trí carbon 13C– NMR Loại C 1 140,8 5 140,7 >C= 5’ 140,10 >C= 2 138,3 22 138,3 –CH= - - - 3 129,3 23 129,2 –CH= - - - 4 121,7 6 121,6 –CH= 6’ 121,1 –CH= 5 71,8 3 71,7 >CH–OH 3’ 71,5 >CH–OH 6 56,9 14 56,8 >CH– 14’ 56,7 >CH– 7 56,0 17 55,9 >CH– 17’ 55,8 >CH– 8 51,3 24 51,2 >CH– - - - 9 50,2 9 52,1 >CH– - - - 10 50,2 - - - 9’ 50,1 >CH– 11 45,9 - - - 24’ 45,6 >CH– 12 42,4 12 42,3 –CH2– 4’ 42,1 –CH2– 13 42,3 13 42,2 >CC< Trang 40 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa 14 40,5 20 40,5 >CH– - - 15 39,8 4 39,7 –CH2– - - - 16 39,7 - - - 12’ 39,6 –CH2– 17 37,3 1 37,2 –CH2– 1’ 37,1 –CH2– 18 36,5 10 36,4 >CC< 19 35,9 - - - 20’ 36,0 >CH– 20 34,0 - - - 22’ 33,8 –CH2– 21 31,9 25 31,9 >CH– - - - 22 31,9 8 31,9 >CH– 8’ 31,8 >CH– 23 31,7 7 31,6 –CH2– 7’ 31,8 –CH2– 24 31,5 - - - 2’ 31,5 –CH2– 25 29,2 - - - 25’ 29,0 >CH– 26 28,9 2 28,9 –CH2– - - - 27 28,3 16 28,2 –CH2– - - - 28 28,2 - - - 16’ 28,1 –CH2– 29 26,1 - - - 23’ 26,1 –CH2– 30 25,4 28 25,4 –CH2– - - - 31 24,4 15 24,4 –CH2– - - - 32 24,3 - - - 15’ 24,2 –CH2– 33 23,1 - - - 28’ 23,0 –CH2– 34 21,2 26 21,2 –CH3 - - - 35 21,1 21 21,1 –CH3 - - - 36 21,1 11 21,1 –CH2– 11’ 21,0 –CH2– 37 19,8 - - - 27’ 19,7 –CH3 38 19,4 18 19,4 –CH3 19’ 19,3 –CH3 39 19,0 27 20,0 –CH3 26’ 19,0 –CH3 40 18,8 - - - 21’ 18,7 –CH3 41 12,3 29 12,3 –CH3 - - - 42 12.0 19 12,1 –CH3 29’ 11,9 –CH3 43 11,9 - - - 18’ 11,2 –CH3 Trang 41 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 42 2.5.3 Khaûo saùt caáu truùc hoùa hoïc cuûa hợp chất BALE-2 Hôïp chaát BALE-2 thu ñöôïc töø phaân ñoaïn EC42 cuûa cao eter daàu hoûa trong baûng 2.4 vôùi caùc ñaëc ñieåm sau: * Daïng boät, maøu traéng. * Ñieåm noùng chaûy: 61-620C (keát tinh trong cloroform). * Saéc kyù lôùp moûng giaûi ly baèng heä dung moâi eter daàu hoûa : acetat etyl (8:2), vôùi thuoác thöû hieän hình laø H2SO4 ñaäm ñaëc, saáy baûn ôû nhieät ñoä cao cho moät veát maøu vaøng naâu, coù giaù trò Rf = 0,34 ( hình 2.3a). * Phoå EI-MS (-) (phuï luïc soá 9) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 269 [M-H]- öùng vôùi coâng thöùc phaân töû C17H34O2 (M = 270 ñ.v.C) * Phoå 1H – NMR, CDCl3, (phuï luïc soá 7a, 7b), δppm: 2,34 (2H, t, J= 7,5, -CH2-, H-2); 1,63 (2H, m,-CH2-, H-16); 0,88 (3H, t, J=7,0, H-17). * Phoå 13C-NMR, CDCl3, (phuï luïc soá 8a, 8b, 8c) δppm: 179,2 (-COOH, C- 1); Caùc tín hieäu coøn laïi naèm ôû vuøng tröôøng cao töø : δppm: 14-34 ñaây laø caùc Csp3. Bieän luaän caáu truùc Treân phoå proton xuaát hieän caùc tín hieäu ñaëc tröng ôû vuøng tröôøng δppm: 2,34 (2H, t, J= 7,5, -CH2-, H-2); 1,63 (2H, m,-CH2-, H-16); 0,88 (3H, t,-CH3, J=7,0, H-17). Phoå 13C–NMR (phuï luïc soá 8) cho thaáy coù 1 carbon carboxyl ôû δppm = 179,2; caùc tín hieäu coøn laïi xuaát hieän ôû vuøng tröôøng cao töø δppm: 14-34. Vaäy coù theå ñaây laø 1 acid beùo no, coù daïng toång quaùt CH3-(CH2)n-COOH Phoå MS cho moät muõi ion phaân töû ôû m/z = 269,4 [M-H]-, töông öùng M=270. Tính toaùn giaù trò khoái löôïng caùc maûnh trong hôïp chaát nhö sau CH3-(CH2)n-COOH 15 + 14n + 45 = M = 270 n = 210/14 = 15 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Vaäy hôïp chaát BALE-2 laø acid heptadecanoic, vôùi