Khóa luận Nghiên cứu sự đa dạng di truyền của nấm Metarhizium anisopliae dựa v̀ào trình tự gen Pr1 v̀à vùng rDNA- ITS

Nghiên cứu sự đa dạng di truyền của nấm Metarhizium anisopliae dựa v̀o trình tự gen Pr1 v̀ vùng rDNA- ITS MỤC LỤC CHưƠNG TRANG Trang tựa Lời cảm tạ .iii Tóm tắt iv Mục lục v Danh śch ćc chữ viết tắt .viii Danh śch ćc bảng .ix Danh śch ćc hình x ̀ 1. MƠ ĐÂU 1̉ 1.1.Đặt vấn đề . 1 1.2.Mục tiêu v̀ yêu cầu đề t̀i 2 1.2.1. Mục tiêu 2 1.2.2. Yêu cầu đề tai 2̀ 1.3.Đối tượng nghiên cứu .2 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 2.1. Giơi thiêu nấ m Metarhizium anisopliae .3́ ̣ 2.2. Sơ lược về phương thức xâm nhiễm của nấm ký sinh trên côn trùng. .6 2.3. Hoạt t́nh sinh học .7 2.4. Hiệu quả phòng trừ sâu hại bằng chế phẩm nấm 2.5. Một số nghiên cứu trong nước v̀ ngòi nước về nấm Metarhizium anisopliae v̀ những nấm ký sinh côn trùng kh́c ứng dụng để phòng trừ sâu hại. .8 2.5.1. Nghiên cứu trong nước .8 2.5.2. Nghiên cứu ngòi nước .9 2.6. Giơi thiêu gen Pr1 10́ ̣ 2.7. Vai tro cua Protease Pr1 . 10̀ ̉ 2.8.Tông quan về ITS-rDNA . 10̉ 2.8.1. Giơi thiêu về vung rDNA va vung ITS 10́ ̣ ̀ ̀ ̀ 2.9. Môt số nghiên cưu trong nươc va nươc ngoai về sư đa dang cua nấ m ̣ ́ ́ ̀ ́ ̀ ̣ ̣ ̉ Metarhizium anisopliae dưa vao gen Pr1 v̀ vùng rDNA-ITS . 12̣ ̀ 2.9.1. Nghiên cưu nươc ngoai . 12́ ́ ̀ 2.9.2. Nghiên cưu trong nươc 14́ ́ 2.10. Phương phap phat hiên gen Pr1 v̀ vùng rDNA-ITS . 14́ ́ ̣ 3. VẬT LIỆU VÀ PHưƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 16 3.1. Thời gian v̀ địa điểm . 16 3.1.1. Thời gian . 16 3.1.2. Địa điểm 16 3.2. Vật liệu v̀ hó chất . 16 3.2.1. Vật liệu 16 3.2.2. Hó chất 17 3.2.3. Ćc thiết bị ch́nh 17 3.3.Nội dung nghiên cứu . 18 3.4. Phương ph́p nghiên cứu 18 3.4.1.Kiêm tra DNA tông số đươc ly trich tư cac dong nấ m ̉ ̉ Metarhizium ̣ ́ ̀ ́ ̀ anisopliae . 18 3.4.2. Khuếch đại gen Pr1 . 18 3.4.3. Khuế ch đai vung rDNA-ITS .21̣ ̀ 3.5. Tiế n hanh giai trinh tư gen gây đôc Pr1 v̀ vùng ITS 22̀ ̉ ̀ ̣ ̣ ̉ 3.6. Tinh sach san phâm PCR 22̣ ̉ 3.7. Tinh sạch sản phẩm đọc trình tự .24 3.8. Phương phap phân tich trinh tư 24́ ́ ̀ ̣ 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .26 4.4. DNA cua cac mâu nấ m Metarhizium anisopliae đươc dung trong nghiêñ ̣ ̉ ́ ̀ cưu .26́ 4.5. Kế t qua tinh sach DNA tông số 28̉ ̣ ̉ 4.6. Kế t qua khuế ch đai vung ITS1-5.8S-ITS2. 28̉ ̣ ̀ 4.7. Kế t qua giai trinh tư vung ITS1-5.8S-ITS2 29̉ ̉ ̀ ̣ ̀ 4.8. Kế t quả khuếch đại gen Pr1 .36 4.9. Kế t qua đoc trinh tư gen Pr1 36̉ ̣ ̀ ̣ 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 42 5.4. Kết luận 42 5.4.2. Ph́t hiện v̀ đọc trình tự gen Pr1 .42 5.4.3. Ph́t hiện v̀ đọc trình tự vùng rDNA-ITS 42 5.5. Đề nghị .43 5.6. Hạn chế của đề t̀i .43 6. TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 7. PHỤ LỤC .47 DANH SÁCH CÁC BẢNG BẢNG TRANG Bảng 2.1 Giơi thiêu nấ m Metarhizium anisopliae .3́ ̣ Bảng 3.1 Nguồ n nấ m Metarhizium anisopiae đươc thu thâp ơ môt số đia ̣ ̣ ̉ ̣ ̣ phương dung trong thi nghiêm 16̀ ́ ̣ Bảng 3.2 Th̀nh phần của phản ứng PCR khuếch đại gen Pr1 vơi căp primer ́ ̣ METPR1/METPR4 . 19 Bảng 3.3 Th̀nh phần của phản ứng PCR khuếch đại gen Pr1 vơi căp primer ́ ̣ METPR2/METPR5 .20 Bảng 3.4 Th̀nh phần của phản ứng PCR khuếch đại gen vùng rDNA -ITS .21 Bảng 3.5 Th̀nh phần của phản ứng đọc trình tự 23 Bảng 4.1 Ćc ngùn nấm Metarhizium anisopliae trên genbank đươc dung đê ̉ ̣ ̀ so sanh trinh tư vung rDNA-ITS .30́ ̀ ̣ ̀ Bảng 4.2 Ma trân khoang cach giưa cac dong nấ m Metarhizium anisopliae trong̣ ̉ ́ ̃ ́ ̀ nươc khi dưa vao trinh tư vung rDNA-ITS .31́ ̣ ̀ ̀ ̣ ̀ Bảng 4.3 Ma trân khoang cach giưa cac dong nấ m Metarhizium anisopliae trong̣ ̉ ́ ̃ ́ ̀ nươc va trên thế giơi dưa vao trinh tư vung rDNA-ITS .33́ ̀ ́ ̣ ̀ ̀ ̣ ̀ Bảng 4.4 Ćc ngùn nấm Metarhizium anisopliae trên genbank đươc dung đê so ̉ ̣ ̀ śnh trình tự gen Pr1 .37 Bảng 4.5 Ma trân khoang cach giưa cac dong nấ m Metarhizium anisopliae trong̣ ̉ ́ ̃ ́ ̀ nươc khi dưa vao trinh tư gen Pr1 38́ ̣ ̀ ̀ ̣ Bảng 4.6 Ma trân khoang cach giưa cac dong nấ m Metarhizium anisopliae trong̣ ̉ ́ ̃ ́ ̀ nươc va trên thế giơi dưa vao trinh tư gen Pr1 40́ ̀ ́ ̣ ̀ ̀ ̣ DANH SÁCH CÁC HÌNH HÌNH TRANG Hình 2.1 Nấm Metarrhizium anisopliae ký sinh trên những côn trùng kh́c nhau 5 Hình 2.2 Sơ đồ cua cac vung trên rDNA . 12̉ ́ ̀ Hình 3.1 Sơ đồ primer đươc sư dung đê khuế ch đai gen Pr1 18̉ ̣ ̣ ̣ ̉ Hình 3.2 Sơ đồ primer đươc sư dung đê khuế ch đai vung ITS .21̉ ̣ ̣ ̣ ̉ ̀ Hình 3.3 Nhưng phương phap đươc sư dung trong phân tich trình tự 24̃ ́ ̣ ̉ ̣ ́ Hình 3.4 Sơ đồ phân tich trinh tư co đô tương đồ ng cao .25́ ̀ ̣ ́ ̣ Hình 4.1 DNA tổng số của nấm Metarrhizium anisopliae 26 Hình 4.2 Sơ đồ tinh sach DNA tông số cua cac mâu nấ m Metarhizium̉ ̃ ̣ ̉ ́ anisopliae đươc sư dung trong nghiên cưu .27̣ ̉ ̣ ́ Hình 4.3 DNA tông số cua nấ m Metarhizium anisopliae đươc tinh sach .28̉ ̣ ̣ ̉ Hình 4.4 Hình khuếch đại vùng rDNA-ITS 28 Hình 4.5 Cây ph́t sinh lòi giữa ćc dòng Metarhizium anisopliae trong nước dựa v̀o trình tự vùng rDNA-ITS 32 Hình 4.6 So sanh quan hê giữa ćc dòng Metarhizium anisopliae trong nước v̀ ́ ̣ trên thế giới dưa vao trinh tư vung rDNA-ITS 34̣ ̀ ̀ ̣ ̀ Hình 4.7 Hình khuếch đại gen Pr1 .36 Hình 4.8 Cây ph́t sinh lòi giữa ćc dòng Metarhizium anisopliae trong nước dựa v̀o trình tự gen Pr1 39 Hình 4.9 So sanh quan hê giữa ćc dòng Metarhizium anisopliae trong nước v̀ ́ ̣ trên thế giới dưa vao trinh tư gen Pr1 .41̣ ̀ ̀ ̣ . Nghiên cứu sự đa dạng di truyền của nấm Metarhizium anisopliae dựa v̀ào trình tự gen Pr1 v̀à vùng rDNA- ITS

76 trang | Chia sẻ: maiphuongtl | Lượt xem: 1896 | Lượt tải: 0

Bạn đang xem trước 20 trang tài liệu Khóa luận Nghiên cứu sự đa dạng di truyền của nấm Metarhizium anisopliae dựa v̀ào trình tự gen Pr1 v̀à vùng rDNA- ITS, để xem tài liệu hoàn chỉnh bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên

e UK Wang,C.và ctv 12-9 -2003 AY389126 M.a.var.anisopliae Ethiopia Wang,C.và ctv 12-9 -2003 AY289123 M.a.var.anisopliae China Wang,C.và ctv 12-9 -2003 AY389119 M.a.var.anisopliae Austria Wang,C.và ctv 12-9 -2003 AY389121 M.a.var.anisopliae Brazil Wang,C.và ctv 12-9 -2003 AY389133 M.a.var.anisopliae USA Wang,C.và ctv 12-9 -2003 38 Trên cở sở có kết quả của sự so sánh chúng tôi đã thiết lập đƣợc ma trận khoảng cách giữa các dòng nấm với nhau dựa vào chƣơng trình Draw N-J trong phần mềm ClustalX. Kết quả so sánh đƣơc̣ trình bày trong phần phu ̣luc̣ 2 Bảng 4.5: Ma trận khoảng cách giữa các dòng Metarhizium anisopliae trong nƣớc dƣạ vào trình tự gen Pr1 BDTV5 RNLA RNBT BDTN BXDTV BDQ96 SCLLLA BDTV5 100 100 99 99 99 99 95 RNLA 100 100 99 99 99 99 95 RNBT 99 99 100 99 99 99 95 BDTN 99 99 99 100 100 100 95 BXDTV 99 99 99 100 100 100 95 BDQ96 99 99 99 100 100 100 95 SCLLLA 95 95 95 95 95 95 100 Kết quả so sánh cho thấy: Có sự khác biệt về trình tự nuleotide giữa dòng SCLLLA với những dòng còn lại. Sự khác biệt chiếm khoảng 5% (54nu/1091nu) .Điều này có thể đƣợc giải thích là dòng SCLLLA đƣợc phân lập trên sâu cuốn lá thuộc Cánh vảy (Lepidoptera) trong khi đó những dòng nấm còn lại đƣợc phân lập trên bọ dừa, rầy nâu và bọ xít đen thuộc bộ cánh cứng (Coleoptera), do đó có sự khác biệt về mặt ký chủ . Nhƣ vậy sự khác biệt về mặt ký chủ đã ảnh hƣởng tới sự đa dạng về mặt di truyền của gen Pr1. Cây phát sinh loài giữa các dòng Metarhizium anisopliae đƣợc dựng bằng chƣơng trình Bootstrap Maximum Parsimony cũng đã cho thấy mức độ tƣơng đồng giữa những dòng nấm . 