MỤC LỤC
Chương 1 MỞ ĐẦU 1
1.1 CÂY LÚA Ở VIỆT NAM .1
1.2 RƠM RẠ 2
1.2.1 Nguồn rơm rạ ở Việt Nam 2
1.2.2 Hiện trạng sử dụng năng lượng từ rơm rạ ở Việt Nam 3
1.3 BIOETHANOL TỪ RƠM RẠ 3
1.4 MỤC TIÊU VÀ NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 4
Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU .5
2.1 NGUYÊN LIỆU LIGNOCELLULOSE .5
2.1.1 Cấu trúc lignocellulose .5
2.1.2 Cellulose .6
2.1.3 Hemicellulose .8
2.1.4 Lignin .10
2.1.5 Các chất trích ly 12
2.1.6 Tro 13
2.2 QUÁ TRÌNH SẢN XUẤT ETHANOL TỪ RƠM RẠ .13
2.2.1 Tổng quát 13
2.2.2 Tiền xử lý 14
2.2.3 Thủy phân .20
2.2.4 Lên men 33
2.2.5 Thủy phân và lên men đồng thời 38
2.3 SƠ LƯỢC VỀ BIOFUEL VÀ ETHANOL NHIÊN LIỆU 44
2.3.1 Biofuel 44
2.3.2 Ethanol nhiên liệu .45
Chương 3 THỰC NGHIỆM 48
3.1 NGUYÊN LIỆU VÀ HÓA CHẤT 48
3.1.1 Rơm rạ 48
3.1.2 Enzyme .48
3.1.3 Giống nấm men 49
3.2 CÁC THIẾT BỊ SỬ DỤNG .49
3.3 CÁC PHƯƠNG PHÁP SỬ DỤNG .52
3.3.1 Phương pháp phân tích thành phần xơ sợi trong biomass – rơm rạ .52
3.3.2 Phương pháp đo nồng độ glucose và ethanol .56
3.3.3 Phương pháp xác định độ ẩm của nguyên liệu .63
3.3.4 Phương pháp nuôi cấy và đếm nấm men 64
3.4 TRÌNH TỰ NGHIÊN CỨU .66
3.4.1 Sơ đồ quy trình .67
3.4.2 Quá trình nổ hơi – tiền xử lý rơm rạ .67
3.4.3 Quá trình thủy phân 68
3.4.4 Quá trình thủy phân và lên men đồng thời .69
Chương 4 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .71
4.1 PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN RƠM RẠ 71
4.1.1 Thành phần rơm rạ trước nổ hơi .71
4.1.2 Thành phần rơm rạ sau nổ hơi 72
4.1.3 So sánh rơm rạ trước và sau nổ hơi 72
4.1.4 Thành phần dịch nổ hơi 74
4.2 QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN .76
4.2.1 Thành phần dịch thủy phân 76
4.2.2 Ảnh hưởng của phần trăm bã rắn .77
4.2.3 Ảnh hưởng của lượng enzyme cho vào 79
4.2.4 Ảnh hưởng của pH .84
4.2.5 Ảnh hưởng của nhiệt độ .87
4.2.6 Hiệu suất thủy phân , nồng độ đường tạo thành theo thời gian 92
4.3 QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN VÀ LÊN MEN ĐỒNG THỜI 94
4.3.1 Thành phần dịch thủy phân và lên men đồng thời .94
4.3.2 Ảnh hưởng của lượng emzyme cho vào .95
4.3.3 Ảnh hưởng của mật độ nấm men ban đầu 98
4.3.4 Hiệu suất toàn quá trình theo thời gian 101
Chương 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 104
5.1 KẾT LUẬN QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN .104
5.2 KẾT LUẬN QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN VÀ LÊN MEN ĐỒNG THỜI .104
5.3 SO SÁNH HIỆU SUẤT TOÀN QUÁ TRÌNH CỦA THỦY PHÂN VỚI THỦY
PHÂN VÀ LÊN MEN ĐỒNG THỜI .105
5.4 ĐỀ NGHỊ .105
TÀI LIỆU THAM KHẢO 106
PHỤ LỤC 108
121 trang |
Chia sẻ: banmai | Lượt xem: 2529 | Lượt tải: 1
Bạn đang xem trước 20 trang tài liệu Đề tài Nghiên cứu sản xuất ethanol từ nguyên liệu rơm rạ, để xem tài liệu hoàn chỉnh bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
hơi, toàn bộ cấu trúc đã bị phá vỡ, có thể quan sát thấy các sợi nhỏ trong rơm rạ. Quá
trình nổ hơi sử dụng tác động hoá hơi độ ngột của nước phá vỡ cấu trúc xơ sợi. Như vậy,
sau quá trình nổ hơi, xơ sợi và cellulose bị xé nhỏ và sẽ dễ bị tấn công bởi enzyme. Chính
điều này giúp cho quá trình thủy phân rơm rạ bằng enzyme diễn ra dễ dàng hơn.
4.1.4 Thành phần dịch nổ hơi.
Dịch nổ hơi được lọc bằng giấy lọc, sau đó dịch lọc được lọc tiếp bằng phễu lọc có
kích thước lỗ 20μm và đo bằng máy HPLC, kết quả thành phần được trình bày trong bảng
sau
Bảng 4-5 Thành phần dịch nổ hơi
STT Thời gian lưu (phút) Chất Thời gian lưu chất chuẩn
1 5,321
2 5,729
3 6,041 acid oxalic 5,958
4 6,649 cellobiose 6,506
5 7,232
6 7,859 xylose 7,993
7 8,536 arabinose 8,525
8 9,532 acid citric 9,689
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
75
9 10,238
10 11,015 acid acetic 11,108
11 12,221
12 13,344
13 14,286
14 18,033
15 20,422 Hydroxymethyl fufural
16 21,733
17 30,412 Fufural
NHẬN XÉT
Dịch nổ hơi có 17 chất, trong đó có 8 chất là có thể giải đoán được. Xylose được xác
định bằng phương pháp thêm chuẩn vào mẫu.
Dịch nổ hơi có màu vàng, đó là do xylan. Xylan là các olygomer của xylose, tạo
thành từ quá trình thủy phân hemicellulose.
Trong dịch nổ hơi có chứa các acid: acid oxalic, acid acetic, acid citric. Cụ thể là pH
của dịch nổ hơi cho thấy môi trường acid yếu, pH=4,9. Trong thiết bị nổ hơi, nhiệt độ và
áp suất cao, nước sẽ thủy phân các nhóm acetyl trong hemicellulose để tạo các acid gây ra
môi trường acid trong toàn khối nguyên liệu. Môi trường acid lại thúc đẩy việc thủy phân
của hemicellulose vì polysaccharide này không bền trong môi trường acid ở điều kiện
nhiệt độ và áp suất cao. Ngoài ra dịch nổ hơi còn có các đường: cellobiose, mannose,
arabinose, xylose. Các đường này tạo thành là do hemicellulose và cellulose bị thủy phân
trong quá trình nổ hơi. Sự giảm khối lượng của cellulose, hemicellulose và sự tạo thành
của các đường 5, đường 6 trong dịch nổ hơi chứng minh cho những điều trình bày trên.
Ngoài ra, quá trình nổ hơi còn tạo thành fufural và hydoxymethyl fufural tương ứng
từ xylose và glucose. Đây là một nhược điểm của quá trình nổ hơi vì fufural và
hydroxymethyl fufural gây ức chế hoạt động của nấm men. Khi nhiệt độ và áp suất tăng,
khả năng tạo thành fufural và hydroxylmethyl fufural cũng tăng. Các peak hydroxymethyl
fufura và fufural lần lượt xuất hiện tại 20,422 và 30,412 (Theo giáo sư Mochidzuki – Đại
học Tokyo).
TÓM LẠI: trong quá trình tiền xử lý nổ hơi
- Hemicellulose bị phân hủy mạnh, tạo cấu trúc xốp cho xơ sợi. Đồng thời tạo các
acid, đường, fufural và các dẫn xuất của fufural.
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
76
- Cellulose cũng bị phân hủy nhưng với một lượng ít, cấu trúc cellulose trở nên xốp
hơn và dễ bị tấn công bởi enzyme hơn.
- Lignin bị phá vỡ cấu trúc, cắt nhỏ mạch, đồng thời một phần bị kết tụ lại, làm
giảm bớt tác dụng bao bọc cellulose, thuận lợi hơn co sự tấn công của enzyme.
4.2 QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN
Rơm sau nổ hơi được xác định hàm ẩm và tiến hành thủy phân.
Đối với quá trình thủy phân, 3 yếu tố xác định hiệu quả của quá trình là: nồng độ
glucose, hiệu suất tạo thành glucose và tốc độ phản ứng ban đầu. Nồng độ glucose tạo
thành và hiệu suất lớn nhất là 2 yếu tố chính để so sánh hiệu quả thủy phân của các điều
kiện khác nhau, tốc độ phản ứng ban đầu là yếu tố phụ.