caáu truùc hoùa hoïc nhö sau: CH3 CH2 COOH 15 117 Acid heptadecanoic (BALE-2) 2.5.4 Khaûo saùt caáu truùc hoùa hoïc cuûa hôïp chaát BALE-3 Hôïp chaát BALE-3 thu ñöôïc töø phaân ñoaïn EC42 cuûa cao eter daàu hoûa trong baûng 2.4 vôùi caùc ñaëc ñieåm sau: * Daïng boät, maøu traéng. * Ñieåm noùng chaûy : 36-40ºC (keát tinh trong cloroform). * Saéc kyù lôùp moûng giaûi ly baèng heä dung moâi eter daàu hoûa : acetat etyl (8:2), vôùi thuoác thöû hieän hình laø H2SO4 ñaäm ñaëc, saáy baûn ôû nhieät ñoä cao cho moät veát maøu vaøng naâu, coù giaù trò Rf = 0,34 ( hình 2.2a). * Phoå EI-MS(+) (phuï luïc soá 12) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 269,5 [M+H]+ öùng vôùi coâng thöùc phaân töû C19H40 (M = 268 ñ.v.C) * Phoå 1H–NMR, CDCl3, (phuï luïc soá 10a, 10b), δppm: 2,34 (2H, t, -CH2-, J= 7,5); 1,63 (3H, m,-CH3); 0,88 (3H, t, -CH3, J=7,0). * Phoå 13C-NMR, CDCl3, (phuï luïc soá 11a, 11b) Caùc tín hieäu naèm ôû vuøng tröôøng cao töø : δppm: 14-34 ñaây laø caùc Csp3. Bieän luaän caáu truùc Treân phoå proton cuõng xuaát hieän caùc tín hieäu ñaëc tröng ôû vuøng tröôøng cao ôû δppm: töø 0,68 ñeán 2,35, trong ñoù ôû 2,34 (2H, t, -CH2-, J= 7,5); 1,63 (3H, m, -CH3); 0,88 (3H, t, -CH3, J=7,0). Phoå 13C -NMR (phuï luïc soá 11a,11b) cuõng cho thaáy caùc tín hieäu xuaát hieän ôû vuøng tröôøng cao töø δppm: 14-34. Vaäy coù theå ñaây laø moät alcan beùo, coù daïng toång quaùt CH3-(CH2)n-CH3 Phoå MS cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 269,5 [M+H]+, töông öùng M=270. Tính toaùn giaù trò khoái löôïng caùc maûnh trong hôïp chaát nhö sau: Trang 43 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa CH3-(CH2)n-CH3 15 + 14n + 15 = M =268 n = 238/14 = 17 Vaäy hôïp chaát BALE-3 laø nonadecan, vôùi caáu truùc hoùa hoïc nhö sau: CH3 CH2 CH317 119 Nonadecan (BALE-3) 2.5.5 Khaûo saùt caáu truùc hoùa hoïc cuûa hôïp chaát BALC-1 Hợp chất BalC-1 thu được từ phân đoạn CB2.2 của Bảng 2.7, có các đặc điểm sau: ٭ Có dạng bột, màu trắng. Điểm nóng chảy : 300 – 303oC (kết tinh trong metanol). ٭ ٭ SKLM cho giải ly bằng hệ dung môi cloroform : metanol (9 : 1), hiện hình bằng acid H2SO4 50%, sấy bản ở 110oC cho 1 vết màu tím có giá trị Rf = 0,8 (Hình 2.3b). * Phoå LC-MS (+) (phuï luïc soá 19) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 127,0527 [M+H]+ öùng vôùi coâng thöùc phaân töû C6H6O3 (M = 126,0316 ñ.v.C), vôùi sai soá laø 13 0/00. ٭ Phổ 1H–NMR, Pyridine-d5 (Phụ lục 13a, 13b), δppm: 9,59 (1H, s, –CH=O); 7,40 (1H, d, J = 3,5 Hz, –CH=, H–3); 6,63 (1H, d, J = 3,5 Hz, =CH–, H–4); 4,57 (2H, s, –CH2–OH). ٭ Phổ 13C–NMR kết hợp với DEPT–NMR, Pyridine-d5 (Phụ lục 14 và Phụ lục 15), δppm: 178,5 (1C, –CH=O); 4 carbon thơm vòng furan δppm : 157,5 (=C<, C– 5); 152,5 (=C<, C–2); 123,7 ( =CH–, C–3); 112,3 (=CH–, C–4); 1 carbon mang nhóm hydroxyl δppm: 64,1 (–CH2–OH). ٭ Phổ COSY (phụ lục 16a, 16b) ٭ Phổ HSQC và HMBC (Phụ lục 17 và Phụ lục 18). Trang 44 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Biện luận cấu trúc: Phổ 1H–NMR cho thấy một tín hiệu của proton nhóm aldehyd tại δppm: 9,59 (1H, s). Tương ứng phổ 13C–NMR cho 1 tín hiệu carbon của nhóm aldehyd tại δppm: 178,5; 