39 Đơn vị di truyền: 10 Hình 4.8: Cây phát sinh loài giữa các dòng nấm Metarhizium anisopliae dƣạ vào trình tự gen Pr1 Với mục đích nghiên cứu sự đa dạng của gen Pr1 giữa những dòng trong nƣớc với những dòng trên thế giới, chúng tôi đã tiến hành so sánh với những trình tự thu thập trên genbank. Các nguồn nấm đƣợc sử dụng trong so sánh đƣợc thể hiện trong bảng 4.4. Kết quả so sánh cho thấy sự tƣơng đồng cao giữa những dòng nấm trong nƣớc và các dòng trên genbank. Tỉ lệ tƣơng đồng cao nhất là 99% và tỉ lệ tƣơng đồng thấp nhất là 94%. Chúng tôi đã phát hiện đƣợc một s ố vị trí đột biến trong một số dòng so với quần thể . Trong đó đối với dòng RNBT chúng tôi đa ̃tìm thấy có 5 vị trí đột biến bao gồm chèn môṭ nu G ở vi ̣ trí 197, thay nu C bằng G ở vi ̣ trí 906 và thay nu C bằng T ở 3 vị trí : 872, 943, 922. Còn ở hai dòng BDTV 5 và RNLA xuất hiêṇ 4 vị trí đột biến. 2 đôṭ biến thay C bằng G ở vi ̣ trí nu thƣ́ 943 và 1039, 1 đôṭ biến thay thế G bằng T ở vi ̣ trí 861 và một đột biến thay C bằng A ở vị trí nu 926. Trong dòng BDQ96 có môṭ đôṭ biến ở vi ̣ trí 922 và kiểu đột biến là thay thế môṭ nu C bằng môṭ nu T. 40 Bảng 4.6: Ma trâṇ khoảng cách giƣ̃a các dòng nấm Metarhizium anisopliae trong nƣớc và trên thê giới dựa vào trình tự gen Pr1 Chúng tôi cũng nhận thấy có sự khác biệt về trình tự xảy ra ở 6 dòng nấm của Viêṭ Nam so với thế giới ngoaị trƣ̀ dòng SCLLLA . Nhƣ̃ng sƣ ̣khác biêṭ xảy ra ở 6 vị trí trên toàn bô ̣trình tƣ ̣của gen Pr1, chiếm tỉ lê ̣0.6%. Sƣ ̣khác biêṭ đầu tiên mà chúng tôi nhâṇ thấy là taị vi ̣ trí nu thƣ́ 217, tại vị trí này có sự thay thế một nu T bằng một nu G . Nhƣ̃ng đôṭ biến tiếp theo xảy ra ở các vi ̣ trí : 583, 974 với các kiểu đôṭ biến là thay t hế giƣ̃a nu A và C , giƣ̃a A và T ở vi ̣ trí 637 và 1055.Và đột biến cuối cùng xảy ra ở vị trí nu thƣ́ 754, tại đây 1 nu G đƣơc̣ thay bằng 1 nu C. Nhƣ̃ng đôṭ biến này có thể đƣơc̣ hình thành trong quá trình phát sinh bào tử dƣới ảnh hƣởng của các yếu tố bên ngoài . Kết quả khác biệt giữa các mẫu nấm Metarhizium anisopliae của Việt Nam so với thế giới là điều hoàn toàn có thể xảy ra . Bởi lẽ, vị trí địa lý có sự khác biệt rất lớn về điều kiện tự nhiên, khí hậu và thời tiết. Bản thân các nguồn nấm genbank cung cấp cũng có sự khác biệt. Điều đó chứng tỏ có nhiều yếu tố ảnh hƣởng đến sự đa dạng di truyền của gen Pr1, cụ thể nhƣ vị trí địa lý, ký chủ, cây trồng. 41 Cây phát sinh loài đƣợc vẽ bằng chƣơng trình Bootstrap Maximum Parsimony trong gói phần mềm Phylip với 100 lần lăp̣ laị. Đơn vi ̣ di truyền là 10 Hình 4.9: So sánh quan hê ̣ giữa các dòng nấm Metarhizium anisopliae trong nƣớc và thế giới dƣạ vào trình tự gen Pr1. Các dòng nấm của Việt Nam và thế giới đƣợc chia làm 2 nhóm: - Nhóm I: gồm những dòng Metarhizium anisopliae đƣợc phân lập tại Việt Nam. - Nhóm II: gồm những dòng Metarhizium anisopliae đƣợc phân lập tại nhiều nơi trên thế giới. Tuy nhiên do trong quá trình đọc trình tự gen Pr1 không hoàn toàn do đó việc nghiên cứu sự đa dạng di truyền dựa vào trình tự gen Pr1 còn nhiều hạn chế. 42 Chƣơng 5. KẾT LUÂṆ VÀ ĐỀ NGHI ̣ 5.1. Kết luâṇ 5.1.1. Phát hiện và đọc trình tự gen Pr1 Xác định đƣợc gen gây độc Pr1 của 10 dòng nấm Metarhizium anisopliae. Kích thƣớc của gen Pr1 sau khi đƣơc̣ đoc̣ bằng 2 primer METPR2/METPR5 là 1091 bp. Có sự tƣơng đồng cao về mặt di truyền của gen Pr1 giƣ̃a các dòng nấm Metarhizium anisoplise trong nƣớc. Tỉ lệ tƣơng đồng c ao nhất là 100% và thấp nhất là 95%. Xác định đƣợc sự khác biệt giữa dòng SCLLLA với những dòng còn lại . Tỉ lệ khác biệt chiếm 5% (54/1091). Xác định đƣợc sự khác biệt về trình tự của 6 dòng nấm trong nƣớc so với thế giới bao gồm các dòng BDTV5, RNLA, RNBT, BDTN, BXDTV, BDQ96. Tỉ lệ tƣơng đồng giữa các dòng nấm Metarhizium anisopliae so với nhƣ̃ng dòng trên genbank khá cao. Tỉ lệ này nằm trong khoảng 94%-99%. 5.1.2. Phát hiện và đọc trình tự vùng rDNA-ITS. Trình tự vùng ITS1 - 5,8 S - ITS2 đọc đƣợc có kích thƣớc là 473 nu. Vùng gen 5,8 S có kích thƣớc 158 nu. Kích thƣớc vùng ITS1 và ITS2 lần lƣợt là 138 nu và 177 nu..Tỷ lệ G+C của vùng ITS1 là 43,2 %, của vùng ITS2 là 59,3 %, của vùng 5,8 S là 45,9 %. Tỷ lệ G+C trên toàn vùng trình tự đọc đƣợc là 51,2 %. Phát hiện đƣợc 4 vị trí đột biến ở hai dòng BXDTG và RBCQ9 so với những dòng còn lại. Đó là đột biến thay thế T bằng C ở vị trí Nu thứ 32 , đột biến thêm T ở vị trí nu thứ 109 và 122, đột biến còn lại là thêm một nu A ở vị trí nu thứ 133. 43 Tỉ lệ đột biến trong vùng ITS1 là 2.9% (4/139 nu), đó đều là những điểm đột biến xảy ra ở 2 dòng BXDTG và RBCQ9. Sƣ ̣tƣơng đồng cao giƣ̃a các dòng nấm Metarhizium anisopliae trong nƣớc so với các dòng trên thế giới .Tuy nhiên có 5 vị trí xảy ra đột biến giữa dòng nấm của Việt Nam (đƣợc sử dụng trong đề tài) so với thế giới, chiếm tỷ lê ̣1%. 5.2. Đề nghi ̣. Tiến hành đoc̣ trình tƣ ̣gen Pr1 của nhiều mẫu nấm Metarhizium anisopliae khác nhau trong cả nƣớc nhằm đánh giá mối quan hê ̣giƣ̃a hoaṭ lƣc của enzyme Protease với sƣ ̣thay đổi trong trình tƣ ̣nucleotide của gen Pr1. Tìm hiểu sự khác biệt về trình tự trong vùng rDNA -ITS với sƣ ̣thay đổi về tính đôc̣ của nấm Metarhizium anisopliae. Sƣ̉ duṇg thêm nhƣ̃ng phƣơng pháp nghiên cƣ́u đa daṇg di truyền khác nhƣ RAPD, AFLP, RFLP….nhằm đánh giá chính xác mối quan hê ̣về măṭ di truyền giƣ̃a các dòng nấm với nhau. 5.3. Hạn chế của đề tài Do trình tƣ ̣gen Pr1 đƣơc̣ đoc̣ không hoàn chỉnh do đó viêc̣ so sánh còn haṇ chế . Chƣa so sánh đƣợc trình tự lúc bắt đầu và kết thúc quá trình đọc. 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT 1. Bùi Chí Bửu-Nguyễn Thị Lang, 1999. Di truyền phân tử - Những nguyên tắc cơ bản trong chọn giống cây trồng. Nhà xuất bản Nông nghiệp. TP.Hồ Chí Minh. Trang 195 – 236. 2. Nguyễn Lân Dũng, 1981. Sử dụng vi sinh vật để phòng trừ sâu hại cây trồng. Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật Hà Nội 3. Hồ Huỳnh Thùy Dƣơng, 1998. Sinh học phân tử. Nhà xuất bản giáo dục. Trang 197 – 206. 4. Nguyễn Thị Thƣ Hƣơng, 2004. Xác định gen gây độc của nấm Metarhizium ký sinh trên sâu hại cây trồng bằng kỹ thuật PCR. Luận án thạc sĩ. Trƣờng Đại Học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh. Trang 7 –30. 5. Trần Văn Mão, 2004. Sử dụng vi sinh vật có ích tập II. Nhà xuất bản nông nghiệp Hà Nội. Trang 49 – 90. 6. Bùi Xuân Đồng, Nguyễn Huy Văn, 2000. Vi nấm dùng trong công nghệ sinh học. Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật Hà Nội. Trang 140 – 145. 7. Nguyễn Ngọc Tú, Nguyễn Cửu Thị Hƣơng Giang, 1997. Bảo vệ cây trồng bằng các chế phẩm từ vi nấm. Nhà xuất bản nông nghiệp thành phố Hồ Chí Minh. Trang 19 – 44. 8. Lƣu Phúc Lơị , 2005. Bài giảng sinh tin học ứng dụng phần II .Trƣờng Đaị Hoc̣ Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh. 45 9. Nguyêñ Thi ̣ Tiến Si ̃ , 2005. Sử dụng kỹ thuật RFLP khảo sát sự đa dạng di truyền của nấm Rhizoctonia solani phân lập từ nhiều cây ký chủ khác nhau. Luận văn tốt nghiêp̣. Trƣờng Đại Học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh. 10. Huỳnh Ngọc Phƣơng , 2005. Xác điṇh gen gây đôc̣ và tính đa daṇg di truyền của nấm Metarhizium anisopliae ký sinh trên côn trùng. Luận văn tốt nghiêp̣ . Trƣờng Đại Học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh. TÀI LIỆU NƢỚC NGOÀI 11. Soraya C.M.L., Bertioli D.J., Butt T.M., Carder J.H., Burrows P.R., and Feberdy J.F., 1997. Amplification and restriction endonuclease digestion of the Pr1 gene for the detection and characterization of Metarhizium strains. Mycological research 101 (3): 257 – 265 12. Chengshu Wang, Milton A. Typas, Tarig M. Butt.,2002.Detection and characterisation of Pr1 virulent gene deficienciens in the insect pathogenic fungus Metarhizium anisopliae. FEMS Microbiology Letters 213 (2002): 251-255. 