4.2.1 Thành phần dịch thủy phân
Dịch thủy phân được lọc qua phễu lọc và đem đi phân tích HPLC. Kết quả được
trình bày ở bảng sau
Bảng 4-6 Thành phần dịch thủy phân
STT Thời gian lưu (phút) Chất Thời gian lưu chất
chuẩn (phút)
1 5,394
2 5,919 acid oxalic 5,984
3 6,316 Cellobiose 6,506
4 7,526 Glucose 7,558
5 8,043 Xylose 7,993
6 8,678 Arabinose 8,525
7
8 10,964 Acid acetic 11,108
9
NHẬN XÉT
Kết quả HPLC cho thấy, dịch thủy phân gồm 9 thành phần (với nồng độ đủ lớn để
có thể nhận ra nhờ máy HPLC). Trong đó có 6 chất là có thể giải đoán được. Quá trình
thủy phân cellulose sẽ tạo ra cellobiose và glucose. Phản ứng thủy phân hemicellulose sẽ
tạo ra xylose và arabinose. Vì acid acetic được sử dụng làm chất đệm cho dịch thủy phân
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
77
nên trong kết quả phân tích có xuất hiện acid acetic. Điều này cho thấy enzyme cellulase
thủy phân được cả cellulose và hemicellulose.
4.2.2 Ảnh hưởng của phần trăm bã rắn
Thực hiện khảo sát ảnh hưởng của lượng bã rắn cho vào lên quá trình thủy phân.
Các thí nghiệm được tiến hành ở điều kiện : nhiệt độ 50oC; pH: 4,8; % enzyme: 5%.
Lượng bã rắn cho vào và thời gian lấy mẫu được trình bày trong mục 3.4.3. Kết quả trình
bày trong bảng sau
Bảng 4-7 Kết quả ảnh hưởng của phần trăm bã rắn
STT % bã rắn
Nồng độ
đường(g/l)
Nồng độ
cellobiose (g/l)
Hiệu suất (%)
1 5 30,38 1,26 97,05
2 6 33,40 2,38 88,50
3 7 36,09 1,72 82,46
4 8 39,49 - 79,02
5 9 42,84 - 75,64
6 10 46,62 2,14 74,78
7 11 52,28 5,42 75,89
8 12 48,81 - 71,41
9 13 48,81 - 60,15
10 15 50,47 5,4 53,89
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
78
30.38
33.40
46.62
52.28
48.81 48.81
50.47
5.40
36.09
42.84
39.49
5.426.36
2.141.722.381.26
88.50
75.89
71.41
60.15
53.89
74.7875.64
97.05
82.46
79.02
0
10
20
30
40
50
60
4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
% baõ raén
N
oàn
g
ño
ä (g
/l)
0
20
40
60
80
100
120
H
ie
äu
su
aát
(%
)
Noàng ñoä glucose
Cellobiose
Hieäu suaát
Hình 4-6 Nồng độ glucose, cellobiose và hiệu suất thu được theo % bã rắn cho vào
NHẬN XÉT
Đối với cellobiose, khi % bã rắn thấp (từ 5% đến 10%), lượng cellobiose tích tụ
trong dung dịch sau 72 giờ nhỏ (<2,14 g/l). Khi % bã rắn tăng cao (từ 11% đến 15%)
lượng cellobiose tích tụ trong dung dịch nhiều và với giá trị hầu như không đổi theo % bã
rắn. Khi nồng độ chất rắn tăng, lượng cơ chất tăng nên cellobiose được tạo thành nhiều
hơn. Tuy nhiên, cellobiose là sản phẩm trung gian, bị tiêu thụ bởi enzyme β-glucosidase,
sự tích tụ cellobiose trong dung dịch sau thời gian dài cho thấy hoạt tính enzyme này bị
giảm đối với các % bã rắn cao. Vì glucose tạo thành nhiều ở các % bã rắn cao, gây tác
dụng ức chế đối với enzyme β-glucosidase.
Trong khoảng 5 -11% bã rắn, nồng độ glucose thu được trong dung dịch tăng từ 30g/l
đến 52,28g/l. Sau đó khi % bã rắn tăng từ 12% đến 15%, nồng độ glucose thu được giảm
và giá trị thay đổi không đáng kể. Nồng độ glucose lớn nhất thu được tại 11% bã rắn.
Thật vậy, khi nồng độ bã rắn tăng cao, lượng cellulose cũng tăng. Như vậy, lượng
cellulose có thể bị tấn công bởi enzyme sẽ tăng lên và kết quả là lượng glucose, cellobiose
trong dung dịch cũng tăng theo. Tuy nhiên, khi nồng độ chất rắn tăng quá cao, enzyme sẽ
bị bão hòa cơ chất, khả năng tác động của enzyme sẽ giảm và ảnh hưởng tới lượng
glucose tạo thành. Ngoài ra, cellobiose có tác dụng ức chế enzyme đặc biệt là
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
79
cellobiohydrolase, khi nồng độ cơ chất tăng cao đến một ngưỡng nhất định, lượng
cellobiose sinh ra sẽ có tác dụng ức chế enzyme cellulase, vì vậy hoạt tính enzyme này bị
giảm và lượng glucose sinh ra cũng bị giảm. Mặt khác, khi nồng độ chất rắn cao, dung
dịch đậm đặc, quá trình khuếch tán của enzyme trong toàn khối nguyên liệu sẽ rất khó
khăn dẫn đến phản ứng thủy phân diễn ra khó khăn, nồng độ glucose thu đuợc nhỏ.
Đối với hiệu suất, tương ứng % bã rắn tăng dần, hiệu suất giảm dần. Với cùng một
lượng enzyme, khi nồng độ chất rắn càng nhỏ, enzyme sẽ càng dễ tấn công do dung dịch
loãng, khả năng khuếch tán enzyme cao; cơ chất ít, enzyme có thể tác động triệt để hơn.
Ngoài ra, khi nồng độ bã rắn tăng, sản phẩm trung gian như cellobiose và sản phẩm cuối
cùng như glucose tạo thành nhiều, sẽ gây ra tác dụng ức chế lên enzyme cellulase
(cellobiosehydrolase) và β-glucosidase. Chính những lý do trên làm cho hiệu suất của quá
trình thủy phân giảm dần khi nồng độ cơ chất tăng.
Như vậy, đối với yếu tố này, hiệu suất và nồng độ glucose thu được là hai hàm nghịch
nhau, hiệu suất cao sẽ càng thu được ít glucose. Để đưa ra được kết luận về điểm tốt nhất
đối với yếu tố này cầng phải xem xét hai vấn đề. Thứ nhất, hiệu suất liên quan đến việc sử
dụng nguyên liệu hiệu quả. Thứ hai, nồng độ glucose liên quan đến quá trình sau, nồng độ
glucose càng lớn, quá trình lên men càng thu được nhiều ethanol và như vậy quá trình
chưng cất thu ethanol sẽ tiết kiệm hơn về mặt chi phí. Nguyên liệu – rơm rạ là một phế
phẩm nông nghiệp, giá thành thấp, trong lúc đó vấn đề năng lượng tiêu tốn cho quá trình
chưng cất lại đóng một vai trò quan trọng trong giá thành của bioethanol. Chính vì vậy,
vấn đề thứ hai cần được xem xét kĩ. Dựa trên sự thay đổi của nồng độ glucose theo nồng
độ chất rắn ban đầu, chọn 11% là nồng độ bã rắn thích hợp cho quá trình thủy phân.
4.2.3 Ảnh hưởng của lượng enzyme cho vào
Thực hiện khảo sát ảnh hưởng của lượng enzyme cho vào lên quá trình thủy phân. Các
thí nghiệm được tiến hành ở điều kiện : nhiệt độ 50oC; pH: 4,8; % bã rắn: 11%. Lượng
enzyme cho vào và thời gian lấy mẫu được trình bày trong mục 3.4.3. Kết quả trình bày
trong các đồ thị và bảng sau.