1 carbon carbinol δppm : 64,1 và 4 tín hiệu carbon thơm của vòng furan. Những số liệu này cho phép dự đoán BALC-1 có vòng furan gắn với 1 nhóm aldehyd và 1 nhóm hydroxymetyl. So sánh số liệu phổ của BALC-1 với 5–hydroxymetylfurfural[15] (Bảng 2.19) cho thấy có sự tương hợp, vậy hợp chất BALC-1 là 5–hydroxymetylfurfural. O CHHOH2C O1 2 34 5 5-Hydroxymetylfurfural (BALC-1) Bảng 2.17. Số liệu phổ NMR của hợp chất BALC-1 so sánh với tài liệu tham khảo[16] BALC-1 (Pyridine-d5) HMBC (1H 13C) Tài liệu [15] (CDCl3) Vị trí carbon δH (ppm); J (Hz) δC (ppm) 2 152,5 152,1 3 7,40 (1H, d, =CH–, J = 3,5) 123,7 C–2; C–5 123,9 4 6,63 (1H, d, =CH–, J = 3,5) 112,3 C–2; C–5 110,1 5 157,5 161,4 –CH=O 9,59 (1H, s) 178,5 C–2 178,0 –CH2OH 4,57 (1H, s) 64,1 C–4; C–5 57,2 → Trang 45 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 46 2.5.6 Khaûo saùt caáu truùc hoùa hoïc cuûa hôïp chaát BALC-2 Hợp chất BalC-2 thu được từ phân đoạn CB2.3 của Bảng 2.7, có các đặc điểm sau: ٭ Có dạng bột, màu nâu. ٭ Điểm nóng chảy : 320 – 323oC (kết tinh trong metanol). ٭ SKLM cho giải ly bằng hệ dung môi cloroform : metanol (9 : 1), hiện hình bằng acid H2SO4 50%, sấy bản ở nhieät ñoä cao cho 1 vết màu tím có giá trị Rf = 0,5 (Hình 2.3b). * Phoå LC-MS (+) (phuï luïc soá 25) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 289,0741 [M+K]+ öùng vôùi coâng thöùc phaân töû C12H10O6 (M = 250,0477 ñ.v.C), vôùi sai soá laø 60 0/00 ٭ Phổ 1H–NMR, CDCl3 (Phụ lục 19a, 19b), δppm: 9,60 (1H, s, –CH=O); 7,20 (1H, d, J = 3,5 Hz, –CH=, H–3); 6,51 (1H, d, J = 3,5 Hz, =CH–, H–4); 4,72 (2H, s, –CH2–OH). ٭ Phổ 13C–NMR kết hợp với DEPT–NMR, CDCl3 (Phụ lục 20 và Phụ lục 21), δppm: 177,5 (1C, –CH=O); 4 carbon thơm vòng furan δppm : 160,4 (=C<, C–5); 152,6 (=C<, C–2); 109,9 ( =CH–, C–3); 109,9 (=CH–, C–4); 1 carbon mang nhóm hydroxyl δppm: 57,7 (–CH2–OH). ٭ Phổ HSQC và HMBC (Phụ lục 22 và Phụ lục 23). Biện luận cấu trúc: So sánh số liệu phổ NMR của BALC-2 với BALC-1 (Bảng 2.20) cho thấy có sự tương hợp. Tuy nhiên có hai đặc điểm khác biệt giữa hai hợp chất là. Dựa trên kết quả sắc ký lớp mỏng, trên cùng một hệ dung ly cloroform:metanol (9:1), vết của BALC-2 có Rf= 0,5 trong khi đó vết của BALC-1 có Rf= 0,8; được trình bày trong hình 2.3b. Phổ LC-MS (+), nếu hợp chất BALC-2 có giá trị của m/z = 289,0741 thì hợp chất BALC-1 có giá trị m/z = 127,0527 vậy BALC-2 có thể là một dimer của 5–hydroxymetylfurfural. Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa O CHH2C O1 2 34 5 OOH2C O 1' 5' 4'3' 2' HCO Dimer cua 5-hydroxymetylfurfural (BALC-2) 2.5.7 Khaûo saùt caáu truùc hoùa hoïc cuûa hôïp chaát BALM-1 Hôïp chaát BALM-1 thu ñöôïc töø cao metanol vôùi caùc ñaëc ñieåm sau: * Daïng bột rắn, maøu traéng. * Saéc kyù lôùp moûng pha thöôøng, giaûi ly vôùi heä dung moâi cloroform : metanol : nöôùc (20:6: 1), hieän hình vôùi thuoác thöû H2SO4, cho moät veát troøn coù maøu tím than. Saéc kyù lôùp moûng pha ñaûo C-18, giaûi ly vôùi heä metanol : nöôùc (7:3), cho 1 veát troøn roõ maøu tím than ôû Rf= 0,25 (hình 2.3d). Vaäy BALM-1 coù theå laø một saponin. * Phoå LC-MS (-) (phuï luïc soá 32) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 