13.Chikako Yazawa and Susumu Shimiz,2002.Sequence Comparison of the 5.8S rDNA Region with the Flanking among Metarhizium anisopliae and the Related species. Journal of Insect Biotechnology and Sericology 71,55-59. 14.Savita Bagga, Gang Hu, Steven E.Screen, Raymond J. ST.Leger.Reconstructing the diversification of subtilisins in the pathogenic fungus Metarhizium anisopliae. An international journal on genes and genomes, gene 324(2004), 159-169. 15. M.S.Rakotoninainy, M.L.Cariou, Y.Brygoo and G.Riba. Phylogenetic relationships within the genus Metarhizium anisopliae on 28S rRNA sequences and isozyme comparison. Mycol.Res.98:225-230. 16. Chengshu Wang, Anke Skrobek, Tariq M. Butt. Concurrence of losing a chromosome and the ability to produce destruxins in a mutant of Metarhizium anisopliae .FEMS microbiology Lettters 226 (2003) 373-378. 46 17. Savita Bagga, Gang Hu, Steven E. Screen, Raymond J. St.Leger. Reconstructing the diversification of subtilisins in the pathogenic funfus Metarhizium anisopliae. Gene 324(2004) 159-169. 18. Leal S.C.M., Bertioli D.J., Butt T.M., Carder J.H., Burrows P.R., and Feberdy J.F., 1994. Characterization of isolates of the entomopathogenic fungus Metarrhizium anisopliae by RAPD – PCR. Mycological Research 98: 1077 – 1081. 19. Berbee, M. L., Yoshimura A., Sugiyama J., and Taylor J. W., 1995. Is Penicillium monophyletic an evaluation of phylogeny in the family Trichocomaceae from 18S, 5.8S and ITS ribosomal sequence data. Mycologia 87: 210-222. 20. Joshi L., Leger R.J.St., and Roberts D.W., 1997. Isolation of a cDNA encoding a novel subtilisin – like protease (Pr1B) from the enthomopathogenic fungus, Metarhizium anisopliae using differential display RT-PCR. Gene 197: 1 – 8. 21. Marilena Aquino de Muro, Samina Mehta, David Moore, 2003.The use of amplified fragment length polymorphism for molecular analysis of Beauveria bassiana isolates from Kenya and other countries, and their correlation with host and geographical origin. FEMS Microbiology Letters 229: 249-257 22. N.D.Pipe, D.Chandler, B.W.Bainbridge and J.B.Heale, 1995. Restriction fragment length polymorphisms in the ribosomal RNA gene complex of isolates of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae.Mycol.Res 99: 485-491 23. Malena P. Panton, Annoula Mavridou, Milton A.Typas, 2002. IGS sequence variation, group-I introns and the complete nuclear ribosomal DNA od entomopathogenic fungus Metarhizium: excellent tools for isolate detection and phylogenetic analysis. Fungal Genetics and Biology 38 (2003) 159-174. 23. MJ Bidochka, CL Small. Phylogeography of Metarhizium, an insect pathogenic fungus. Ecology and evolution, 28-50. 47 PHỤ LỤC Phụ lục 1. Kết quả sắp gióng côṭ triǹh tƣ ̣các dòng nấm Metarhizium anisopliae var. anisopliae trong nƣớc và trên thế giới dƣạ vào triǹh tƣ ̣vùng rDNA-ITS. BDTN CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC 50 BDTV5 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC BDQ96 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC BDBD7 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC RNBT CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC RNLA CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC BXDTV CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC EF113339 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC SCLLLA CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC EF113341 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC BXDTG CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATTATACCTTTAATTGTTGC RBCQ9 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATTATACCTTTAATTGTTGC AF136376 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATTATACCTTTAATTGTTGC EF051717 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC EF051721 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATCATACCTTTAATTGTTGC AF516320 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATTATACCTTTAATTGTTGC DQ679899 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATTATACCTTTAATTGTTGC AB071714 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATTATACCTTTAATTGTTGC AB071712 CCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTG-AATTATACCTTTAATTGTTGC **************************** *** ***************** BDTN TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- 100 BDTV5 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- BDQ96 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- BDBD7 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- RNBT TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- 48 RNLA TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- BXDTV TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- EF113339 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- SCLLLA TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- EF113341 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- BXDTG TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTTT RBCQ9 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTTT AF136376 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- EF051717 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCGAACCTTCTGAATTTTTT- EF051721 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCGAACCTTCTGAATTTTTT- AF516320 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- DQ679899 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- AB071714 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- AB071712 TTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTT- ******************************* ***************** ITS1 5.8S BDTN AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC 150 BDTV5 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC BDQ96 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC BDBD7 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC RNBT AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC RNLA AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC BXDTV AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC EF113339 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC SCLLLA AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC EF113341 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC BXDTG AATAAGTATCTTCTGAGTGGTTTAAAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC RBCQ9 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTTTAAAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC AF136376 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC EF051717 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT---AAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC EF051721 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT---AAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC AF516320 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAA-TGAATCAAAACTTTCAAC DQ679899 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT--AAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC AB071714 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT---AAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC AB071712 AATAAGTATCTTCTGAGTGGTT---AAAAAAATGAATCAAAACTTTCAAC ********************** ****** ****************** 49 BDTN AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA 200 BDTV5 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA BDQ96 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA BDBD7 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA RNBT AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA RNLA AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA BXDTV AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA EF113339 