TÓM TẮT
Đặt vấn đề: các dẫn chất chalcon đặc biệt chalcon dị vòng hiện nay được quan tâm nghiên cứu như là tác nhân kháng vi sinh vật tiềm năng.
Mục tiêu: sàng lọc những dẫn chất chalcon dị vòng mới có tác dụng kháng vi sinh vật có thể phát triển thành thuốc điều trị nhiễm khuẩn.
Phương pháp: phản ứng ngưng tụ Claisen Schmidt được dùng tổng hợp chalcon. Phương pháp vi pha loãng trong phiến 96 giếng được dùng để đánh giá tác dụng kháng vi sinh vật của chalcon dị vòng tổng hợp.
Kết quả: 12 dẫn chất chalcon dị vòng (pyridinyl chalcon, furfuranyl chalcon và thiophenyl chalcon) đã được tổng hợp và khảo sát tác động kháng vi khuẩn S. aureus, Strep. Faecalis, P. aeruginosae, E. coli và vi nấm C. albicans. Các dẫn chất pyridinyl chalcon cho thấy có tác dụng mạnh hơn các chalcon dị vòng còn lại.
Kết luận: nhóm chất chalcon dị vòng, đặc biệt pyridinyl chalcon là nhóm tiềm năng để phát triển chất kháng vi sinh vật mới. Dẫn chất 1-pyridin-2-yl-3-(2-
TỔNG HỢP VÀ HOẠT TÍNH KHÁNG VI SINH VẬT MỘT SỐ DẪN CHẤT CHALCON DỊ VÒNG
15 trang |
Chia sẻ: maiphuongtl | Lượt xem: 2032 | Lượt tải: 1
Bạn đang xem nội dung tài liệu Đề tài Tổng hợp và hoạt tính kháng vi sinh vật một số dẫn chất chalcon dị vòng, để tải tài liệu về máy bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
TỔNG HỢP VÀ HOẠT TÍNH KHÁNG VI SINH VẬT
MỘT SỐ DẪN CHẤT CHALCON DỊ VÒNG
TÓM TẮT
Đặt vấn đề: các dẫn chất chalcon đặc biệt chalcon dị vòng hiện nay được quan
tâm nghiên cứu như là tác nhân kháng vi sinh vật tiềm năng.
Mục tiêu: sàng lọc những dẫn chất chalcon dị vòng mới có tác dụng kháng vi
sinh vật có thể phát triển thành thuốc điều trị nhiễm khuẩn.
Phương pháp: phản ứng ngưng tụ Claisen Schmidt được dùng tổng hợp
chalcon. Phương pháp vi pha loãng trong phiến 96 giếng được dùng để đánh
giá tác dụng kháng vi sinh vật của chalcon dị vòng tổng hợp.
Kết quả: 12 dẫn chất chalcon dị vòng (pyridinyl chalcon, furfuranyl chalcon và
thiophenyl chalcon) đã được tổng hợp và khảo sát tác động kháng vi khuẩn S.
aureus, Strep. Faecalis, P. aeruginosae, E. coli và vi nấm C. albicans. Các dẫn
chất pyridinyl chalcon cho thấy có tác dụng mạnh hơn các chalcon dị vòng còn
lại.
Kết luận: nhóm chất chalcon dị vòng, đặc biệt pyridinyl chalcon là nhóm tiềm
năng để phát triển chất kháng vi sinh vật mới. Dẫn chất 1-pyridin-2-yl-3-(2-
chlorophenyl)-2-propene-1-one (N5) có thể sử dụng làm chất “lead compound”
để tổng hợp dãy dẫn chất mới có tác dụng kháng vi sinh vật.
Từ khóa: Chalcon dị vòng, hoạt tính kháng vi sinh vật.