845 [M-2H2O-H]- öùng vôùi coâng thöùc phaân töû C43H68O14 (M = 808 ñ.v.C) * Phoå 1H–NMR, (CDCl3 + CD3OD), (phuï luïc soá 26); phoå 13C vaø DEPT-NMR, CDCl3 vaø CD3OD, (phuï luïc soá 27,28) coù caùc tín hieäu ñöôïc trình baøy trong baûng 2.21. Bảng 2.18. Số liệu phổ NMR của hợp chất BALC-2 so sánh với hợp chất BALC-1. BALC-2 (CDCl3) HMBC (1H 3C) BALC-1 (pyridine-d5)Vị trí carbon δH (ppm); J (Hz) δC (ppm) 2 152,6 152,5 3 7,40 (1H, d, =CH–, J = 3,5) 122,1 C–2; C–5 123,7 4 6,63 (1H, d, =CH–, J = 3,5) 109,9 C–2; C–5 112,3 5 160,4 157,5 –CH=O 9,59 (1H, s) 178,5 C–2 178,5 –CH2OH 4,57 (1H, s) 57,7 C–4; C–5 64,1 → Trang 47 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 48 Bieän luaän caáu truùc Treân phoå proton cuõng xuaát hieän caùc tín hieäu ñaëc tröng cho phaàn aglycon laø acid oleanolic nhö caùc muõi ôû δppm: 5,27 (1H, =CH-) ñaëc tröng cho noái ñoâi >C=CH-; 3,17 (1H, dd, >CH-OH) cuûa H-3; 2,82 (1H, dd, >CH-) cuûa H-18; 3,8 (-O-CH3) cuûa nhoùm -O-CH3 gaén vaøo C-6’ cuûa acid glucuronic . ÔÛ vuøng tröôøng cao töø 1,50 - 0,70 ppm cuõng coù tín hieäu coäng höôûng cuûa 7 nhoùm -CH3. Ngoaøi ra treân phoå 1H-NMR coøn nhaän thaáy caùc muõi ñoâi ñaëc tröng cho 2 proton anomer, xaùc nhaän söï coù maët cuûa 2 phaân töû ñöôøng ôû δppm = 4,39 (d, J=8, H-1’) vaø δppm = 4,34 (d, J=7,5, H-1’’). Keát hôïp vôùi phoå 13C vaø DEPT-NMR (phuï luïc soá 27, 28) tín hieäu ôû δppm =169,5 ñaëc tröng cho nhoùm -COOCH3 acid glucuronic; coù 2 carbon acetal töông öùng ôû δppm = 105,1 vaø 103,1; vaø caùc tín hieäu öùng vôùi 8 nhoùm >CH-OH vaø 1 nhoùm –CH2-OH trong vuøng töø 84,0 – 61,0 ppm phuø hôïp vôùi 2 phaân töû ñöôøng. Ngoaøi ra coøn coù caùc tín hieäu ôû δppm = 143,9 (>C=, H-13) vaø δppm = 121,3 (=CH-, H-12) ñaëc tröng cho noái ñoâi >C=CH- cuûa acid oleanolic; tín hieäu ôû δppm =180,6 ñaëc tröng cho nhoùm –COOH cuûa acid oleanolic ôû daïng töï do; Caùc phoå COSY, HSQC, HMBC (phuï luïc soá 29, 30, 31) giuùp xaùc ñònh vò trí noái cuûa caùc phaân töû ñöôøng vaøo phaàn aglycon. Theo ñoù, phaân töû ñöôøng glucose gaén vaøo phaân töû ñöôøng acid glucuronic ôû vò trí soá 4 vaø ñöôøng acid glucuronic gaén vaøo acid oleanolic ôû C-3. Phoå LC-MS (-) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 845 [M-2H2O-H]-. Nhö vaäy BALM-1 phuø hôïp vôùi caáu truùc laø moät glycosid vôùi phaàn aglycon laø acid oleanolic vaø phaàn ñöôøng goàm coù moät metyl ester cuûa acid glucuronic gắn tröïc tieáp vaøo aglycon vaø moät phaân töû glucose thöù 2 gắn vào acid glucuronic này tại C-4’. Khi so saùnh vôùi soá lieäu phoå cuûa hôïp chaát acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-6’-metyl- β-D-glucuronopyranosyloleanolic-28-O-metyl ester[14] (trình baøy trong baûng 2.15) thì thaáy coù söï töông hôïp. Nhö vaäy ñeà nghò hôïp chaát BALM-1 laø Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-6’-metyl-β-D-glucuronopyranosyloleanolic- 28-O-metyl ester. COOHCH3CH3 O H3C CH3 H H CH3 CH3 H1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 2930H3C O HO HOH H3COOC 1'2'3' 4' 5' 6' O O HO HO OH OH 1'' 2'' 3'' 4'' 5'' 6'' Acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-6’-metyl-Ο -β-D- glucuronopyranosyloleanolic (BALM-1) H HHMBC Hình 2.5: Một số tương quan HMBC của BALM-1 COOHCH3CH3 O H3C CH3 H H CH3 CH3 H1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 2930H3C O HO HOH H3COOC 1'2'3' 4' 5' 6' O O HO HO OH OH 1'' 2'' 3'' 4'' 5'' 6'' Acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-6’-metyl-Ο -β-D- glucuronopyranosyloleanolic (BALM-1) Baûng 2.19: Soá lieäu phoå NMR cuûa hôïp chaát BALM-1 vaø hôïp chaát so saùnh[14 ] Hôïp chaát BAL-M1 (CD3OD+CDCl3) Hôïp chaát so saùnh (pyridine-d5) No δΗ (ppm) (J-Hz) δC (ppm) HMBC (1H→13C) δΗ (ppm) (J-Hz) δC (ppm) Phaàn aglycon 1 38,5 38,5 2 25,7 26,5 3 3,17(1H, dd, 11,5/4,0) 90,3 C1’ 3,32(1H, dd 12,0/4,0) 89,3 4 39,0 37,9 5 55,5 55,7 6 18,1 C5 18,4 7 32,7 33,1 8 39,3 39,5 9 47,6 47,9 10 36,7 36,9 Trang 49 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 50 11 22,6 23,7 12 5,27 br s 122,3 C14 5,45 br 122,5 13 143,9 144,8 14 41,7 42,1 15 27,6 28,3 16 23,4 23,7 17 46,4 46,6 18 2,82(1H, dd, 13,5/3,5) 41,2 3,27(1H, dd, 13,5/3,5) 42,0 19 46,0 46,4 20 30,6 30,9 21 33,8 34,2 22 32,5 33,2 23 1,02 s 27,9 1,27 s 28,1 24 0,79 s 16,4 0,94 s 16,9 25 0,83 s 15,2 0,78 s 15,4 26 0,83 s 16,8 0,96 s 17,3 27 1,13 s 25,8 1.29 s 26,1 28 180,6 180,1 29 0,91 s 33,0 0,94 s 33,1 30 0,93 s 23,5 0,99 s 23,6 Phaàn ñöôøng 1’ 4,40 d (8,0) 105,2 C3, C2’ 4,96 d (8,0) 106,8 2’ 3,58 t (9,0) 74,5 4,08 t (9,0) 74,8 3’ 3,39 brd. 73,3 C1’ 4,26 t (9,0) 76,1 4’ 3,74 dd (9/9) 80,5 C6’, C1’’, C5’ 4,45 t (9,5) 82,6 5’ 3,95 d (9,5) 73,5 C1’, C4’, CH3O- 4,63 d (10,0) 75,5 6’ 169,5 170,0 3,8 s 3,86 s 52,4 1’’ 4,35 d (7,5) 103,1 C4’ 5,32 d (7,5) 105,0 2’’ 3,43 dd (12/5,5). 76,5 C3’’ 3,96 t (8,5) 74,4 3’’ 3,30 t (9,0) 72,9 C2’’, C4’’ 4,15 (9,0) 78,1 4’’ 3,72 dd (7/4) 73,7 C5’’, C6’’ 4,16 t (9) 71,6 5’’ 3,38 dt. 73,9 C1’’, C4’’, C6’’ 3,95 dt (8,5/3,0) 78,5 6’’ 3,88 d (2). 3,86 d (2). 61,2 4,51 dd (12/2,5) 4,23 d (6,5) 62,5 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 51 2.5.8 Khaûo saùt caáu truùc hoùa hoïc cuûa hôïp chaát BALM-2 Hôïp chaát BALM-2 thu ñöôïc töø cao metanol vôùi caùc ñaëc ñieåm sau: * Daïng boät raén, maøu traéng. * Saéc kyù lôùp moûng pha thöôøng, giaûi ly vôùi heä dung moâi cloroform : metanol : nöôùc (13 : 7 : 1), hieän hình vôùi thuoác thöû H2SO4, cho moät veát troøn coù maøu tím than. Saéc kyù lôùp moûng pha ñaûo C-18, giaûi ly vôùi heä metanol : nöôùc (7:3), cho 1 veát troøn roõ maøu tím than ôû Rf= 0,4 (hình 2.3d). * Phoå LC-MS(-) (phuï luïc soá 39) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 793 [M-glucose]- öùng vôùi coâng thöùc phaân töû C49H80O19 (M = 972 ñ.v.C) * Phoå 1H–NMR, pyridine-d5, (phuï luïc soá 33); phoå 13C vaø DEPT-NMR, pyridine-d5, (phuï luïc soá 34, 35) coù caùc tín hieäu ñöôïc trình baøy trong baûng 2.22. Bieän luaän caáu truùc Treân phoå proton cuõng xuaát hieän caùc tín hieäu ñaëc tröng cho phaàn aglycon laø acid oleanolic nhö caùc muõi ôû δppm : 5,42 (1H, =CH-) ñaëc tröng cho noái ñoâi >C=CH-; 3,56 (3H, s, -O-CH3) ñaëc tröng cho 3 proton cuûa nhoùm –O-CH3 gaén tröïc tieáp vaøo nhoùm >C=O cuûa acid glucuronic; 3,16 (1H, dd, >CH-OH) cuûa H-3; 2,28 (1H, dd, >CH-) cuûa H-18. ÔÛ vuøng tröôøng cao töø 1,50 - 0,70 ppm cuõng coù tín hieäu coäng höôûng cuûa 7 nhoùm -CH3. Ngoaøi ra treân phoå 1H-NMR coøn nhaän thaáy caùc muõi ñoâi ñaëc tröng cho 3 proton anomer, xaùc nhaän söï coù maët cuûa 3 phaân töû ñöôøng ôû δppm = 4,76 (d, J=7,0, H-1’); δppm = 5,29 (d, J=7.5, H-1’’) vaø δppm = 6,24 (d, J=8, H-1’’’), cho thaáy H-1’’’ gaén vaøo nhoùm COO-. Keát hôïp vôùi phoå 13C vaø DEPT-NMR (phuï luïc soá 34, 35) cuõng cho thaáy coù 3 carbon acetal töông öùng ôû δppm = 105,1; 104,7 vaø 95,8; tín hieäu ôû δppm = 176,45 ñaëc tröng cho nhoùm >C=O cuûa acid oleanolic ôû daïng ester, caùc tín hieäu öùng vôùi 12 nhoùm >CH-OH vaø 2 nhoùm –CH2-OH trong vuøng töø 84,0 – 62,0 ppm phuø hôïp vôùi 3 phaân töû ñöôøng, tín hieäu ñaëc tröng cho nhoùm –O-CH3 gaén vaøo nhoùm >C=O cuûa acid glucuronic ôû δppm = 49,7 . Ngoaøi ra coøn coù caùc tín hieäu ôû Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa δppm = 144,2 (>C=, H-13) vaø δppm = 123,1 (=CH-, H-12) ñaëc tröng cho noái ñoâi >C=CH- cuûa acid oleanolic. Caùc phoå COSY, HSQC, HMBC (phuï luïc soá 36, 37,38) giuùp xaùc ñònh vò trí noái cuûa caùc phaân töû ñöôøng vaøo phaàn aglycon. Theo ñoù, phaân töû ñöôøng glucose gaén vaøo phaân töû ñöôøng acid glucuronic ôû vò trí soá 4 vaø acid glucuronic naèm ôû daïng ester gaén vaøo acid oleanolic ôû C-3, ngoaøi ra coøn theâm phaân töû ñöôøng glucose gaén vaøo C28 cuûa acid oleanolic. Phoå LC-MS(-) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 793 [M-glucose]. Nhö vaäy BALM-2 phuø hôïp vôùi caáu truùc laø moät glycosid vôùi phaàn aglycon laø acid oleanolic vaø phaàn ñöôøng goàm coù moät phaân töû acid glucuronic vaø moät phaân töû glucose gắn tröïc tieáp vaøo aglycon vaø moät phaân töû glucose thöù ba. Khi so saùnh vôùi soá lieäu phoå NMR cuûa hôïp chaát BALM-2 vôùi acid 3-O-β- D-glucopyranosyl-(1→4)-6’-metyl-O-β-D-glucuronopyranosyloleanolic 28-O-β- D-glucopyranosyl ester[12] (trình baøy trong baûng 2.22) thì thaáy coù söï töông hôïp. Nhö vaäy ñeà nghò hôïp chaát BALM-2 laø acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-6’- metyl-O-β-D-glucuronopyranosyloleanolic 28- O-β-D-glucopyranosyl ester. 6'' 5''4'' 1''2'' 3'' O C O HO HOO C H O HO HOHO OH H 2324 26 11 3 21 10 25 5 13 18 1 64 7 8 17 27 28 5' 1'2' 3' 6' 4' 12 O OCH3 O O Acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1 4)-6'-metyl-β-D-glucuronopyranosyloleanolic 28-O-β-D-glucopyranosyl ester (BALM-2) O HO HOHO OH H 6''' 5'''4''' 1'''2''' 3''' HMBC Hình 2.6: Một số tương quan HMBC của BALM-2 Trang 52 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa 6'' 5''4'' 1''2'' 3'' O C O HO HOO C H O HO HOHO OH H 2324 26 11 3 21 10 25 5 13 18 1 64 7 8 17 27 28 5' 1'2' 3' 6' 4' 12 O OCH3 O O Acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1 4)-6'-metyl-β-D-glucuronopyranosyloleanolic 28-O-β-D-glucopyranosyl ester (BALM-2) O HO HOHO OH H 6''' 5'''4''' 1'''2''' 3''' Baûng 2.20: Soá lieäu phoå NMR cuûa hôïp chaát BALM-2 vaø hôïp chaát so saùnh Hôïp chaát BALM-2 (pyridine-d5) Hôïp chaát so saùnh[12] (pyridine-d5) No δΗ (ppm) (J-Hz) δC (ppm) HMBC (1H→13C) δΗ (ppm) (J-Hz) δC (ppm) Phaàn aglycon 1 38,8 