Bảng 4-8 Nồng độ glucose theo thời gian ứng với các % enzyme khác nhau
Nồng độ glucose (g/l)
Thời gian
1% enzyme 3% enzyme 5% enzyme 7% enzyme 9% enzyme
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
0,5 3,56 5,47 7,62 9,29 13,35
1 6,01 7,97 7,23 12,90 14,65
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
80
2 5,06 9,01 15,07 16,36 21,28
24 14,03 34,38 45,83 47,84 50,03
26,5 14,41 34,15 44,88 48,57 55,71
48 - - - 48,67 58,14
72 22,79 47,43 55,80 54,01 60,95
(*) Mẫu được lấy tại 26 giờ
0
10
20
30
40
50
60
0 10 20 30 40 50 60 70
Thôøi gian (giôø)
N
oàn
g
ño
ä (g
/l)
1%
3%
5%
7%
9%
Hình 4-7 Nồng độ glucose tạo thành theo thời gian tương ứng với các % enzyme
khác nhau
Bảng 4-9 Nồng độ cellobiose tạo thành theo thời gian ứng với % enzyme khác
nhau
Nồng độ cellobiose (g/l) Thời gian
(giờ) 1% enzyme 3% enzyme 5% enzyme 7% enzyme 9% enzyme
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
0,5 0,37 8,64 8,91 8,89 7,01
1 9,91 11,73 9,25 10,75 8,94
2 8,33 10,67 13,95 11,64 9,79
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
81
24 9,45 10,92 9,36 6,33 7,21
26,5 9,43 10,24 9,22 5,87 7,61
48 - - - 4,03 4,77
72 8,33 6,25 5,63 3,69 4,22
0
2
4
6
8
10
12
14
16
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Thời gian (giờ)
N
ồn
g
độ
c
el
lo
bi
os
e
(g
/l)
1%
3%
5%
7%
9%
Hình 4-8 Nồng độ cellobiose tạo thành theo thời gian ứng với các % enzyme
Bảng 4-10 Hiệu suất quá trình thủy phân theo thời gian ứng với các % enzyme
khác nhau
Hiệu suất
Thời gian
1% enzyme 3% enzyme 5% enzyme 7% enzyme 9% enzyme
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
0,5 5,18 7,96 11,09 13,52 19,42
1 8,74 11,59 10,52 18,77 21,30
2 7,36 13,10 21,93 23,81 30,95
24 20,42 50,01 66,69 69,62 72,66
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
82
26,5 20,97 49,67 65,30 70,67* 80,90
48 - - - 70,82 84,42
72 33,17 69,00 81,23 78,59 88,51
Từ các đồ thị và bảng trên, rút ra được các bảng số liệu và đồ thị sau:
Bảng 4-11 Nồng độ glucose, cellobiose, hiệu suất và tốc độ ban đầu theo lượng
enzyme cho vào
STT % enzyme
Nồng độ
glucose (g/l)
Nồng độ
cellobiose(g/l)
Hiệu suất
(%)
Tốc độ ban
đầu (g/l.h)
1 1 23 8,33 33 2,33
2 3 47 6,25 69 4,15
3 5 56 5,63 81 6,86
4 7 54 3,69 79 7,56
5 9 61 4,22 89 9,49
23
47
56
54
61
8.33
6.25 5.63
3.69 4.22
33
69
81
79
89
0
10
20
30
40
50
60
0 2 4 6 8 10
% enzyme
N
oàn
g
ño
ä(g
/l)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
H
iệ
u
su
ấ t
(%
)
Glucose
Cellobiose
Hiệu suất
Hình 4-9 Nồng độ glucose, cellobiose thu được và hiệu suất theo % enzyme
Đồng thời vẽ đồ thị của tốc độ phản ứng ban đầu theo % enzyme cho vào.
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
83
2.33
4.15
6.86
7.56
9.49
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
% enzyme
Tố
c
độ
p
hả
n
ứn
g
đầ
u
(g
/l.
gi
ờ
Hình 4-10 Tốc độ phản ứng ban đầu theo % enzyme cho vào
NHẬN XÉT
Khi lượng enzyme cho vào tăng, tốc độ phản ứng ban đầu tăng (hình 4-10). Khi %
enzyme tăng từ 1% đến 5% thì tốc độ phản ứng ban đầu tăng nhanh. Khi % enzyme tăng
từ 5% đến 9% thì tốc độ phản ứng ban đầu tăng chậm. Thật vậy, khi lượng enzyme cho
vào tăng lên, tốc độ phản ứng tăng[4], tuy nhiên khi lượng enzyme tăng đến một giới hạn
nhất định, nồng độ cơ chất sẽ là yếu tố hạn chế tốc độ phản ứng, ở giá trị đó, tốc độ phản
ứng sẽ không tăng nữa. Trong giới hạn enzyme khảo sát ở nghiên cứu này, chưa thể hiện
được giá trị enzyme mà tại đó, tốc độ phản ứng không tăng nữa. Tuy nhiên cũng thể hiện
được đoạn tăng chậm trên đồ thị % enzyme – tốc độ phản ứng.
Đối với cellobiose, khi % enzyme tăng, lượng cellobiose tích tụ trong dung dịch tại
thời điểm cuối giảm (hình 4-9). Khi lượng enzyme cellulase tăng, lượng β-glucosidase
cũng tăng, tương ứng, cellobiose được tiêu thụ mạnh và nồng độ cellobiose còn trong
dung dịch ít.
Đối với nồng độ glucose và hiệu suất (hình 4-9), ảnh hưởng của enzyme tương tự
như đối với tốc độ ban đầu. Khi lượng enzyme cho vào tăng lên, nồng độ glucose thu
được tại 72 giờ tăng, % enzyme tăng 1% - 5%, nồng độ glucose tăng nhanh 23g/l – 56g/l.
Nhưng sau đó, từ 5% đến 9% enzyme, nồng độ glucose tăng rất chậm từ 56g/l đến 61g/l,
Điều này có thể được giải thích: khi lượng enzyme tăng, sẽ có nhiều enzyme tấn công vào
cơ chất hơn nên lượng glucose tạo thành tăng. Tuy nhiên, với một lượng cơ chất nhất định
(% bã rắn được giữ không đổi), lượng cellulose cũng nhất định và không phải tất cả
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
84
cellulose đều có thể bị tấn công bởi enzyme. Khi enzyme tấn công, những phần cellulose
dễ bị tấn công như cấu trúc cellulose xốp, vô định hình… sẽ bị thủy phân trước. Khi
những phần cellulose này bị mất đi thì tốc độ phản ứng cũng giảm dần [10], khả năng tấn
công của enzyme sẽ trở nên rất khó khăn. Vì vậy, ở giai đoạn này, nếu lượng enzyme có
được tăng lên thì cũng không cải thiện tốc độ phản ứng cũng như không thể tạo thành
nhiều glucose hơn. Việc này cho thấy ứng với mỗi nồng độ bã rắn nhất định, chỉ cần một
lượng enzyme nhất định, nhiều hơn cũng không tăng được hiệu suất đáng kể. Enzyme
cellulase lại rất mắc, chi phí cho enzyme là chi phí lớn nhất cho quá trình thủy phân, vì
vậy cần chọn một giá trị enzyme thích hợp. Đối với yếu tố này, 5% enzyme là giá trị thích
hợp, cho hiệu suất cao, nồng độ glucose cao và tiêu tốn một lượng enzyme thích hợp.
4.2.4 Ảnh hưởng của pH
Thực hiện khảo sát ảnh hưởng của pH lên quá trình thủy phân. Các thí nghiệm được
tiến hành ở điều kiện : nhiệt độ 50oC; % bã rắn: 11%; % enzyme: 5%, pH ban đầu của
môi trường và thời gian lấy mẫu được trình bày trong mục 3.4.3.
Bảng 4-12 Nồng độ glucose theo thời gian ứng với các giá trị pH ban đầu khác nhau.
Nồng độ glucose (g/l) Thời
gian
(giờ) pH=3 pH=4 pH=4,2 pH=4,4 pH=4,6 pH=4,8 pH=5 pH=6
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
0,5 7,87 6,49 5,79 6,63 5,57 7,62 8,20 6,03
1 9,53 12,84 9,65 9,61 9,31 7,23 10,48 6,94
2 12,33 13,05 12,62 12,62 12,58 15,07 15,90 9,34
3 14,49 16,70 14,86 16,99 17,58 - 17,76 10,19
24 30,30 40,34 40,16 43,66 43,62 45,83 43,30 25,80
26,5 30,69 - - - - 44,88 46,01 26,90
72 22,83 45,55 47,97 48,70 52,78 55,80 53,95 34,34
(-) mẫu không được chạy.
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
85
0
10
20
30
40
50
60
0 10 20 30 40 50 60 70
Thôøi gian (giôø)
N
oàn
g
ño
ä g
lu
co
se
(g
/l)
pH 4
pH 4,2
pH 4,4
pH 4,6
pH 4,8
pH 3
pH 5
pH 6
Hình 4-11 Nồng độ glucose tạo thành theo thời gian ứng với các giá trị pH khác
nhau
Bảng 4-13 Hiệu suất thủy phân theo thời gian ứng với các giá trị pH ban đầu
khác nhau
Hiệu suất (%) Thời
gian
(giờ) pH=3 pH=4 pH=4,2 pH=4,4 pH=4,6 pH=4,8 pH=5 pH=6
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
0,5 11,40 9,44 8,37 9,63 8,09 11,09 11,90 8,75
1 13,82 18,69 13,96 13,95 13,53 10,52 15,20 10,07
2 17,87 18,99 18,25 18,32 18,28 21,93 23,08 13,54
3 21,01 24,30 21,48 24,66 25,54 - 25,77 14,77
24 43,93 58,70 58,08 63,38 63,38 66,69 63,02 37,40
26,5 44,49 - - - - 65,30 66,97 39,00
72 33,09 66,27 69,37 70,70 76,69 81,23 78,52 49,78
Với các giá trị đo được tại 72 giờ, ta rút ra bảng sau
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
86
Bảng 4-14 Hiệu suất và nồng độ glucose, cellobiose theo pH dung dịch
STT pH Hiệu suất (%)
Nồng độ glucose
(g/l)
Nồng độ
cellobiose (g/l)
1 3 44 30,69 5,79
2 4 66 45,55 4,78
3 4,2 69 47,97 7,09
4 4,4 71 48,70 6,66
5 4,6 77 52,78 3,99
6 4,8 81 55,80 5,63
7 5 79 53,95 5,65
8 6 50 34,34 7,89
30.69
53.95
34.34
5.79
7.89
48.70
55.8052.78
47.97
45.55
5.65
5.63
3.99
6.66
7.09
4.78
44
66
69 71
77
81 79
50
0
10
20
30
40
50
2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5pH
N
oàn
g
ño
ä (
g/
l)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
H
ie
äu
su
aát
(%
)
Glucose
Cellobiose
Hiệu suất
Hình 4-12 Hiệu suất, nồng độ glucose và nồng độ cellobiose theo pH dung dịch
NHẬN XÉT
Khi pH tăng từ 3 đến 4,8 thì nồng độ glucose thu đựơc (30,6 g/l đến 55,8 g/l) và hiệu
suất tăng (từ 44% đến 81%) (hình 4-12), nhưng khi pH tăng từ 4,8 đến 5 thì nồng độ
glucose thu được giảm ( từ 55,80 còn 34,34g/l) và hiệu suất cũng giảm (từ 81% còn 50%).