ABSTRACT
SYNTHESIS AND EVALUATION OF ATANTI-MICROBIAL ACTIVITY
OF SOME HETEROCYCLIC CHALCONES
Tran Le Anh Thuy, Nguyen Thi Thao Nhu, Do Truong Ha, Vo Thi Anh Thu,
Tran Thanh Dao
* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 14 - Supplement of No 1 - 2010: 110 – 115
Background: chalcones especially heterocyclic chalcones recently have
reported as potential antibacterial agents.
Objectives: to screen for new like chalcone compounds named heterocyclic
containing at least one heterocyclic ring instead of benzene in typical chalcone
which may show inhibition against microbial germs.
Methods: Claisen Schmidt reaction is applied for synthesis of heterocyclic
chalcone, and their antimicrobial activity is measured by micro-dilute method
in 96 well plates.
Results: 12 new heterocyclic chalcones (pyridinyl chalcone, furfuranyl
chalcone and thiophenyl chalcone) were obtained with good yields and the
results of antimicrobaterial activities on S. aureus, Strep. Faecalis, P.
aeruginosae, E. coli and C. albicans showed that chalcones with pyridine as A
ring are stronger than those of other tested heterocyclic chalcones.
Conclusions: The compound 1-pyridin-2-yl-3-(2-chlorophenyl)-2-propene-1-
one (N5) shows significant activity against both Staphylococcus aureus
(MRSA and MSSA) and Candida albicans. It may be consider as a lead
compound for generation of new heterocyclic chalcone analogues for
antimicrobial agents.
Keywords: heterocyclic chalcone, antimicrobial activity
ĐẶT VẤN ĐỀ
Chalon tuy là một nhóm phụ của flavonoid nhưng gần đây có nhiều dẫn chất
được báo cáo có tác dụng sinh học rất đa dạng như kháng khuẩn, kháng nấm,
kháng ung thư, chống oxy hóa, trung hòa các gốc tự do, kháng viêm, giảm
đau…
(3,4,5,6,7,8)
Bên cạnh nhóm chalcon truyền thống, các nghiên cứu gần đây về hoạt tính
sinh học của các dẫn chất chalcon dị vòng như quinolinyl chalcon, các
chalcon chứa vòng 1,4-dioxan đã thể hiện tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm
khá tốt.(2,9)
Trong tổng hợp hữu cơ, chalcon là tiền chất tổng hợp các flavonoid khác
như flavon, isoflavon có họat tính sinh học đa dạng, các dẫn chất dị vòng
như pyrazolin, isoxazolin, có tác dụng kháng vi sinh vật khá tốt.[1,2,9,11,12]
Khả năng giảm thương tổn gan của một số chalcon chứa vòng 1,4-dioxan in
vivo từ mức độ trung bình đến khá mạnh.(10)
Để góp phần làm phong phú thêm các hợp chất chalcon cả về cấu trúc và
hoạt tính sinh học, chúng tôi thực hiện đề tài tổng hợp và khảo sát tác dụng
sinh học một số dẫn chất chalcon dị vòng với vòng A thay nhân benzen bằng
các nhân thơm khác như thiofen, furfural và pyridin.
Báo cáo này trình bày quá trình tổng hợp và họat tính kháng vi sinh vật của
các dẫn chất chalcon dị vòng.
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Hóa học
Tất cả nguyên liệu tổng hợp được mua từ công ty Aldrich và Merck, sử dụng
trực tiếp không tinh chế lại. Xác định nhiệt độ nóng chảy trên máy
Gallenkamp với nhiệt kế không hiệu chỉnh. Ghi phổ UV trên máy U-2010
(HITACHI) và phổ IR trên máy FTIR 8201 PC (SHIMADZU), phổ 1H-NMR
đo trên máy Brucker (500 MHz).
Phản ứng ngưng tụ Claisen-Schmidt (15) được dung trong tổng hợp 12 dẫn
chất chalcon dị vòng (xem Bảng 1).