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA SCLLLA AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA EF113341 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA BXDTG AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA RBCQ9 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA AF136376 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA EF051717 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA EF051721 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA AF516320 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA DQ679899 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA AB071714 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA AB071712 AACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATA ************************************************** BDTN AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA 250 BDTV5 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA BDQ96 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA BDBD7 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA RNBT AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA RNLA AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA BXDTV AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA EF113339 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA SCLLLA AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA EF113341 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA BXDTG AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA RBCQ9 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA AF136376 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA EF051717 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA 50 EF051721 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA AF516320 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA DQ679899 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA AB071714 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA AB071712 AGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA ************************************************** 5.8S ITS2 BDTN TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC 300 BDTV5 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC BDQ96 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC BDBD7 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC RNBT TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC RNLA TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC BXDTV TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC EF113339 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC SCLLLA TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC EF113341 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC BXDTG TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC RBCQ9 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC AF136376 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC EF051717 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC EF051721 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC AF516320 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC DQ679899 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC AB071714 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC AB071712 TTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGC ************************************************** BDTN CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT 350 BDTV5 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT BDQ96 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT BDBD7 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT RNBT CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT RNLA CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT BXDTV CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT EF113339 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT 51 SCLLLA CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT EF113341 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT BXDTG CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT RBCQ9 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT AF136376 CCCTCAAGTCCCCTGTGGGACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT EF051717 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT EF051721 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT AF516320 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT DQ679899 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT AB071714 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT AB071712 CCCTCAAGTCCCCTGTGG-ACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTT ****************** ******************************* BDTN TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC 400 BDTV5 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC BDQ96 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC BDBD7 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC RNBT TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC RNLA TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC BXDTV TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC EF113339 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC SCLLLA TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC EF113341 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC BXDTG TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC RBCQ9 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC AF136376 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC EF051717 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC EF051721 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC AF516320 TCCAGCGCAGCCGTCCCTCAAATCAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC DQ679899 TCCAGCACAGCCGTCCCTCAAATCAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC AB071714 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC AB071712 TCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCC ****** *********** **** ************************** BDTN TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC 450 BDTV5 TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC 52 BDQ96 TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC BDBD7 TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC RNBT TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC RNLA TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC BXDTV TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC EF113339 TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC SCLLLA TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC EF113341 TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC BXDTG TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC RBCQ9 TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC AF136376 TCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC EF051717 TCTGCGCAGTAGTAAAACACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC EF051721 TCTGCGCAGTAGTAAAACACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC AF516320 TCTGCGCAGTAGTAAAACACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC DQ679899 TCTGCGCAGTAGTAAAACACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC AB071714 TCTGCGCAGTAGTAAAACACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC AB071712 TCTGCGCAGTAGTAAAACACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGC **************** ********************************* BDTN CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- 473 BDTV5 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- BDQ96 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- BDBD7 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- RNBT CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- RNLA CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- BXDTV CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- EF113339 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- SCLLLA CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- EF113341 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- BXDTG CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- RBCQ9 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- AF136376 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- EF051717 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- EF051721 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- AF516320 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- DQ679899 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- 53 AB071714 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- AB071712 CGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAG------- ************************* Dấu * biểu thị sự tƣơng đồng giữa các dòng so sánh, vùng in đậm là 5.8S, trình tự đƣợc gạch chân thể hiện sự đột biến. 54 Phụ lục 2. Kết quả sắp gióng côṭ triǹh tƣ ̣các dòng nấm Metarhizium anisopliae var. anisopliae trong nƣớc và trên thế giới dƣạ vào triǹh tƣ ̣gen Pr1. BDTV5 --------------------------GGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA 50 RNLA --------------------------GGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA RNBT --------------------------GGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA BDTN --------------------------GGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA BXDTV --------------------------GGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA BDQ96 -------------------------AGGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA AY389121 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA AY389133 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA SCLLLA --------------------------GGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA AY389128 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCAGACAA AY389132 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA AY389119 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCAGACAA AY389123 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCAGACAA AY389126 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCAGACAA AY389122 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA AY389129 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA AY389127 GAGCCAGCTCCTCTCTTCACTCCTCAGGCTGAGAGCATCATTGCCGACAA ****************** ***** BDTV5 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGATA 100 RNLA GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGATA RNBT GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGATA BDTN GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGATA BXDTV GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGATA BDQ96 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGATA AY389121 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGATA AY389133 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGATA SCLLLA GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGACA AY389128 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGACA AY389132 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGATA AY389119 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGACA AY389123 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGACA AY389126 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGACA 55 AY389122 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGACA AY389129 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGACA AY389127 GTATATTGTCAAGTTCAAGGATGATATTGCCCGTATCGCTACCGATGACA ************************************************ * BDTV5 CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC 150 RNLA CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC RNBT CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC BDTN CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC BXDTV CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC BDQ96 CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389121 CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389133 CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC SCLLLA AGGTCAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389128 AGGTCAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389132 CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389119 CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389123 CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389126 CGGTGAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389122 CGGTCAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389129 CGGTCAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC AY389127 CGGTCAGCGCTCTTACCTCCAAAGCCGACTTCGTTTACGAGCACGCCTTC *** ********************************************* BDTV5 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG 200 RNLA CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG RNBT CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCGGTG BDTN CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG BXDTV CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG BDQ96 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG AY389121 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG AY389133 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG SCLLLA CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG AY389128 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG AY389132 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG AY389119 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG 56 AY389123 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG AY389126 CACGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG AY389122 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG AY389129 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG AY389127 CATGGGTTTGCAGGCTCCCTCACCAAGGAGGAGCTGAAGATGCTTCG-TG ** ******************************************** ** BDTV5 AGCACCCCGGTGTAAGGACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAA 250 RNLA AGCACCCCGGTGTAAGGACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAA RNBT AGCACCCCGGTGTAAGGACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAA BDTN AGCACCCCGGTGTAAGGACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAA BXDTV AGCACCCCGGTGTAAGGACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAA BDQ96 AGCACCCCGGTGTAAGGACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAA AY389121 AGCACCCCGGTGTAAGTACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAG AY389133 AGCACCCCGGTGTAAGTACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAG SCLLLA AGCACCCCGGTGTAAGTTCCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAG AY389128 AGCACCCCGGTGTAAGTACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAG AY389132 AGCACCCCGGTGTAAGCACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAG AY389119 AGCACCCCGGTGTAAGTACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAGGGAG AY389123 AGCACCCCGGTGTAAGTACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAGGGAG AY389126 AGCACCCCGGTGTAAGTACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAAGGAG AY389122 AGCACCCCGGTGTAAGTACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAGGGAG AY389129 AGCACCCCGGTGTAAGTACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAGGGAG AY389127 AGCACCCCGGTGTAAGTACCCCCTCCCACTTACCTAGGTAGTCAAGGGAG **************** **************************** **** BDTV5 ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG 300 RNLA ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG RNBT ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG BDTN ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG BXDTV ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG BDQ96 ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG AY389121 ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG AY389133 ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG SCLLLA ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG AY389128 ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTCGATTTCATTG 57 AY389132 ACATGTAGTTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCGCCATAGGTTGATTTCATTG AY389119 ACATGTAGGTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCCCCATAGGTCGATTTCATTG AY389123 ACATGTAGGTGTTTGTTCCTGACCCGCTGCCCCATAGGTCGATCTCATTG AY389126 ACATGTAGTTGTTTGTTGCTGACCCGCTGCACCATAGGTCGATTTCATTG AY389122 ACATGCAGGTGTTTGTTGCTGACCCGCTGCCCCATAGGTCGATTTCATTG AY389129 ACATGTAGGTGTTTGTTGCTGACCCGCTGCCCCATAGGTCGATTTCATTG AY389127 ACATGTAGGTGTTTGTTGCTGACCCGCTGCCCCATAGGTCGATTTCATTG ***** ** ******** ************ ******** *** ****** BDTV5 AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCCTCACTGAGCAGAGCGGTGCT 350 RNLA AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCCTCACTGAGCAGAGCGGTGCT RNBT AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCCTCACTGAGCAGAGCGGTGCT BDTN AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCCTCACTGAGCAGAGCGGTGCT BXDTV AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCCTCACTGAGCAGAGCGGTGCT BDQ96 AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCCTCACTGAGCAGAGCGGTGCT AY389121 AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCATCACTGAGCAGAGCGGTGCT AY389133 AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCATCACTGAGCAGAGCGGTGCT SCLLLA AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCCTCACTGAGCAGAGCGGTGCT AY389128 AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCCTCACTGAGCAGAGCGGTGCT AY389132 AGAAGGACGCCTTGATGCGTATCAGCGGCCTCACTGAGCAGAGCGGTGCT AY389119 AGAAGGACGCCGTGATGCGTATCAGCGGCATCACTGAGCAGAGCGGTGCT AY389123 AGAAGGACGCCGTGATGCGTATCAGCGGCATCACTGAGCAGAGCGGTGCT AY389126 AGAAGGACGCCGTGATGCGTATCAGCAGCTTCACTGACCAGAGCGGTGCT AY389122 AGAAGGACGCCGTGATGCGTATCAGCGGCATCACTGAGCAGAGCGGTGCT AY389129 AGAAGGACGCCGTGATGCGTATCAGCGGCATCACTGAGCAGAGCGGTGCT AY389127 AGAAGGACGCTGTGATGCGTATCAGCGGCATCACTGAGCAGAGCGGTGCT ********** ************** ** ******* ************ BDTV5 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAGGGGAAGCACCACCT 400 RNLA CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAGGGGAAGCACCACCT RNBT CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAGGGGAAGCACCACCT BDTN CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAGGGGAAGCACCACCT BXDTV CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAGGGGAAGCACCACCT BDQ96 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAGGGGAAGCACCACCT AY389121 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAGTAAGGGAAGCACCACCT 58 AY389133 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAGTAAGGGAAGCACCACCT SCLLLA CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAGTAGGGGAAGCACCACCT AY389128 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAGTAGGGGAAGCACCACCT AY389132 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAGGGGAAGCACCACCT AY389119 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAAGGGAAGCACCACCT AY389123 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAAGGGAAGCACCACCT AY389126 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAATAAGGGAAGCACCACCT AY389122 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCACACCGCCAGAAGGGAAGCACCACCT AY389129 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCACACCGCCAGAAGGGAAGCACCACCT AY389127 CCCTGGGGTCTTGGGCG-CATCTCTCACCGCAGTAAGGGAAGCACCACCT ***************** ****** ****** * ************** BDTV5 ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC 450 RNLA ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC RNBT ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC BDTN ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC BXDTV ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC BDQ96 ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC AY389121 ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTCAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC AY389133 ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTCAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC SCLLLA ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC AY389128 ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC AY389132 ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC AY389119 ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC AY389123 ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC AY389126 ATCGCTACGATGATAGTGCCGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC AY389129 ATCGCTACGATGATAGTGCCGGTGAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC AY389127 ATCGCTACGATGATAGTGCTGGTCAGGGTACTTGCGTATATATCATTGAC ******************* *** ************************** BDTV5 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCAGTCAAAATTCCATA 500 RNLA ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCAGTCAAAATTCCATA RNBT ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCAGTCAAAATTCCATA BDTN ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCAGTCAAAATTCCATA BXDTV ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCAGTCAAAATTCCATA BDQ96 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCAGTCAAAATTCCATA 59 AY389121 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGTCAAAACTCCATA AY389133 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGTCAAAACTCCATA SCLLLA ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGCCAAAACTCCATA AY389128 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGCCAAAACTCCATA AY389132 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGCCAAAACTCCATA AY389119 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGTCAAAACTCCATA AY389123 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGTCAAAACTCCATA AY389126 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGTCAAAACTCCATA AY389122 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGCCAAAACTCCATA AY389129 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGCCAAAACTCCATA AY389127 ACTGGTATTGAGGCCTCCCACCCCGTAAGTTGTGCCGGCAAAACTCCATA *********************************** * ***** ****** BDTV5 GTGAGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC 550 RNLA GTGAGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC RNBT GTGAGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC BDTN GTGAGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC BXDTV GTGAGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC BDQ96 GTGAGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC AY389121 GTGCGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC AY389133 GTGCGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC SCLLLA GGGAGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC AY389128 GGGAGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC AY389132 GGGCGGAGTAGGAAATTTAACAATATCATCCAGGAGTTTGAGGGTCGCGC AY389119 GTGCGGAGTAGGAAATTTACCAATATCATCCAGGAGTTTCAGGGTCGCGC AY389123 GTGCGGAGTAGGAAATTTACCAATATCATCCAGGAGTTTCAGGGTCGCGC AY389126 GTGCGGAGTAGAAAATTTACCAATATCATCCAGGAGTTTCAGGGTCGCGC AY389122 GTGCGGAGTAGGAAATTTACCAATATCATCCAGGATTTTGGGGGTCGCGC AY389129 GTGCGGAGTAGGAAATTTACCAATATCATCCAGGATTTTGGGGGTCGCGC AY389127 GTGCGGAGTAGGAAATTTACCAATATCATCCAGGATTTTGGGGGTCGCGC * ********* ******* *************** *** ********* BDTV5 CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAACCACTGATGGCCACGGCC 600 RNLA CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAACCACTGATGGCCACGGCC RNBT CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAACCACTGATGGCCACGGCC 60 BDTN CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAACCACTGATGGCCACGGCC BXDTV CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAACCACTGATGGCCACGGCC BDQ96 CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAACCACTGATGGCCACGGCC AY389121 CACTTCTCTTAAGAGCTTCATCAGAGGTCAAAACACTGATGGCCACGGCC AY389133 CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAAACACTGATGGCCACGGCC SCLLLA CACTTTTCTTAGGAGCTTCATCAGCGGTCAAGAAACTGATGGCCACGGCC AY389128 CACTTTTCTTAGGAGCTTCATCAGCGGTCAAGAAACTGATGGCCACGGCC AY389132 CACTTTTCTTAGGAGCTTCATCAGCGGTCAAGAAACTGATGGCCACGGGC AY389119 CACTCTTCTTAAGAGCTTCATCAACGGTCAAAACAGTGACGGCCACGGCC AY389123 CACTCTTCTTAAGAGCTTCATCAACGGTCAAAACAGTGACGCCCACGCCC AY389126 CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAACGGTCAAAACAGTGACGGCCACGGCC AY389122 CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAAACAGTGATGGCCACGGCC AY389129 CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAAACAGTGATGGCCACGGGC AY389127 CACTTTTCTTAAGAGCTTCATCAGCGGTCAAAACAGTGATGGCCACGGCC **** ***** *********** ****** * *** * ***** * BDTV5 ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAGTCCTACGGTGTTGCC 650 RNLA ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAGTCCTACGGTGTTGCC RNBT ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAGTCCTACGGTGTTGCC BDTN ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAGTCCTACGGTGTTGCC BXDTV ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAGTCCTACGGTGTTGCC BDQ96 ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAGTCCTACGGTGTTGCC AY389121 ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAGACCTACGGTGTTGCC AY389133 ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAGAACTACGGTGTTGCC SCLLLA ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAAAGCTACGGTGTTGCC AY389128 ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAAAGCTACGGTGTTGCC AY389132 ATGGGACTCGCTGCGCTGGTACCATGGGTAGCAAAAGCTACGGTGTTGCC AY389119 ATGGGACTCACTGCGCTGGAACCATTGGTAGCAAGACCTACGGTGTTGCC AY389123 ATGGGACTCACTGCGCTGGAACAATTGGTAGCCAGACCTACGGTGTTGCC AY389126 ATGGGACTCACTGCGCTGGAACAATTGGTAGCAAGAACTACGGTGTTGCC AY389122 ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAAAGCTACGGTGTTGCC AY389129 ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAAAGCTACGGTGTTGCC AY389127 ATGGGACTCACTGCGCTGGTACCATTGGTAGCAAAAGCTACGGTGTTGCC ********* ********* ** ** ****** * ************* 61 BDTV5 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG 700 RNLA AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG RNBT AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG BDTN AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG BXDTV AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG BDQ96 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG AY389121 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG AY389133 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG SCLLLA AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG AY389128 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG AY389132 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAGGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG AY389119 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACGACCAGGGCAGTGG AY389123 CAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACGACCAGGGCAGTGG AY389126 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG AY389122 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG AY389129 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG AY389127 AAAAAGGCTAAGCTCTATGGTGTCAAGGTTCTTGACAACCAGGGCAGTGG ************************ ********** ************* BDTV5 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA 750 RNLA TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA RNBT TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA BDTN TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA BXDTV TCCTTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA BDQ96 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA AY389121 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA AY389133 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA SCLLLA TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCCAGTGACTCCA AY389128 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCCAGTGACTCCA AY389132 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCCAGTGACTCCA AY389119 TTCCTACTCCGGTATCATCGGTGGCATGGACTACGTTGCCAAGGACTCCA AY389123 TTCCTACTCCGGTATCATCGGTGGCATGGACTACGTTGCCAAGGACTCCA AY389126 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCCAAGGACTCCA AY389122 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA AY389129 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA AY389127 TTCCTACTCCGGTATCATCAGTGGCATGGACTACGTTGCACAGGACTCCA ******************* ******************* ******* 62 BDTV5 AGAGCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT 800 RNLA AGAGCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT RNBT AGAGCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT BDTN AGAGCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT BXDTV AGAGCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT BDQ96 AGAGCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389121 AGACCCGCGGCTGCCCCAACGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389133 AGACCCGCGGCTGCCCCAACGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT SCLLLA AGACCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389128 AGACCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389132 AGACCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389119 AGACCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389123 AGACCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389126 AGACCCGCGGCTGCCCCAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389122 AGACCCGCGGCTGCCCTAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389129 AGACCCGCGGCTGCCCTAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT AY389127 AGACCCGCGGCTGCCCTAAAGGCGCCATTGCTTCCATGAGCCTGGGAGGT *** ************ ** ****************************** BDTV5 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG 850 RNLA GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG RNBT GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG BDTN GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG BXDTV GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG BDQ96 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG AY389121 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG AY389133 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG SCLLLA GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTGAATTCTGG AY389128 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTGAATTCTGG AY389132 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTGAATTCGGG AY389119 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG AY389123 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG AY389126 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG AY389122 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG AY389129 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG AY389127 GGCTACTCGGCGTCCGTCAACCAAGGTGCTGCTGCTTTGGTCAATTCTGG ***************************************** ***** ** 63 BDTV5 TGTCTTCCTGTCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA 900 RNLA TGTCTTCCTGTCCGTCGCCGCCGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA RNBT