Như đã trình bày ở mục 2.2.3.3 c, ảnh hưởng của pH lên quá trình thủy phân, mỗi enzyme
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
87
sẽ hoạt động tốt nhất ở một khoảng giá trị pH nhất định. Đối với enzyme cellulase,
khoảng pH này là từ 4 đến 5. Điều này được phản ánh ở đồ thị 4-12, nồng độ glucose và
hiệu suất đạt được tốt nhất trong khoảng pH từ 4 đến 5, trong đó pH 4,8 cho giá trị cao
nhất. Khoảng pH hoạt động của enzyme rất có ý nghĩa với sản xuất công nghiệp vì trong
quy mô công nghiệp, việc giữ pH ở một giá trị không đổi là rất khó khăn, vì vậy, việc đưa
ra kết luận về một khoảng pH hoạt động sẽ giúp quá trình vận hành đơn giản hơn mà vẫn
đạt được hiệu quả quá trình cao.
Đồ thị cho thấy rằng, pH không cho ảnh hưởng rõ rệt lên sự hình thành và tiêu thụ
của cellobiose, nồng độ cellobiose trong dung dịch tại thời điểm kết thúc theo pH không
có một quan hệ rõ rệt (hình 4-12).
Đối với yếu tố này, pH 4,8 là giá trị pH cho hiệu quả quá trình thủy phân tốt nhất.
4.2.5 Ảnh hưởng của nhiệt độ
Thực hiện khảo sát ảnh hưởng của pH lên quá trình thủy phân, Các thí nghiệm được
tiến hành ở điều kiện : pH 4,8; % bã rắn: 11%; % enzyme: 5%, Các nhiệt độ khảo sát và
thời gian lấy mẫu được trình bày trong mục 3.4.3. Kết quả trình bày trong các đồ thị và
bảng sau.
Bảng 4-15 Nồng độ glucose tạo thành theo thời gian ứng với các giá trị nhiệt độ
khác nhau.
Nồng độ glucose (g/l)
Thời gian
(giờ) Nhiệt độ
thường (28oC)
37 oC 40 oC 50 oC 55 oC 60 oC
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
0,5 - - - 7,62 - -
1 3,29 8,42 3,71 7,23 9,00 11,70
2 6,28 8,60 7,10 15,07 13,49 14,08
3 6,87 9,05 10,00 - 17,11 17,17
24 26,55 29,85 43,56 49,69 44,99 36,92
26,5 26,77 - - - - -
48 28,38 33,75 46,28 54,35 - 40,30
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
88
0
10
20
30
40
50
0 10 20 30 40 50
Thôøi gian (giôø)
N
oàn
g
ño
ä g
lu
co
se
(g
/l)
Nhieät ñoä phoøng
40
50
37
55
60
Hình 4-13 Nồng độ glucose tạo thành theo thời gian ứng với các giá trị nhiệt độ:
nhiệt độ phòng khác nhau.
Bảng 4-16 Nồng độ cellobiose tạo thành theo thời gian tương ứng các chế độ
nhiệt độ khác nhau.
Nồng độ cellobiose(g/l)
Thời gian
(giờ) Nhiệt độ
thường (28oC)
37 oC 40 oC 50 oC 55 oC 60 oC
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
0,5 - - - 8,91 - -
1 5,34 8,52 5,80 9,25 10,13 9,18
2 9,57 11,01 11,83 13,95 11,89 9,58
3 8,80 11,95 14,56 - 13,50 9,87
24 13,36 14,74 15,24 9,36 7,62 3,63
26,5 13,97 - - - - -
48 9,41 12,21 11,04 7,51 5,29 2,34
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
89
0.00
2.00
4.00
6.00
8.00
10.00
12.00
14.00
16.00
0 10 20 30 40 50
Thời gian (giờ)
N
ồn
g
độ
c
el
lo
bi
os
e
(g
/l)
Nhiệt độ
thường
37
40
50
55
60
Hình 4-14 Nồng độ cellobiose theo thời gian ứng với các điều kiện nhiệt độ khác
nhau.
Bảng 4-17 Hiệu suất quá trình thủy phân theo thời gian tương ứng các nhiệt độ
khác nhau
Hiệu suất (%)
Thời gian
(giờ) Nhiệt độ
thường (28oC)
37 oC 40 oC 50 oC 55 oC 60 oC
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
0,5 - 11,09 - -
1 4,79 8,79 5,39 10,52 13,01 16,87
2 9,14 11,90 10,31 21,93 19,49 20,29
3 10,01 15,73 14,52 - 24,73 24,75
24 38,66 47,26 63,24 72,30 65,02 53,22
26,5 38,98 - - - - -
48 41,32 49,05 67,19 79,13 71,64 58,10
Từ đồ thị trên, ghi nhận được bảng số liệu sau.
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
90
Bảng 4-18 Nồng độ glucose, cellobiose, hiệu suất và tốc độ ban đầu đạt được
theo nhiệt độ
STT Nhiệt độ (oC)
Nồng độ
glucose (g/l)
Nồng độ
cellobiose
(g/l)
Hiệu suất (%)
Tốc độ phản
ứng ban
đầu(g/l,h)
1
Nhiệt độ
thường
28,38 9,41 41,32 2,36
2 37oC 32,52 12,21 47,26 3,46
3 40 oC 43,56 9,50 63,24 3,34
4 50 oC 49,69 7,51 49,69 6,86
5 55 oC 44,99 7,62 44,99 5,58
6 60 oC 36,92 3,63 36,92 5,39
28.38
43.56
49.69
44.99
36.92
12.21
7.51 7.62
3.63
32.52
9.41
9.50
72.30
65.02
53.22
63.24
41.32
47.26
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
25 30 35 40 45 50 55 60 65
Nhieät ñoä (ñoä C)
N
oàn
g
ño
ä (
g/
l)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Glucose
Cellobiose
Hiệu suất
Hình 4-15 Nồng độ glucose, cellobiose, hiệu suất tại 24 giờ theo nhiệt độ
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
91
2.36
3.46
6.86
5.58 5.39
0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
7.00
8.00
25 30 35 40 45 50 55 60 65
Nhiệt độ (độ C)
Tố
c
độ
đ
ầu
(g
/l.
gi
ờ)
Hình 4-16 Tốc độ phản ứng ban đầu theo nhiệt độ.
NHẬN XÉT
Khi nhiệt độ tăng, tốc độ phản ứng ban đầu tăng (hình 4-16), quan hệ này rõ rệt
trong khoảng nhiệt độ từ nhiệt độ thường (28oC) đến 50oC. Thủy phân ở 50oC sẽ cho tốc
độ phản ứng ban đầu lớn nhất. Khi nhiệt độ tiếp tục tăng (từ 50oC đến 60oC), tốc độ phản
ứng ban đầu giảm. Như đã trình bày trong mục 2.2.3.3 b, ảnh hưởng của nhiệt độ lên tốc
độ phản ứng thuỷ phân, tốc độ phản ứng thuỷ phân bằng enzyme tăng theo nhiệt độ, tuy
nhiên đến một nhiệt độ nhất định tốc độ phản ứng sẽ giảm dần đến mức triệt tiêu. Vì
enzyme là protein, đến một nhiệt độ nhất định, enzyme sẽ bị bất hoạt và không còn tác
dụng nữa. Đối với hệ enzyme cellulase, nhiệt độ này là 50oC.
Đối với glucose và hiệu suất phản ứng (hình 4-15), khi nhiệt độ tăng từ 28oC đến
50oC, lượng glucose tạo thành tăng và do đó hiệu suất cũng tăng. Theo [4] nhiệt độ tăng
sẽ làm tăng hoạt tính enzyme, từ đó tốc độ phản ứng enzyme cũng tăng theo và sản phẩm
tạo thành nhiều hơn. Tuy nhiên, sau nhiệt độ bất hoạt enzyme, hoạt tính enzyme giảm dần,
vì thế sau 50oC, nồng độ glucose và hiệu suất cũng giảm dần.