Sơ đồ 1. Phản ứng Claisen Schmidt dung tổng hợp chalcon dị vòng
Cho vào erlen dẫn chất acetophenon và dẫn chất benzaldehyd với tỷ lệ mol
(1:1). Hòa tan từ từ hỗn hợp nguyên liệu với một lượng tối thiểu methanol,
cho từ từ lượng KOH tương đương 2 lần số mol vào. Tiến hành ở nhiệt độ
phòng, theo dõi bằng sắc ký lớp mỏng, dung môi khai triển n-hexan - aceton
(5-2). Acid hóa từ từ hỗn hợp bằng HCl 10% đến pH khoảng 4. Tủa hình
thành được lọc, rửa bằng nước lạnh, kết tinh lại trong hỗn hợp methanol thu
sản phẩm. Sấy sản phẩm ở 40oC.
Phương pháp thử vi sinh
Định tính hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm dùng phương pháp khuếch tán
trên thạch. (14) Giá trị nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của các chất tổng hợp
(có kết quả định tính sơ bộ dương tính) được khảo sát bằng phương pháp vi pha
loãng trên phiến 96 giếng.(14)
Vi sinh vật thử nghiệm gồm các vi khuẩn đại diện gram dương như
Staphylococcus aureus nhạy với methicillin ATCC 29213 (MSSA) và kháng
methicillin ATCC 43300 (MRSA), vi khuẩn đại diện nhóm gram âm như
Pseudomonas aeruginosae, Escherichia coli, vi nấm Candida albicans do
Bộ môn vi - Ký sinh, khoa Dược, Đại học Y Dược thành Phố Hồ chí Minh
cung cấp.
KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
Tổng hợp
1-(Pyridin-2-yl)-3-(3-nitrophenyl)-2-propen-1-on (N1)
Hiệu suất: 65%. Điểm chảy: 179-180 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1674
(C=O), 1616 (C=C nhân thơm). Phổ 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm):
8,83 (d, J = 4,5 Hz, 1H, H6’); 8,63 (s, 1H, H2); 8,40 (d, J = 16 Hz, 1H, Hβ);
8,31 (d, J = 7,5 Hz, 1H, H4); 8,29 (d, J = 2 Hz, 1H, H3’); 8,14 (d, J = 8 Hz,
1H, H6); 8,10-8,06 (m, 1H, H4’); 7,98 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 7,77 (t, 1H,
H5); 7,74-7,72 (m, 1H, H5’).
1-(Pyridin-2-yl)-3-(4-dimethylaminophenyl)-2-propen-1-on (N2)
Hiệu suất: 58%. Điểm chảy: 136-137 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1651 (C=O),
1610 (C=C nhân thơm). Phổ 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): 8,78 (d, J
= 4,5 Hz, 1H, H6’); 8,08 (d, J = 8 Hz, 1H, H3’); 8,02 (t, 1H, H4’); 8,01 (d, J =
15,5 Hz, H); 7,79 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 7,67-7,66 (m, 1H, H5’); 7,65 (d, J = 9
Hz, 2H, H2 và H6); 6,77 (d, J = 9 Hz, 2H, H3 và H5); 3,02 (s, 6H, 2 x -CH3).
1-(Pyridin-2-yl)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-2-propen-1-on (N3)
Hiệu suất: 76%. Điểm chảy: 158-160 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1668
(C=O), 1610 (C=C nhân thơm), 1124 (C-O-). Phổ 1H-NMR (500 MHz,
CHCl3-d1, ppm): 8,76-8,75 (m, 1H, H6’); 8,20 (s, 1H, H3’); 8,17 (d, J = 16
Hz, 1H, H); 7,89 (t, 1H, H4’); 7,87 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 7,51-7,48 (m,
1H, H5’); 6,96 (s, 2H, H2 và H6); 3,94 (s, 6H, 2 x -OCH3); 3,91 (s, 3H, -
OCH3).