TGTCTTCCTGGCCGTCGCCGCCGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA BDTN TGTATTCCTGGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA BXDTV TGTATTCCTGGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA BDQ96 TGTCTTCCTGGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA AY389121 TGTCTTCCTTGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA AY389133 TGTCTTCCTTGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA SCLLLA TGTATTCCTGGCCGTCGCCGCCGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA AY389128 TGTCTTCCTTGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA AY389132 TGTCTTCCTTGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA AY389119 TGTCTTCGTTGCCGTCGCCGCTGGCAATGATAACCGGGATGCCCAGAACA AY389123 TGTCTTCGTTGCCGTCGCCGCTGGCAATGATGACCGGGATGCCCAGAACA AY389126 TGTCTTCCTCGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA AY389122 TGTCTTCCTTGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA AY389129 TGTCTTCCTTGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA AY389127 TGTCTTCCTTGCCGTCGCCGCTGGCAACGATAACCGGGATGCCCAGAACA *** *** * ********** ***** *** ****************** BDTV5 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGCATGCACTGTTGGTGCCTGTGCGGAA 950 RNLA CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGCATGCACTGTTGGTGCCTGTGCGGAA RNBT CCTCTGCCGCTTCCGAGCCTTTTGCGTGCATTGTTGGTGCCTTTGCGGAA BDTN CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTTTGCCTGCACTGTTGGTGCCTCTGCGGAA BXDTV CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTTTGCCTGCACTGTTGGTGCCTCTGCGGAA BDQ96 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTTTGCCTGCACTGTTGGTGCCTCTGCGGAA AY389121 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGCCTGCACTGTTGGTGCCTCTGCGGAA AY389133 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGCCTGCACTGTTGGTGCCTCTGCGGAA SCLLLA CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGCATGCACTGTTGGTGCCACTGATTCA AY389128 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGCCTGCACTGTTGGTGCCACTGATTCA AY389132 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGCCTGCACTGTTGGTGCCACTGATTCA AY389119 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTACTGTCTGCACTGTTGGTGCCACTGATTCA AY389123 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTACTGTCTGCACTGTTGGTGCCACTGATTCA AY389126 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTACTGCCTGCACTGTTGGTGCCACTGATTCA AY389122 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGTCTGCACTGTTGGTGCCACTGATTCA AY389129 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGCCTGCACTGTTGGTGCCACTGATTCA AY389127 CCTCTCCCGCTTCCGAGCCTTCTGCCTGCACCGTTGGTGCCACTGATTCA ***** ************** ** **** ********* ** * 64 BDTV5 AATGACAGCCGATCTTCCTTCTCAAACTACGGCAAAGTTGTCGATATTTT 1000 RNLA AATGACAGCCGATCTTCCTTCTCAAACTACGGCAAAGTTGTCGATATTTT RNBT AATGACAGCAGATCTTCCTTCTCAAACTACGGCAAAGTTGTCGATATTTT BDTN AATGACAGCCGATCTTCCTTCTCAAACTACGGCAAAGTTGTCGATATTTT BXDTV AATGACAGCCGATCTTCCTTCTCAAACTACGGCAAAGTTGTCGATATTTT BDQ96 AATGACAGCCGATCTTCCTTCTCAAACTACGGCAAAGTTGTCGATATTTT AY389121 AATGACAGCCGATCTTCCTTCTCCAACTACGGCAGAGTTGTCGATATTTT AY389133 AATGACAGCCGATCTTCCTTCTCCAACTACGGCAGAGTTGTCGATATTTT SCLLLA AGTGACAGACGATCTTCCTTCTCCAACTTCGGCAGAGTTGTCGATATTTT AY389128 AGTGACAGACGATCTTCCTTCTCCAACTTCGGCAGAGTTGTCGATATTTT AY389132 AGTGACAGACGATCTTCCTTCTCCAACTTCGGCAGAGTTGTCGATATTTT AY389119 AGTGACAGACGATCTTCCTTCTCCAACTTCGGCAGAGTTGTCGATATTTT AY389123 AGTGACAGACGATCTTCCTTCTCCAACTTCGGCAGAGTTGTCGATATTTT AY389126 GGTGACAACCGATCTTCTTTCTCCAACTACGGCAGAGTTGTCGATATTTT AY389122 AATGACAACCGATCTTCCTTCTCCAACTACGGCAAAGTTGTCGATATTTT AY389129 AATGACAACCGATCTTCCTTCTCCAACTACGGCAAAGTTGTCGATATTTT AY389127 AATGACAGCCGATCTTCCTTCTCCAACTACGGCAAAGTTGTCGATATTTT ***** ******* ***** **** ***** *************** BDTV5 CGCTCCTGGTAGCAATGTTCTTTCCCACCTGGATTGGCGCCCGCACAGTA 1050 RNLA CGCTCCTGGTAGCAATGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGCGCCCGCACAGTA RNBT CGCTCCTGGTAGCAATGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGCGGCCGCACAGTA BDTN CGCTCCTGGTAGCAATGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGCGGCCGCACAGTA BXDTV CGCTCCTGGTAGCAATGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGCGGCCGCACAGTA BDQ96 CGCTCCTGGTAGCAATGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGCGGCCGCACAGTA AY389121 CGCTCCTGGTAGCAATGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGTGGCCGCACAGTA AY389133 CGCTCCTGGTAGCAATGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGTGGCCGCACAGTA SCLLLA CGCTCCTGGTACCGGTGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGCGGCAGCACTGTA AY389128 CGCTCCTGGTACCGGTGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGTGGCAGCACTGTA AY389132 CGCTCCTGGTACCGGTGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGTGGCAGCACTGTA AY389119 CGCTCCTGGTACCGGTATTCTTTCC-ACCTGGATTGGTGCCAGCACTGTA AY389123 CGCTCCTGGTACCGGTATTCTTTCC-ACCTGGATTGGTGGCAGCACTGTA AY389126 CGCTCCTGGTAGCAATGTTCTCTCC-ACCTGGATTAATGGTGGCACCGTA AY389122 CGCTCCTGGTACCGGTGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGTGGCAGCACTGTA AY389129 CGCTCCTGGTACCGGTGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGTGGCAGCACTGTA AY389127 CGCTCCTGGTACCGGTGTTCTTTCC-ACCTGGATTGGTGGCAGCACTGTA *********** * * **** *** ********* * **** *** 65 BDTV5 AGTAAT---CGTACCTCGATAAGCTCGGAGACACGCTTTTGCTTCAGCAC 1100 RNLA AGTAAT---CGTACCTCGATAAGCTCGGAGACACGCTTTTGCTTCAGCAC RNBT AGTAAT---CGTACCTCGATAAGCTCGGAGACACGCTTTTGCTTCAGCAC BDTN AGTAAT---TGTACCTCGATAAGCTCGGAGACACGCTTTTGCTTCAGCAC BXDTV AGTAAT---TGTACCTCGATAAGCTCGGAGACACGCTTTTGCTTCAGCAC BDQ96 AGTAAT---TGTACCTCGATAAGCTCGGAGACACGCTTTTGCTTCAGCAC AY389121 AGTATT----GTACCTCGATAAGCTCGGAGACACGCTTTTGCTTCAGCAC AY389133 AGTATT----GTACCTCGATAAGCTCGGAGACACGCTTTTGCTTCAGCAC SCLLLA AGTATTGTACCTACCTCGATAAGCTTAGAGACAGGCTTTTGCTTCAGAAC AY389128 AGTATTGTACCTACCTCGATAAGCTTAGAGACAGGCTTTTGCTTCAGAAC AY389132 AGTATTGTACCTACCTCGATAAGCTTAGAGACAGGCTTTTGCTTCAGAAC AY389119 AGTATTGTACCTACCTCGATAAGCTTAGAGACACGCTTTTGCTTCAGAAC AY389123 AGTATTGTACCTACCTCGATAAGCTTAGAGACACGCTTTTGCTTCAGAAC AY389126 AGTATTGTACCTACCTCGATAAGCTCAGAGACACGCTTTTGCTTCAGCAC AY389122 AGTATTGTACCTACCTCGATAAGCTTAGAGACAGGCTTTTGCTTCAGAAC AY389129 AGTATTGTACCTACCTCGATAAGCTTAGAGACAGGCTTTTGCTTCAGAAC AY389127 AGTATTGTACCTACCTCGATAAGCTTAGAGACAGGCTTTTGCTTCAGAAC **** * ************** ****** ************* ** BDTV5 CAGCTCTAACAAGGTT---------------------------------- 1150 RNLA CAGCTCTAACAAGGTT---------------------------------- RNBT CAGCTCTAACAAGGTT---------------------------------- BDTN CAGCTCTAACAAGGTT---------------------------------- BXDTV CAGCTCTAACAAGGTT---------------------------------- BDQ96 CAGCTCTAACAAGGTT---------------------------------- AY389121 CAGCTCTAACAAGGTTTAGAACTCCATCTCTGGTACCTCCATGGCTACTC AY389133 CAGCTCTAACAAGGATTAGAACACCATCTCTGGTACCTCCATGGCTACTC SCLLLA CAGCTCTAACAAGGTT---------------------------------- AY389128 CAGCTCTAACAAGGTTTAGAACACCATCTCTGGTACCTCCATGGCTACTC AY389132 CAGCTCTAACAAGGTTCAGAACACCATCTCTGGTACCTCCATGGCTACTC AY389119 CAGCTCTAACAAGATTTAGAACACCATCTCTGGCACCTCCATGGCTACTC AY389123 CAGCTCTAACAAGATTTAGAACACCATCTCTGGCACCTCCATGGCTACTC AY389126 CAGCTCTAACAAGGTTTAGAACTCCATCTCTGGCACCTCCATGGCTACTC AY389122 CAGCTCTAACAAGGTTTAGAACACCATCTCTGGCACCTCCATGGCTACTC AY389129 CAGCTCTAACAAGGTTTAGAACACCATCTCTGGCACCTCCATGGCTACTC AY389127 CAGCTCTAACAAGGTTTAGAACACCTTCTCTGGCACCTCCATGGCTACTC ************* * 66 Dấu * thể hiện sự tƣơng đồng, trình tự đƣợc gạch chân thể hiện sự khác biệt giữa các dòng Metarhizium anisopliae trong nƣớc so với các dòng trên thế giới .Trình tự tô đậm thể hiêṇ sƣ ̣khác biệt giữa các dòng có đột biến so với những dòng khác trong nƣớc .

Các file đính kèm theo tài liệu này:

TRAN NHAT NAM.pdf