Đối với cellobiose (hình 4-14 và 4-15), trong giai đoạn đầu của phản ứng (hình 4-14,
3 giờ đầu) lượng cellobiose tạo thành tăng theo nhiệt độ tương ứng đến 50oC, và giảm khi
nhiệt độ tăng quá 50oC. Điều này phù hợp với những giải thích nêu trên. Trong giai đoạn
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
92
phản ứng kết thúc (hình 4-14) nhiệt độ tăng, nồng độ cellobiose tạo thành giảm. Giải thích
như sau: đối với khoảng 28 - 50oC, hoạt tính enzyme tăng dần, cellobiose được tiêu thụ
mạnh nên lượng tích tụ trong dung dịch tại thời điểm cuối là giảm dần. Tuy nhiên đối với
khoảng 50-60oC hoạt tính enzyme bị giảm theo nhiệt độ nên lượng cellobiose tạo thành ít
và tương ứng lượng tích tụ ít.
Hình 4-15 cho thấy, khoảng nhiệt độ 40oC - 50oC cho nồng độ glucose chênh lệch
không nhiều. Vì vậy nếu quá trình thủy phân được tiến hành trên quy mô lớn thì có thể
giữ nhiệt độ cho quá trình ở khoảng nhiệt độ này mà không ảnh hưởng nhiều tới lượng
glucose sinh ra. Trong khoảng nhiệt độ này, 50oC là nhiệt độ cho hoạt tính enzyme tốt
nhất.
4.2.6 Hiệu suất thủy phân , nồng độ đường tạo thành theo thời gian
Sau các thí nghiệm với các yếu tố trên, tìm được giá trị thích hợp cho các yếu tố lần
lượt là: % bã rắn: 11%; % enzyme: 5%; pH 4,8; nhiệt độ 50oC. Tiến hành khảo sát nồng
độ đường tạo thành, giúp có một cái nhìn tổng quát về toàn bộ quá trình thủy phân. Thí
nghiệm được thực hiện với các giá trị kể trên của các yếu tố và lấy mẫu theo thời gian.
Bảng 4-19 Nồng độ glucose, cellobiose và hiệu suất theo thời gian
STT Thời gian (h) Nồng độ glucose
(g/l)
Nồng độ
cellobiose (g/l)
Hiệu suất (%)
1 0 0,00 0,00 0,00
2 1 8,18 10,52 11,92
3 15,75 38,31 11,62 55,77
4 19 41,79 11,09 60,84
5 23 43,86 10,19 63,85
6 24 43,65 9,92 63,55
7 26,5 47,26 9,72 68,80
8 48 54,35 7,51 79,13
9 72 55,80 3,79 81,23
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
93
0
10
20
30
40
50
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Thôøi gian (giôø)
N
oàn
g
ño
ä g
lu
co
se
(g
/l)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
H
ie
äu
su
aát
(%
)
Glucose
Cellobiose
Hiệu suất
Hình 4-17 Nồng độ glucose, cellobiose và hiệu suất theo thời gian.
NHẬN XÉT
Trong 1 đến 3 giờ đầu tiên (hình 4-17 và 4-14), lượng cellobiose tạo thành nhiều,
glucose tạo thành ít. Nồng độ cellobiose trong dung dịch phụ thuộc vào tốc độ sinh ra
cellobiose bởi enzyme endo, exo và tốc độ tiêu thụ bởi enzyme β-glucosidase. Ở giai
đoạn này, cơ chất mới, tác động của enzyme endo và exo vào cơ chất là tác động chủ yếu.
Tốc độ tiêu thụ celllobiose của enzyme β-glucosidase nhỏ hơn tốc độ tạo thành
celllobiose, vì vậy lượng celllobiose là chủ yếu trong dung dịch.
Trong 24 giờ tiếp theo, cellobiose giảm và glucose tăng nhanh (43,65 g/l) tương ứng
hiệu suất đạt được khá cao (63,85%). Do trong giai đoạn này cellulose và enzyme vẫn còn
mới, các cấu trúc dễ bị tấn công của cellulose còn nhiều và không có chất ức chế hoạt tính
của enzyme. Enzyme β-glucosidase bắt đầu tiêu thụ cellobiose mạnh, glucose tạo thành
nhiều. Đây là giai đoạn glucose được sinh ra nhanh và nhiều nhất trong suốt quá trình
phản ứng.
Từ 24 đến 48 giờ, tốc độ phản ứng giảm dần, nồng độ glucose và hiệu suất tăng
chậm. Trong giai đoạn này, cellobiose và glucose tích tụ trong dung dịch gây ức chế
enzyme, những phần cellulose dễ thủy phân đã hết. Mặt khác, hoạt tính enzyme đã bị
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
94
giảm nhiều sau một thời gian tác động, một số enzyme bị nhốt trong cấu trúc xốp của
cellulose.
Từ 48 giờ đến 72 giờ, nồng độ glucose tăng rất chậm từ 54,35 g/l đến 55,80 g/l, Kết
thúc phản ứng ở 72 giờ, nồng độ glucose đạt được là 55,80 g/l tương ứng hiệu suất đạt
được là 81,23%. Không thể đạt hiệu suất 100% hay nói cách khác không thể thủy phân tất
cả cellulose có trong rơm rạ. Phản ứng thủy phân cellulose là một phản ứng dị thể, vấn
đền tiếp xúc pha đóng một vai trò quan trọng [10]. Ngoài ra, cấu trúc cellulose có những
phần rất khó bị tấn công bởi enzyme, enzyme không thể tấn công vào để thủy phân phần
cơ chất này.
4.3 QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN VÀ LÊN MEN ĐỒNG THỜI
Quá trình thủy phân và lên men đồng thời có nhiều ưu điểm so với quá trình thông
thường như đỡ hao tốn thiết bị, thời gian, năng lượng, hiệu suất toàn quá trình cao hơn.
Làm ra bioethanol từ quá trình thủy phân và lên men đồng thời là một hướng nghiên cứu
mới, chưa được nghiên cứu một cách đầy đủ ở Việt Nam. Trên thế giới đã tiến hành rất
nhiều nghiên cứu và đã triển khai sản xuất thử mô hình này.
Nghiên cứu này sẽ tiến hành khảo sát các chất có trong dịch thủy phân và lên men
đồng thời, ảnh hưởng của lượng enzyme cho vào và ảnh hưởng của mật độ nấm men lên
hiệu suất quá trình.
4.3.1 Thành phần dịch thủy phân và lên men đồng thời
Dịch thủy phân và lên men đồng thời được lọc qua phễu lọc và đo bằng máy HPLC,
Kết quả được trình bày trong bảng sau.
Bảng 4-20 Thành phần dịch thủy phân và lên men đồng thời
STT Thời gian lưu (phút) Chất
Thời gian lưu chất
chuẩn (phút)
1 5,507
2 5,163
3 5,974 Acid oxalic 5,985
4 6,332 Cellobiose 6,506
5 7,079
6 7,425 Glucose 7,558
7 8,203 Xylose 7,993
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
95
8 8,403 Arabinose 8,525
9 8,639
10 9,518 Acid lactic 9,579
11 9,867
12 10,979 Acid acetic 11,108
13 12,354
14 12,735
15 13,213
16 13,888
17 15,502 Ethanol 15,565
Thành phần dịch thủy phân và lên men đồng thời gồm có 17 chất. Trong đó, có thể
giải đoán được 8 chất, riêng xylose được giải đoán bằng phương pháp thêm chuẩn vào
mẫu. Có thể lý giải như sau: cellobiose và glucose là do enzyme tạo thành và nấm men
chưa chuyển hóa hết thành ethanol. Xylose và arabinose là những đường pentose có từ
quá trình thủy phân của hemicellulose, chủng nấm men sử dụng là saccharomyces
cerevisiae chỉ có khả năng lên men đường hexose, vì vậy, các đường này vẫn còn lại trong
dịch. Ngoài ra, quá trình lên men còn tạo thành các acid hữu cơ và các aldehyde, một số
acid hữu cơ có thể giải đoán được như acid acetic và acid lactic. Các acid khác và các
aldehyde do không chạy được chuẩn nên không thể giải đoán được. Ethanol là sản phẩm
được tạo thành trong quá trình.
4.3.2 Ảnh hưởng của lượng emzyme cho vào
Thực hiện khảo sát ảnh hưởng của lượng enzyme cho vào lên quá trình thủy phân và
lên men đồng thời. Các thí nghiệm được tiến hành ở điều kiện : nhiệt độ 37oC; % bã rắn:
11%; pH: 4,8; mật độ nấm men 23,6 triệu tế bào/ml. Lượng enzyme cho vào và thời gian
lấy mẫu được trình bày trong mục 3.4.4. Kết quả trình bày trong các đồ thị và bảng sau.
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
96
Bảng 4-21 Nồng độ ethanol, glucose, cellobiose và hiệu suất toàn quá trình theo
% enzyme cho vào tại 24 giờ và 48 giờ.