1-(Pyridin-2-yl)-3-(2,4-dimethoxyphenyl)-2-propen-1-on (N4)
Hiệu suất: 63%. Điểm chảy: 147-148 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1656
(C=O), 1606 (C=C nhân thơm), 1276 (C-O-). Phổ 1H-NMR (500 MHz,
DMSO-d6, ppm): 8,79-8,76 (m, 1H, H6’); 8,16 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 8,08
(d, J = 8 Hz, 1H, H3’); 8,07 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 8,03 (t, 1H, H4’); 7,77 (d,
J = 8,5 Hz, 1H, H6); 7,68-7,65 (m, 1H, H5’); 6,67 (d, J = 2,5 Hz, 1H, H3);
6,64 (d, J = 2 Hz, 8,5 Hz, 1H, H5); 3,92 (s, 3H, -OCH3); 3,85 (s, 3H, -
OCH3).
1-(Pyridin-2-yl)-3-(2-chlorophenyl)-2-propen-1-on (N5)
Hiệu suất: 51%, Điểm chảy: 99-101 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1674 (C=O),
1600 (C=C nhân thơm). Phổ 1H-NMR (500 MHz, CHCl3-d1, ppm): 8,74 (d, J
= 4,5 Hz, 1H, H6’); 8,36 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 8,28 (d, J = 16 Hz, 1H, H);
8,20 (d, J = 8 Hz, 1H, H3’); 7,91-7,86 (m, 2H, H4’ và H5’); 7,51-7,48 (m, 1H,
H3); 7,45-7,43 (m, 1H, H6); 7,35-7,29 (m, 2H, H4 và H5).
1-(Thiophen-2-yl)-3-(3-nitrophenyl)-2-propen-1-on (N6)
Hiệu suất: 52%. Điểm chảy: 157-158 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1651
(C=O), 1600 (C=C nhân thơm). Phổ 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm):
8,77 (d, J = 1,5 Hz, 1H, H5’); 8,43 (d, J = 5 Hz, 1H, H3’); 8,33 (d, J = 8 Hz,
1H, H4); 8,27 (d, J = 2 Hz, 8 Hz, 1H, H6); 8,09 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 8,10
(d, J = 1 Hz, 1H, H2); 7,85 (d, J = 15,5 Hz, 1H, H); 7,77 (t, 1H, H5); 7,54-
7,34 (m, 1H, H4’).
1-(Thiophen-2-yl)-3-(4-dimethylaminophenyl)-2-propen-1-on (N7)
Hiệu suất: 60%. Điểm chảy: 111-113 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1633
(C=O), 1612 (C=C nhân thơm). Phổ 1H-NMR (500 MHz, CHCl3-d1, ppm):
7,83 (d, J = 15,5 Hz, 1H, H); 7,83 (d, J = 9 Hz, 1H, H5’); 7,62 (d, J = 6 Hz,
1H, H3’); 7,55 (d, J = 9 Hz, 2H, H2 và H6); 7,23 (d, J = 15,5 Hz, 1H, H);
7,16 (t, 1H, H4’); 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 2H, H3 và H5); 3,04 (s, 6H, 2 x -CH3).
1-(Thiophen-2-yl)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-2-propen-1-on (N8)
Hiệu suất: 74%. Điểm chảy: 155-156 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1645
(C=O), 1596 (C=C nhân thơm), 1124 (C-O-). Phổ 1H-NMR (500 MHz,
CHCl3-d1, ppm): 7,88-7,87 (m, 1H, H5’); 7,77 (d, J = 15,5 Hz, 1H, H);
7,69 (d, J = 1 Hz, 5 Hz, 1H, H3’); 7,30 (d, J = 15 Hz, 1H, H); 7,19 (t, 1H,
H4’); 6,87 (s, 2H, H2 và H6); 3,93 (s, 6H, 2 x -OCH3); 3,91 (s, 3H, -OCH3).