38,7 2 26,4 26,2 3 3,16 m 89,8 C1’ 3,32 m 89,3 4 38,8 39,5 5 55,9 55,9 6 18,7 18,5 7 32,7 33,3 8 40,0 39,8 9 48,1 48,0 10 37,0 37,0 11 23,5 23,8 12 5,42 s 123,0 C9, C14, C18 5,18 m 122,6 13 144,2 144,9 14 42,3 42,2 15 28,3 28,3 16 23,9 23,8 17 47,1 46,7 18 41,9 42,1 Trang 53 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Trang 54 19 46,4 46,6 20 30,8 31,0 21 34,2 34,3 22 33,2 33,3 23 1,20 s 28,2 1,00 s 28,3 24 1,04 s 16,8 0,79 s 17,0 25 0,85 s 15,6 0,94 s 15,5 26 1,06 s 17,6 0,97 s 17,5 27 1,27s 26,2 1.13 s 26,2 28 176,5 180,3 29 0,92 s 33,2 0,87 s 33,3 30 0,90 s 23,8 0,87 s 23,8 Phaàn ñöôøng 1’ 4,76 d (7,0) 104,7 C3 4,59 d (7,8) 106,6 2’ 3,95 brd 77,9 C1’, C3’ 4,07 dd (7,8/8,7) 74,9 3’ 4,32 brd. 76,8 C2’, C4’ 4,25 dd (8,7/8,7) 76,7 4’ 4,29 brd 83,1 C1’’, C5’ 4,44 dd (8,7/9,7) 82,7 5’ 4,13 t (8,0) 74,2 C4’, C6’ 4,62 d (9,7) 74,9 6’ 175,7 171,6 1’’ 5,29 d (7,5) 105,1 C4’ 5,01 d (8,0) 104,6 2’’ 3,96 t (6,5) 74,9 C1’’, C3’’ 3,95 dd (8,0/8,5) 73,6 3’’ 3,93 brd 77,8 C2’’, C4’’ 4,13 dd (8,5/8,7) 77,7 4’’ 3,98 brd 71,4 C5’’, C6’’ 4,11 dd (8,7/8,5) 71,5 5’’ 4,12 t (8,0) 78,9 C1’’, C4’’, C6’’ 3,95 ddd (8,5/2,2/5,6) 78,4 6’’ 4,307 m. 4,23 m. 62,5 C4’’, C5’’ 4,50 dd (2,2/11,4) 4,21 dd (5,6/11,4) 62,5 1’’’ 6,23 d (8,0) 95,8 C28,C3’’’ 6,17 d(8,0) 95 2’’’ 4,14 t (8,0) 77,5 4,45 dd (8,1/9,0) 73 3’’’ 3,96 t (9) 79,1 4,29 dd (9,0/8,3) 77,5 4’’’ 4,22 m 78,1 4,26 dd (8,3/8,7) 77,5 5’’’ 4,12 d (8,0) 72,1 3,86 ddd (8,7/3,5/ 5,6) 78,2 6’’’ 4,41 m 3,38 m 63,1 4,28 dd (3,2/11,5) 4,14 dd (3,4/9,0) 61,4 2.5.9 Khaûo saùt caáu truùc hoùa hoïc cuûa hôïp chaát BALM-3 Hôïp chaát BALM-3 thu ñöôïc töø cao metanol vôùi caùc ñaëc ñieåm sau: * Daïng boät raén, maøu traéng. * Điểm nóng chảy 249-250oC (kết tinh trong metanol). Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa * Saéc kyù lôùp moûng pha thöôøng, giaûi ly vôùi heä dung moâi cloroform : metanol : nöôùc (13 : 7 : 1), hieän hình vôùi thuoác thöû H2SO4, cho moät veát troøn coù maøu ñen. Saéc kyù lôùp moûng pha ñaûo C-18, giaûi ly vôùi heä metanol : nöôùc (7:3), cho 1 veát troøn roõ maøu ñen ôû Rf= 0,75 (hình 2.3d). * Phoå LC-MS(+) (phuï luïc soá 46) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 347,1072 [M+ Na]+ öùng vôùi coâng thöùc phaân töû C12H20O10 (M = 324,10598 ñ.v.C), vôùi sai soá 120/00. * Phoå 1H – NMR, pyridine-d5, (phuï luïc soá 40), δppm: 4,98 (1H, dd, J=7/6,5,>CH- OH, H4’); 4,71 (1H, d, J=7, >CH-OH , H3’ ); 4,50 (1H, m, >CH-OH, H5); 4,46 (1H, m, >CH-OH, H5’); 4,43(2H, m, -CH2-O-, H6); 4,03 (2H, dd, -CH2-O-, H6’). * Phoå 13C vaø DEPT-NMR, pyridine-d5, (phuï luïc soá 41,42) δppm: 102,08 (-O-CH-O, C-2); 97,86 (-O-CH-O, C-2’); 84,80 (>CH-OH, C-5); 83,16 (>CH-OH, C-3’); 77,49 ( >CH-OH, C-4’); 74,11 ( >CH-OH, C-4)); 71,17 (>CH-OH, C-5’); 70,45 (>CH-OH, C-3); 66,53 ( -CH2-O-, C-6); 65,47 (-CH2-O-, C-1); 64,63 ( - CH2-O-, C-6’); 63,74 ( -CH2-O-, C-1’). Bieän luaän caáu truùc Treân phoå proton (phuï luïc soá 40) cho thaáy söï xuaát hieän caùc tín ñaëc tröng cuûa caùc phaân töû ñöôøng ôû vuøng tröôøng thaáp töø 4,01-4,96 δppm. Khoâng thaáy xuaát hieän caùc proton anomer. Phoå 13C vaø DEPT-NMR (phuï luïc soá 41, 42) cuõng