STT % enzyme Thời gian
(giờ)
Nồng độ
ethanol (g/l)
Nồng độ
glucose
còn(g/l)
Nồng độ
cellobiose
(g/l)
Hiệu suất
(%)
1 24 15,70 1,87 9,08 47,12
2
3%
48 17,09 3,32 4,75 53,17
3 24 18,31 0 11,03 51,76
4
5%
48 27,61 0 2,47 78,05
5 24 24,77 2,24 4,73 73,26
6
7%
48 24,49 3,65 1,76 74,52
7 24 24,31 1,84 1,98 71,26
8
9%
48 21,34 1,81 0,55 62,83
Đồ thị thu được tại 24 giờ
24.3124.77
18.31
15.70
0.00
1.842.241.87
71.2673.26
51.76
47.12
0
5
10
15
20
25
30
2 3 4 5 6 7 8 9 10% enzyme
N
oàn
g
ño
ä (
g/
l)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
H
iệ
u
su
ấ t
(%
)
Ethanol
Glucose
Hiệu suất
Hình 4-18 Nồng độ ethanol, glucose và hiệu suất theo % enzyme, tại 24 giờ
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
97
Vẽ đồ thị, nồng độ ethanol, glucose, cellobiose và hiệu suất tại 48 giờ theo lượng
enzyme cho vào để thấy được ảnh hưởng của lượng enzyme lên quá trình thủy phân và
lên men đồng thời.
17.09
27.61
24.49
21.34
3.32
0.00
1.81
4.75
0.55
3.65
1.76
2.47
53.17
78.05
74.52
62.83
0
5
10
15
20
25
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10% enzyme
N
oàn
g
ño
ä (
g/
l)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
H
i ệ
u
su
ất
(%
)
Ethanol
Glucose
Cellobiose
Hiệu suất
Hình 4-19 Nồng độ ethanol, glucose, cellobiose và hiệu suất theo % enzyme cho vào
tại 48 giờ
NHẬN XÉT
Khi lượng enzyme tăng từ 3% đến 5% cả nồng độ ethanol và hiệu suất tổng cộng
của quá trình đều tăng. Tuy nhiên khi lượng enzyme cho vào tăng từ 5% đến 9%, lượng
ethanol và hiệu suất toàn quá trình giảm (chênh lệch nồng độ là 6,27g/l; chênh lệch hiệu
suất là 15%).(Hình 4-19)
Thủy phân và lên men đồng thời bao gồm hai quá trình diễn ra song song, thủy phân
cellulose thành glucose và lên men glucose thành ethanol. Phản ứng thủy phân là phản
ứng dị thể rắn/lỏng, trong khi đó phản ứng lên men là phản ứng đồng thể. Quá trình lên
men diễn ra dễ dàng hơn quá trình thủy phân do quá trình khuếch tán glucose từ dung
dịch đến tế bào nấm men dễ dàng hơn quá trình hấp phụ và khuếch tán enzyme đến sợi
cellulose, chính vì vậy mà enzyme có ảnh hưởng mạnh lên quá trình. Tương tự như đối
với quá trình thủy phân, với một lượng cơ chất nhất định, chỉ cần một lượng xác định
enzyme là có thể thủy phân hiệu quả. Vì vấn đề hạn chế chính là lượng cellulose có thể bị
thủy phân đã hết. Việc dùng lượng enzyme nhiều hơn sẽ không cho hiệu quả đáng kể.
Ngoài ra, trong khảo sát này, khi lượng enzyme tăng cao (7% và 9%) lượng ethanol
tạo thành và hiệu suất chuyển hóa lại giảm đi. Đồ thị biểu diễn theo 24 giờ cho thấy trong
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
98
24 giờ đầu, lượng ethanol và glucose tương ứng với 7% và 9% đều lớn hơn 5%. Sau đó
ethanol lại bị giảm đi tại 48 giờ. Có thể giải thích rằng, do sự tích tụ lớn của các sản phẩm
này sau 24 giờ đã ức chế hoạt động của nấm men (ethanol) và enzyme (glucose) chính vì
thế mà trong khoảng thời gian tiếp theo, hoạt động của enzyme và nấm men trong hai thí
nghiệm này không tốt bằng 5%, tạo ra sự giảm quan sát thấy trên đồ thị. Ngoài ra, ethanol
có thể bị chuyển hoá thành các acid do sự hiện diện của các vi sinh vật khác trong dung
dịch, làm cho nồng độ ethanol bị giảm sau 24 giờ đối với 7% và 9% enzyme.
Đồng thời tại các % enzyme 3%, 7% và 9%, vẫn còn tồn tại một lượng glucose đáng
kể tại 48 giờ, điều này cho thấy hoạt tính của nấm men sử dụng không cao. Đây cũng là
một yếu tố ảnh hưởng đến toàn quá trình. Vì nấm men tiêu thụ glucose làm chuyển dịch
cân bằng tạo glucose của enzyme cellulase, hoạt tính nấm men không cao ảnh hưởng tới
việc tạo ra ethanol đồng thời lượng glucose tích tụ trong dung dịch sẽ ảnh hưởng đến tác
dụng làm chuyển dịch cân bằng enzyme.
Từ loạt thí nghiệm này, có thể kết luận % enzyme thích hợp cho quá trình thủy phân
và lên men đồng thời rơm rạ tạo ethanol là 5%.
4.3.3 Ảnh hưởng của mật độ nấm men ban đầu
Thực hiện khảo sát ảnh hưởng của mật độ nấm men cho vào lên quá trình thủy phân
và lên men đồng thời. Các thí nghiệm được tiến hành ở điều kiện: nhiệt độ 37oC; % bã rắn:
11%; pH: 4,8; % enzyme 5%. Mật độ nấm men cho vào và thời gian lấy mẫu được trình
bày trong mục 3.4.4. Để tiện việc trình bày kết quả cũng như theo dõi kết quả, mật độ
nấm men 23,6 triệu tế bào/ml được chọn làm gốc, các mật độ khác được biểu diễn dưới
dạng tỉ lệ với mật độ này.
Tỉ lệ mật độ nấm men = mật độ nấm men sử dụng (triệu tế bào /ml)/ 23,6
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
99
Bảng 4-22 Nồng độ ethanol, glucose, cellobiose và hiệu suất theo mật độ nấm
men cho vào
STT
Mật độ
nấm men
(triệu tế
bào/ml)
Tỉ lệ
mật độ
nấm
men
Thời
gian
(giờ)
Nồng độ
ethanol
(g/l)
Nồng độ
glucose
còn(g/l)
Nồng độ
cellobiose
(g/l)
Hiệu suất
(%)
1 24 19,11 1,79 5,97 57,94
2
11,8 0,5
48 25,60 0 1,96 72,60
3 24 18,31 0 11,03 51,76
4
23,6 1
48 27,61 0 2,47 78,05
5 24 18,42 1,79 8,51 54,91
6
35,4 1,5
48 26,06 0 2,27 74,01
7 24 23,04 1,72 4,62 67,72
8
47,2 2
48 28,80 0 0,27 81,52
Vẽ đồ thị các mối quan hệ tại 24 giờ
23.04
1.72
18.4218.3119.11
1.79
0.00
2.59
67.72
51.76
54.91
57.94
0
5
10
15
20
25
0 0.5 1 1.5 2 2.5
Tỉ lệ mật độ nấm men
N
oàn
g
ño
ä (
g/
l)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
H
iệ
u
su
ất
(%
)
Ethanol
Glucose
Hiệu suất
Hình 4-20 Nồng độ ethanol, glucose và hiệu suất theo tỉ lệ mật độ nấm men cho vào
tại 24 giờ
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
100
25.60
27.61
26.06
28.80
0.27
2.272.471.96
72.60
78.05
74.01
81.52
0.00
5.00
10.00
15.00
20.00
25.00
0 0.5 1 1.5 2 2.5
Tæ leä maät ñoä naám men
N
oàn
g
ño
ä (
g/
l)
0.00
10.00
20.00
30.00
40.00
50.00
60.00
70.00
80.00
90.00
100.00
H
iệ
u
su
ất
(%
)
Ethanol
Glucose
Cellobiose
Hiệu suất
Hình 4-21 Nồng độ ethanol, glucose, cellobiose và hiệu suất theo tỉ lệ mật độ nấm
men cho vào tại 48 giờ
NHẬN XÉT
Nhìn chung, khi mật độ nấm men cho vào tăng lên, lượng ethanol tạo thành tăng và
do đó hiệu suất của toàn quá trình cũng tăng. Tuy nhiên, mức độ chênh lệch không nhiều,
chỉ trong khoảng 3,2 g/l đối với nồng độ ethanol và 8,92% đối với hiệu suất (hình 4-21).
Lượng cellobiose tích tụ tại thời điểm cuối có giá trị gần như nhau đối với các tỉ lệ nấm
men 0,5; 1; 1,5 và không có cellobiose tích tụ đối với tỉ lệ nấm men 2 (hình 4-21).
Như vậy, khi mật độ nấm men tăng lên, hiệu suất tạo ethanol cũng tăng, Tuy nhiên
điều này chỉ đúng với một khoảng nhất định, khi vượt quá một ngưỡng giá trị, tăng mật
độ nấm men không làm tăng hiệu suất chuyển hóa ethanol. Lý do là với mật độ nấm men
lớn, nấm men sẽ sử dụng đường tạo thành trong quá trình thủy phân để tăng sinh khối, và
như thế lượng ethanol sinh ra sẽ giảm theo [1].