1-(Thiophen-2-yl)-3-(4-chlorophenyl)-2-propen-1-on (N9)
Hiệu suất: 56%. Điểm chảy: 124-125 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1643
(C=O), 1583 (C=C nhân thơm). Phổ 1H-NMR (500 MHz, CHCl3-d1, ppm):
7,87-7,86 (m, 1H, H5’); 7,79 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 7,70-7,69 (m, 1H, H3’);
7,57 (d, J = 8,5 Hz, 2H, H2 và H6); 7,40 (d, J = 8,5 Hz, 2H, H3 và H5); 7,38
(d, J = 16 Hz, 1H, H); 7,19 (t, 1H, H4’).
1-(Furfuran-2-yl)-3-(3-nitrophenyl)-2-propen-1-on (N10)
Hiệu suất: 54%. Điểm chảy: 183-184 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1656
(C=O), 1604 (C=C nhân thơm). Phổ 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm):
8,73 (s, 1H, H5’); 8,31 (d, J = 8 Hz, 1H, H4); 8,27 (d, J = 2 Hz, 8 Hz, 1H,
H6); 8,10 (t, 1H, H2); 7,94 (d, J = 3,5 Hz, 1H, H3’); 7,91 (d, J = 15,5 Hz, 1H,
H); 7,85 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 7,76 (t, 1H, H5); 6,83-6,82 (m, 1H, H4’).
1-(Furfuran-2-yl)-3-(4-dimethylaminophenyl)-2-propen-1-on (N11)
Hiệu suất: 62%. Điểm chảy: 103-104 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1643
(C=O), 1612 (C=C nhân thơm). Phổ 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm):
8,00 (d, J = 1 Hz, 1H, H5’); 7,67 (d, J = 15 Hz, 1H, H); 7,66 (d, J = 9 Hz,
3H, H2, H6 và H3’); 7,40 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 6,76-6,74 (m, 3H, H3, H5 và
H4’); 3,00 (s, 6H, 2 x -CH3).
1-(Furfuran-2-yl)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-2-propen-1-on (N12)
Hiệu suất: 68%. Điểm chảy: 157-158 oC. Phổ IR (, cm-1, KBr): 1654
(C=O), 1604 (C=C nhân thơm), 1122 (C-O-). Phổ 1H-NMR (500 MHz,
CHCl3-d1, ppm): 7,80 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 7,66 (d, J = 1 Hz, 1H, H5’);
7,34 (d, J = 16 Hz, 1H, H); 7,34 (d, J = 3,5 Hz, 1H, H3’); 6,88 (s, 2H, H2 và
H6); 6,61-6,60 (m, 1H, H4’); 3,93 (s, 6H, 2 x -OCH3); 3,90 (s, 3H, -OCH3).
Tác dụng kháng vi sinh vật
Định tính tác dụng kháng vi sinh vật của các chất tổng hợp ở nồng độ 1024
µg/ml theo phương pháp khuếch tán trên bản thạch, kết quả tóm tắt trong
Bảng 1.
Bảng 1. Đường kính vùng ức chế vi sinh vật của các dẫn chất tổng hợp (mm)
Mẫu Vi sinh vật thử nghiệm
MSSA MRSA S. faecalis E. coli P. aeruginosa
C.
albicans
N1 - - - - - 3
N2 5 - - - - -
N3 - - - - - -
N4 3 3 - - - -
N5 9 7 - - - 10
N6 - - - - - 4
N7 4 3 - - - -
N8 - - - - - -
N9 - - - - - 3
N10 - - - - - 3
N11 4 3 - - - -
N12 - - - - - -
Giá trị MIC (µg/ml) được xác định theo phương pháp vi pha loãng trên plate
96 giếng, kết quả mô tả trong Bảng 2.