cho thaáy coù 2 carbon cetal töù caáp töông öùng ôû δppm = 102,08 vaø 97,86; caùc tín hieäu öùng vôùi 6 nhoùm >CH-OH vaø 4 nhoùm –CH2-OH trong vuøng töø 84,80 – 63,74 ppm phuø hôïp vôùi 2 phaân töû ñöôøng. Caùc phoå COSY, HSQC, HMBC (phuï luïc soá 43, 44, 45) giuùp xaùc ñònh vò trí noái giöõa caùc phaân töû ñöôøng. Theo ñoù, phaân töû ñöôøng α -L- sorbopyranose gaén vaøo phaân töû ñöôøng β -L- sorbopyranose ôû vò trí soá 1 vôùi 2’ vaø 2 vôùi 1’ naèm ôû daïng eter. Trang 55 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Phoå LC-MS(+) (phuï luïc soá 46) cho muõi ion phaân töû ôû m/z = 347,1072 [M+ Na]+ öùng vôùi coâng thöùc phaân töû C12H20O10 (M = 324,10598 ñ.v.C); vôùi sai soá 120/00. Nhö vaäy hôïp chaát BALM-3 coù theå laø moät trong saùu caáu truùc trình baøy nhö hình 2.7. H2C O OH OH OH H2C O O CH2 O CH2 OH OH OH β-D-Fructopyranose α-D-sorbopyranose 1,2':2,1' 4580C (A) H2C O OH OH OH H2C O O CH2 O H2 C OH OH OH 4580C (B) β-D-Fructopyranose α-L-sorbopyranose 1,2':2,1' H2C O OH OH OH H2C O H2C O OH OH OH CH2 O β-D-fructopyranose β-D-fructopyranose 1,2':2,1' 4500C (C) H2C O OH OH OH O CH2 H2C O OH OH OH H2C O α-D-fructopyranose β-D-fructopyranose 1,2':2,1' 4580C (D) H2C O HO OH OH O CH2 H2C O O CH2 OH OH OH α-D-Sorbopyranose α-L-sorbopyranose 1,2':2,1' 3200C (E) α-L-Sorbopyranose β-L-sorbopyranose 1,2':2,1' 249-2500C (F) H2C OHO OH OH CH2 O H2 C OHO OH OH O CH2 Hình 2.7: Các cấu trúc hóa học và nhiệt độ nóng chảy[38] của sáu hợp chất có thể có của BALM-3 Trang 56 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Khi so saùnh vôùi soá lieäu phoå NMR của hợp chất BALM-3 và nhiệt độ nóng chảy của BALM-3 (249-2500C) với số liệu phổ cuûa hôïp chaát α -L-sorbopyranose β -L-sorbopyranose 1,2’:2,1’-dianhydride (F) và nhiệt độ nóng chảy thì thaáy coù söï töông hôïp. Nhö vaäy ñeà nghò hôïp chaát BALM-3 laø α -L-Sorbopyranose β -L-sorbopyranose 1,2’:2,1’-dianhydride. O O OH H OH H OH H H OCH2 O CH2 OH H HO H HO H H H 1 2 3 4 5 6 1' 2' 3' 4' 5' 6' (S)(R) H α−L-Sorbopyranose β-L-sorbopyranose 1,2':2,1'-dianhydride Hình 2.8 : Một số tương quan HMBC của hợp chất BALM-3 O O OH H OH H OH H H OCH2 O CH2 OH H HO H HO H H H 1 2 3 4 5 6 1' 2' 3' 4' 5' 6' (S)(R) H α−L-Sorbopyranose β-L-sorbopyranose 1,2':2,1'-dianhydride (BALM-3) Trang 57 Khaûo saùt thaønh phaàn hoùa hoïc rễ caây Ñinh laêng laù troøn Polyscias balfouriana Bail. Hoïc vieân Cao hoïc: Baïch Thanh Luïa Baûng 2.21: Soá lieäu phoå NMR cuûa hôïp chaát BALM-3 vaø caùc hôïp chaát so saùnh[38] Hôïp chaát BALM-3 (Pyridine-d5) α -L-Sorbopyranose β -L-sorbopyranose 1,2’:2,1’-dianhydride (acetate hexyl) No Loaïi carbon δΗ (ppm) (J-Hz) δC (ppm) HMBC (1H→13C) δC (ppm) 1 -O-CH2- 4,17 d (4,5) 4,11 s 65,5 C2,C2’ 63,0 2 OC Trang 58 O 102,1 96 3 >CH-OH 4,30 d (12,0) 70,5 C2 74,1 4 >CH-OH 4,47 m 74,1 C2 72,5 5 >CH-OH 4,50 m 84,8 72,4 6 -O-CH2- 4,44 d (4,5) 4,14 d (5,0) 66,5 C2,C4 62,7 1’ -O-CH2- 4,26 d (4,0) 4,23 d (3,5) 63,7 C2, C2’,C3’ 62,3 2’ OC O 97,9 95,9 3’ >CH-OH 4,70 d (7,0) 83,2 C1’,C4’ 72,0 4’ >CH-OH 4,89 t (7,0) 77,5 C3’,C6’ 70,0 5’ >CH-OH 4,46 m 77,2 69,1 6’ -O-CH2- 4,20 d (12,0) 4,03 dd (12/1) 64,6 C2’, C5’ 59,6