Nấm men sử dụng nhiều sẽ tạo chuyển dịch cân bằng, làm cho cellobiose và glucose
bị tiêu thụ mạnh và tương ứng lượng tích tụ của hai chất này ít khi dùng tỉ lệ nấm men cao.
Như quan sát trên hình 4-21, tỉ lệ nấm men 2 không còn cellobiose.
Thí nghiệm này cũng cho thấy, quá trình lên men không đóng vai trò lớn trong thủy
phân và lên men đồng thời như quá trình thủy phân. Khi mật độ nấm men thay đổi, hiệu
suất chuyển hóa của quá trình không thay đổi mạnh như khi % enzyme thay đổi.
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
101
Đối với thí nghiệm này, chọn mật độ nấm men thích hợp là 23,6 triệu tế bào/ml.
Mật độ gấp 2 lần (47,2 triệu tế bào/ml) cho hiệu suất ethanol lớn hơn không nhiều mặt
khác sử dụng một lượng nấm men gấp đôi nên hiệu qủa không cao.
4.3.4 Hiệu suất toàn quá trình theo thời gian
Sau các thí nghiệm khảo sát các yếu tố trên, tìm ra được các điều kiện thích hợp cho
quá trình thủy phân và lên men đồng thời là: mật độ nấm men 23,6 triệu tế bào/ml; %
enzyme 5%; pH 4,8; nhiệt độ 37oC; % bã rắn 11%. Tiến hành thí nghiệm khảo sát nồng
độ ethanol tạo thành, nồng độ glucose và cellobiose trong quá trình thủy phân và lên men
đồng thời tại các giá trị kể trên.
Bảng 4-23 Nồng độ cellobiose, glucose và ethanol tạo thành theo thời gian trong
quá trình thủy phân và lên men đồng thời
STT Thời gian
(giờ)
Nồng độ
cellobiose(g/l)
Nồng độ
glucose (g/l)
Nồng độ
ethanol (g/l)
Hiệu suất (%)
1 0 0,00 0,00 0,00 0,00
2 2 9,96 6,73 1,73 14,58
3 21 4,59 1,87 22,10 65,10
4 24 4,21 1,79 24,73 72,40
5 26 3,13 1,89 25,49 74,68
6 51 0,72 0 29,23 82,53
7 74 0,88 0 30,68 86,61
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
102
Từ số liệu trên vẽ được đồ thị sau
0.00
1.73
22.10
30.6829.23
24.73
25.49
0
5
10
15
20
25
30
35
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Thời gian (giờ)
N
ồn
g
độ
(g
/l)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
H
iệ
u
su
ất
(%
)
Ethanol
Glucose
Cellobiose
Hiệu suất
Hình 4-22 Nồng độ cellobiose, glucose và ethanol tạo thành theo thời gian trong
quá trình thủy phân và lên men đồng thời.
NHẬN XÉT
Trong thời gian đầu (2 giờ), glucose và cellobiose được tạo thành nhanh, ethanol tạo
thành không nhiều (hình 4-22). Nồng độ clellobiose trong dung dịch được quyết định bởi
tốc độ thuỷ phân của enzyme endo, exo và tốc độ tiêu thụ cellobiose của enzyme β-
glucosidase . Nồng độ glucose được quyết định bởi tốc độ tạo phản ứng thuỷ phân bằng
enzyme cellulase và tốc độ lên men của nấm men. Tuỳ thuộc vào mối quan hệ của các tốc
độ này, cellobiose và glucose trong dung dịch sẽ có các giá trị nồng độ khác nhau. Như
được đề cập trong [9] giai đoạn đầu, nấm men không lên men kịp tốc độ tạo thành glucose
từ phản ứng thủy phân cellulose của enzyme. Ngoài ra, cơ chất trong giai đoạn này là mới,
các bề mặt dễ tấn công còn nhiều, enzyme chưa bị ức chế. Vì vậy tồn tại glucose và
cellobiose tích tụ trong dung dịch ở giai đoạn này. Hoạt động của nấm men trong giai
đoạn này còn yếu, glucose không bị tiêu thụ mạnh, lượng glucose tích tụ trong thời điểm
này sẽ làm hạn chế tốc độ thủy phân của enzyme β-glucosidase.
Sau đó, trong 24 giờ tiếp theo, khi nấm men đã thích nghi được với môi trường và
tăng sinh khối đáng kể. phản ứng lên men tạo ethanol diễn ra nhanh và quá trình thủy
phân tạo glucose trở thành giai đoạn quyết định tốc độ phản ứng. Lúc này, lượng glucose
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
103
không còn đủ để ức chế enzyme β-glucosidase nữa, phản ứng thủy phân diễn ra nhanh
hơn, tác dụng chuyển dịch cân bằng của quá trình thuỷ phân và lên men đồng thời được
thể hiện trong giai đoạn này. Từ 24 đến 51 giờ, nồng độ ethanol vẫn tiếp tục tăng nhưng
chậm, nồng độ cellobiose và glucose dần giảm tới 0.
Từ 51 đến 74 giờ, ethanol vẫn được tạo thành nhưng với tốc độ chậm, lượng glucose
và cellobiose không còn đáng kể. Tuy nhiên, như đã trình bày ở mục 2.2.5.2, hiệu suất
quá trình chỉ đạt được đến 86,61%. Lý do là vẫn có những phần cellulose không thể bị tấn
công bởi enzyme.
Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
104
Chương 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
5.1 KẾT LUẬN QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN
Từ các thí nghiệm khảo sát các yếu tố, rút ra được điểm tốt nhất cho quá trình thủy
phân rơm rạ bằng enzyme
% bã rắn 11%
% enzyme 5%
Nhiệt độ 50oC
pH 4,8
Nồng độ glucose đạt được 55,08 g/l
Hiệu suất 81,23%
Như vậy, khi tiến hành thủy phân ở điều kiện này, 1 kg rơm thô sẽ thu được 204,16g
glucose.
5.2 KẾT LUẬN QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN VÀ LÊN MEN ĐỒNG THỜI
Từ các thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng các yếu tố, kết luận được điểm tốt nhất cho
quá trình thủy phân và lên men đồng thời
Mật độ nấm men 23,2 triệu tế bào/ml
% enzyme 5%
% bã rắn 11%
Nhiệt độ 37oC
pH 4,8
Nồng độ ethanol đạt được 30,68 g/l
Nồng độ glucose tích tụ 0 g/l
Hiệu suất 86,61%
Nếu tiến hành quá trình thủy phân và lên men đồng thời ở điều kiện này, 1 kg rơm
thô sẽ thu được 113,72 g ethanol tương đương 144 ml ethanol. Trong thí nghiệm tiến
hành với rơm đã qua tiền xử lý bằng acid yếu, Keikhosro Karimi và cộng sự [13], 1 kg
rơm sẽ cho 172g ethanol tương ứng 218ml ethanol đối với quy trình sử dụng nấm men
S.cerevisiae.
Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
105
5.3 SO SÁNH HIỆU SUẤT TOÀN QUÁ TRÌNH CỦA THỦY PHÂN VỚI
THỦY PHÂN VÀ LÊN MEN ĐỒNG THỜI
Như đã trình bày ở trên, hiệu suất quá trình thủy phân thường là yếu tố quyết định
lên hiệu suất toàn quá trình. Vì quá trình lên men thường đạt hiệu suất rất cao (99%) do
phản ứng lên men là đồng thể nên dễ xảy ra. Trong khi đó enzyme thường không thủy
phân hết được lượng cellulose có trong rơm rạ. Hiệu suất toàn quá trình thường bằng hoặc
nhỏ hơn hiệu suất quá trình thủy phân.
Hiệu suất quá trình thủy phân và lên men đồng thời đạt được 86,62% ( tại 74 giờ),
lớn hơn so với hiệu suất quá trình thủy phân 81%. Như vậy, có thể chỉ ra rằng quá trình
thủy phân và lên men đồng thời cho hiệu suất cao hơn quá trình thủy phân thông thường,
hay nói cách khác cao hơn quá trình thủy phân và lên men tách biệt. Bên cạnh đó, quá
trình tiến hành trong thời gian ngắn hơn (48 – 72 giờ, so với 6 ngày (144 giờ) như các quá
trình thông thường). Các thiết bị cũng được giảm từ hai còn một thiết bị nếu sử dụng thủy
phân và lên men đồng thời.
5.4 ĐỀ NGHỊ
Để quá trình sản xuất bioethanol từ rơm rạ và từ nguồn nguyên liệu lignocellulose có
hiệu quả hơn, tác giả đưa ra một số đề nghị như sau:
Quá trình thủy phân và lên men đồng thời rất có ý nghĩa đối với công nghiệp sản
xuất bioethanol từ nguồn nguyên liệu lignocellulose chung và từ rơm rạ nói riêng. Những
kết quả từ nghiên cứu này cũng đã phần nào chứng minh tính khả thi của quá trình này.