BÀN LUẬN
Dẫn chất N5 ức chế các vi khuẩn gram dương MSSA, MRSA thử nghiệm và vi
nấm Candida albicans với MIC lần lượt là 4 µg/ml, 8 µg/ml và 8 µg/ml. Từ kết
quả xác định MIC cho thấy tác dụng kháng MSSA của N5 tương đương với
amoxicillin-acid clavulanic, ampicillin-sulbactam hay cefuroxim theo cách
phân loại tài liệu(5).
N5 kháng MRSA với MIC = 8 µg/ml thể hiện khả năng kháng tương đương
lomefloxacin hoặc fleroxacin(5).
Trên Candida albicans, N5 có MIC = 8 µg/ml cho thấy tác dụng kháng tương
đương fluconazol và thấp hơn micafungin có MIC = 2 µg/ml(6).
Bảng 2. Giá trị MIC (µg/ml) của các dẫn chất có hoạt tính
Mẫu MIC (g/ml)
MSSA MRSA Candida
albicans
N1
N2
N4
N5
N6
N7
N9
N10
N11
Gentamicin
Ketoconazol
-
128
1024
4
-
512
-
-
256
2
-
-
-
1024
8
-
1024
-
-
1024
4
-
1024
-
-
8
512
-
1024
1024
-
-
16
(-): không có tác dụng ở nồng độ > 1024 g/ml
Trên thị trường hiện đang có một số biệt dược như K-Genlozin, Maxgel…
chứa 3 thành phần là gentamicin, clotrimazol và betamethasol dipropionat trị
bệnh ngoài da. Trong đó gentamicin có tính kháng khuẩn, clotrimazol với tác
dụng kháng nấm và corticoid chống viêm. Từ kết quả thử MIC ban đầu cho
thấy tác dụng kháng tụ cầu của N5 gần như tương đương với gentamicin, ngoài
ra tác dụng kháng Candida albicans của N5 cũng tương đương với fluconazol
nên nhận định N5 là một hoạt chất tiềm năng có thể thay thế gentamicin và
clotrimazol trong các chế phẩm trên nếu được nghiên cứu đầy đủ hơn về tác
dụng kháng vi sinh vật, dược lực, độc tính ...của chất này.
Liên quan cấu trúc và tác dụng
Có thể sơ bộ kết luận sự thay thế nhân thơm benzen (vòng A) bằng nhân
thơm dị vòng khác như pyridin, thiophen, furfuran đã tạo nên dẫn chất tương
tự chalcon tác dụng kháng MSSA và MRSA. Trong số chalcon dị vòng thử
nghiệm, dẫn chất có nhân pyridin có tác dụng kháng MSSA và MRSA mạnh
nhất.
Trong công thức của N5, sự có mặt của nhóm thế Cl ở vị trí 2 trên vòng B
làm gia tăng đáng kể đến khả năng kháng khuẩn, kháng nấm của hợp chất
tổng hợp.
Nhóm N-dimethylamino ở vị trí 4 trên vòng B làm giảm tác dụng kháng vi
sinh vật của các chalcon dị vòng tổng hợp.
KẾT LUẬN
Áp dụng phương pháp ngưng tụ Claisen Schmidt đã tổng hợp được 12 dẫn
chất chalcon dị vòng. Các chất này đã được tinh khiết và xác định các thông
số lý hóa đặc trưng, trong đó có các phổ IR, UV và H1-NMR.
Trong 12 chất khảo sát có 10 chất có hoạt tính kháng vi sinh vật trong đó N5
có tác dụng kháng MSSA mạnh với MIC = 4 g/ml, kháng MRSA với MIC
= 8 g/ml và kháng Candida albicans mạnh với MIC = 8 g/ml. Đây là chất
có tiềm năng kháng vi sinh vật tốt cả vi khuẩn tụ cầu và vi nấm, có thể dùng
làm “lead compound” trong nghiên cứu tổng hợp và phát triển thành thuốc
điều trị bội nhiễm.
Các file đính kèm theo tài liệu này:
- 171_0931.pdf