Tuy nhiên, nghiên cứu này vẫn còn nhiều hạn chế. Việc nghiên cứu kỹ hơn quá trình thủy
phân và lên men đồng thời là rất có ý nghĩa đối với việc sản xuất bioethanol.
Hiệu suất quá trình thủy phân cũng như thủy phân và lên men đồng thời chỉ đạt đến
ngưỡng 80%. Cellulose cũng đóng một vai trò rất lớn vào sự hạn chế này. Có những phần
cellulose không thể bị tấn công bởi enzyme, làm ảnh hưởng tới hiệu suất toàn quá trình.
Nghiên cứu để nâng cao hiệu quả của quá trình tiền xử lý là cần thiết.
Kết quả phân tích dịch thủy phân cũng như thủy phân và lên men đồng thời chỉ ra
rằng, trong dịch có tồn tại các đường pentose gồm xylose và arabinose, nấm men
saccharomyces cerevisiae không thể lên men các đường này. Một quy trình được đề ra là
dịch sau lên men đường hexose được loại ethanol (chưng cất…) sau đó sẽ tiếp tục lên
men đường 5. Quá trình lên men lần hai này có thể tiến hành bằng chủng nấm men Pichia
Stipitis. Như vậy sẽ tận dụng hết lượng cơ chất.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
106
TÀI LIỆU THAM KHẢO
[1] Cao Đình Khánh Thảo, Nghiên cứu thử nghiệm khả năng xử lý rơm rạ để
lên men ethanol, Luận văn Đại học, Bộ môn Công Nghệ Sinh Học – Khoa Công
Nghệ Hóa Học, 01/2007
[2] TS. Nguyễn Thị Ngọc Bích, Kỹ thuật cellulose và giấy, Nhà xuất bản Đại
học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh, 2003.
[3] Hồ Sĩ Tráng, Cơ sở hoá học gỗ và cellulose, Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ
thuật Hà Nội, trang 30-81.
[4] TS. Nguyễn Đức Lượng, Công nghệ enzyme, Nhà xuất bản Đại học Quốc
gia Thành phố Hồ Chí Minh, 2001.
[5] TS. Nguyễn Đức Lượng, Công nghệ sinh học, Nhà xuất bản Đại học Quốc
Gia Thành phố Hồ Chí Minh, 2001.
[6] Th.S Trịnh Hoài Thanh, Nghiên cứu quá trình xử lý rơm rạ để chế biến cồn
nhiên liệu, Luận văn Thạc sĩ, Bộ môn Máy Thiết bị - Khoa Công nghệ Hóa học.
[7] Nguyễn Ngọc Quế, Trần Đình Thao, Báo cáo tổng quan ngành hàng lúa
gạo Việt Nam, Viện Chính sách và Chiến lược Phát triển Nông Nghiệp Nông Thôn,
2005.
[8] TS. Nguyễn Thế Bảo, TS.Bùi Tuyên, Điều tra quy hoạch các dạng năng
lượng mới trên địa bàn Tp Hồ Chí Minh, Sở Khoa học và Công Nghệ Tp Hồ Chí
Minh, 2001.
[9] Charles E.Wyman, Handbook on Bioethanol: Product and Utilization,
Taylor&Francis, 1996. p 119-285
[10] Hetti Palonen, Role of lignin in the enzymatic hydrolysis of lignocellulose,
VTT Biotechnology, 2004, p 11-39.
[11] M.Roehr, The Biotechnology of ethanol classical and future application,
Weinheim, WILEY-VCH Verlag GmbH, 2001.
[12] Ilona Sárvári Horváth, Carl Johan Franzén, Mohammad J. Taherzadeh,
Claes Niklasson, Gunna Lidén, Effect of Fufural on the Respiratory Metabolism of
Saccharomyces Cerevisiae in Glucose-Limited Chemostats, American Scociety for
Microbiology vol.69, 07/2004, p.4076-4086.
[13] Keikhosro Karimi, Giti Emtiazi, Mohammad J. Taharzadeh, Ethanol
production from dilute-acid pretreated rice straw by simultaneous saccharification
TÀI LIỆU THAM KHẢO
107
and fermentation with Mucor indicus, Rhizopus oryzae, Saccharomyces cerevisiae,
Science Direct, Enzyme and microbial Technology 40, 2006, p 138-144.
[14] Lonnie O. Ingram, Joy B.Doran, Conversion of cellulosic materials to
ethanol, FEMS Microbiology Reviews, 1995.
[15] Carlo N Hamelinck, Greertje van Hooijdonk, André PC Faaij, Ethanol from
lignocellulosic biomass: techno-economic performance in short-, middle- and
long-term, Science Direct, Biomass and bioenergy 28, 2005, p.384-410 .
[16] M. Clark Dale và Mark Moelhman, Enzymatic Simultaneous
saccharification and fermentation of biomass to ethanol in a pilot 130 liter
multistage continuous reaction separator.
[17] Haagensen F., Ahring B.K., Enzymatic hydrolysis and glucose fermentation
of wet oxidized sugarcane bagasse and rice straw for bioethanol production,
Environment Microbiology & Biotechnology Research Group, Technical
University of Denmark.
[18] Seungdo Kim, Bruce E. Dale, Global potential bioethanol production from
wasted crops, Science Direct, Biomass and Bioenergy 26, 2004, p.361-375.
[19] Jeibing li, Gunnar Henriksson, Goran Gellerstedt, Lignin depolymerization/
repolymerization and its critical role for deligninfication of aspen wood by steam
exposion, Science Direct, Bioresource Technology 98, 2007, p. 3061-3068 .
[20] Muhammad Ibrahim Rajoka, The enzymatic hydrolysis and fermentation of
pretreated wheat straw and bagasse to ethanol, ATDF Journal Volume 2, Issue 2,
p.29-35
[21] Ghasem Najafpour, Habibollah Younesi, Ku Syahidah Ku Ismail, Ethanol
fermentation in an immobilized cell reactor, Science Direct, Bioresource
Technology 92, 2004, p.251-260.
[22] Luiz Pereira Ramous, The chemistry involved in the steam treatment of
lignocellulosic materials, Quin. Nova, 2003.
[23] Karin Ohgren, Oskar Bengtsson, Marie F.Gorwa-Grauslund, Simultaneous
saccharification and co-fermentation of glucose and xylose in steam-pretreated
corn stover at high fiber content with Saccharomyces cerevisiae TMB3400,
Science Direct.
[24] Jesper Norgard, Ethanol production from biomass – optimization of
simultaneous saccharification and fermentation with respect to stirring and heating,
Department of Chemical engineering, Lund Institute of Technology.
PHỤ LỤC
108
PHỤ LỤC
TÍNH HIỆU SUẤT
Một số kí hiệu sử dụng:
Khối lượng bã sử dụng mrom (g)
Hàm ẩm a %
Phần trăm cellulose trong bã b %
Khối lượng cellulose có trong bã mcellulose-1 (g)
Thể tích dung dịch V (ml)
Nồng độ glucose trong dung dịch Cglucose (g/l)
Khối lượng mol cellulose 162×n (g)
Khối lượng mol glucose 180 (g)
Khối lượng cellulose phản ứng mcellulose-2 (g)
Nồng độ ethanol trong dung dịch Cethanol (g/l)
Khối lượng cellulose bị lên men mcellulose-3 (g)
HIỆU SUẤT QUÁ TRÌNH THUỶ PHÂN
Khối lượng cellulose có trong bã ban đầu
000.10
)100(
1
bam
m romcellulose
×−×=− (g) (4)
Khối lượng cellulose thủy phân
180
162
10001000
cos
cos
cos
2 ×
×=××
×=−
VC
Mn
MVCm eglu
eglu
celluloseeglu
cellulose (g) (5)
Hiệu suất phản ứng thuỷ phân
%100
1
2 ×=
−
−
cellulose
cellulose
m
m
H (6)
HIỆU SUẤT QUÁ TRÌNH THUỶ PHÂN VÀ LÊN MEN ĐỒNG THỜI
Tính khối lượng cellulose có trong bã ban đầu theo (4)
Tính khối lượng cellulose bị thuỷ phân ứng với nồng độ glucose còn trong dung
dịch
PHỤ LỤC
109
Khối lượng cellulose tham gia phản ứng lên men
462
162
1000210003 ××
×=×××
×=− VCMn
MVC
m ethanol
ethanol
celluloseethanol
cellulose (g) (7)
Hiệu suất quá trình thủy phân và lên men đồng thời
%100
1
32 ×+=
−
−−
cellulose
cellulosecellulose
m
mm
H (8)
TÍNH TỐC ĐỘ PHẢN ỨNG BAN ĐẦU
Từ các giá trị nồng độ glucose đo được ứng với các thời điểm ban đầu: 0; 0,5; 1; 2; 3
giờ. Tiến hành vẽ đồ thị nồng độ glucose – thời gian. Từ đồ thị, dùng phương pháp bình
phương cực tiểu nội suy ra dạng đường thẳng đi qua các điểm. Giá trị hệ số góc của
đường thẳng nội suy được chính là tốc độ phản ứng ban đầu.
Các file đính kèm theo tài liệu này:
- Nghien cuu san xuat ethano.pdf