Luận văn Đánh giá chất lượng gelatin da cá tra

ỚI THIỆU SƠ LƯỢC VỀ CÁ TRA.................................................................. 9 2.2 GELATIN ...........................................................................................................10 2.2.1 Định nghĩa gelatin ....................................................................................... 10 2.2.2 Collagen ...................................................................................................... 10 2.2.3 Sự chuyển đổi collagen - gelatin .................................................................. 10 2.2.4 Sản xuất gelatin ........................................................................................... 11 2.2.5 Cấu trúc hóa học của gelatin ........................................................................ 13 2.2.6 Tính chất lý hóa học của gelatin .................................................................. 14 2.2.7 Ứng dụng của gelatin trong công nghệ thực phẩm ....................................... 16 2.2.8 Tổng quan về gelatin da cá .......................................................................... 17 1.3 ..................................................................................................................... C HƯƠNG III. PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM..................... 19 3.1 PHƯƠNG TIỆN THÍ NGHIỆM ..........................................................................19 3.1.1 Dụng cụ và thiết bị ...................................................................................... 19 3.1.2 Hóa chất sử dụng......................................................................................... 20 3.1.3 Nguyên liệu ................................................................................................. 20 3.2 PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM .........................................................................22 3.3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU ................................................................................22 3.3.1 Phân tích các chỉ tiêu vật lý ......................................................................... 22 3.3.2 Phân tích các chỉ tiêu hóa học...................................................................... 23 3.3.3 Thử nghiệm chế biến sản phẩm kẹo mềm .................................................... 24 CHƯƠNG IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU VẬT LÝ ............................................26 4.1.1 Chỉ tiêu vật lý của gelatin da cá tra .............................................................. 26 4.1.2 Chỉ tiêu vật lý của gelatin Trung Quốc ........................................................ 26 4.1.3 Chỉ tiêu vật lý của gelatin Hải Phòng.......................................................... 26 4.2 THẢO LUẬN CÁC CHỈ TIÊU VẬT LÝ ............................................................26 4.2.1 Độ bền gel của 3 loại gelatin........................................................................ 26 4.2.2 Độ nhớt của 3 loại gelatin ............................................................................ 27 4.3 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU HÓA HỌC .........................................28 4.3.1 Chỉ tiêu hóa học của gelatin da cá tra........................................................... 28 4.3.2 Chỉ tiêu hóa học của gelatin Trung Quốc ..................................................... 29 4.3.3 Chỉ tiêu hóa học của gelatin Hải Phòng ....................................................... 29 - Trọng lượng phân tử.....................................................................................................29 Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 4.4 THẢO LUẬN CÁC CHỈ TIÊU HÓA HỌC.........................................................30 4.4.1 Hàm lượng ẩm của 3 loại gelatin ................................................................. 30 4.4.2 Hàm lượng tro của 3 loại gelatin.................................................................. 31 4.4.3 Hàm lượng đạm của 3 loại gelatin ............................................................... 32 4.4.4 Giá trị pH của 3 loại gelatin ......................................................................... 33 4.4.5 Trọng lượng phân tử của gelatin ..................................................................24 4.5 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN CẤU TRÚC CỦA SẢN PHẨM KẸO MỀM GELATIN ......................................................................................................................34 1.4 ..................................................................................................................... C HƯƠNG 5. KẾT LUẬN........................................................................................ 37 CHƯƠNG 6. ĐỀ NGHỊ.........................................................................................28 1.5 ..................................................................................................................... T ÀI LIỆU THAM KHẢO........................................................................................ 39 1.6 ..................................................................................................................... P HỤ LỤC .................................................................................................................. i PHỤ LỤC A. CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ........................................................ i PHỤ LỤC B. XỬ LÝ THỐNG KÊ ............................................................................... ix Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 1 - Tỷ lệ (%) acid amin trong 100 gam gelatin sau khi thủy phân. ...................... 6 Bảng 2 - Kết quả độ bền gel và độ nhớt của gelatin da cá ........................................... 17 Bảng 3 - Kết quả độ bền gel và độ nhớt của gelatin Trung Quốc ................................ 17 Bảng 4 - Kết quả độ bền gel và độ nhớt của gelatin Hải Phòng .................................... 17 Bảng 5 - Thống kê độ bền gel của ba loại gelatin ......................................................... 18 Bảng 6 - Thống kê độ nhớt của ba loại gelatin ............................................................. 18 Bảng 7 - Kết quả chỉ tiêu hóa học của gelatin da cá tra ................................................ 19 Bảng 8 - Kết quả chỉ tiêu hóa học của gelatin Trung Quốc .......................................... 20 Bảng 9 - Kết quả chỉ tiêu hóa học của gelatin Hải Phòng ............................................. 20 Bảng 10 - Thống kê hàm lượng ẩm của ba loại gelatin ............................................... 20 Bảng 11 - Thống kê hàm lượng tro của ba loại gelatin ................................................. 21 Bảng 12 - Thống kê hàm lượng đạm của ba loại gelatin .............................................. 22 Bảng 13 - Thống kê giá trị pH của ba loại gelatin ........................................................ 22 Bảng 14 - Kết quả và thống kê cấu trúc kẹo mềm làm từ ba loại gelatin ...................... 23 Bảng 15 - Chi phí sản xuất 1kg gelatin từ da cá tra ...................................................... 25 Bảng 16 - Giá thành của 3 loại gelatin phân tích .......................................................... 25 Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 1 - Quy trình sản xuất gelatin từ da cá tra ............................................................ 5 Hình 2 - Hệ thống đốt đạm .......................................................................................... 13 Hình 3 - Hệ thống cất đạm ........................................................................................... 13 Hình 4 - Máy sấy ......................................................................................................... 13 Hình 5 - Máy đo cấu trúc Rheotex ............................................................................... 13 Hình 6 - Máy đo pH .................................................................................................... 13 Hình 7 - Lò nung ......................................................................................................... 13 Hình 8 - Máy đo độ nhớt Brookfield ............................................................................ 13 Hình 9 - Qui trình sản xuất thử nghiệm kẹo mềm gelatin ............................................. 16 Hình 10 - Đồ thị biểu diễn độ bền gel của ba loại gelatin ............................................. 18 Hình 11 - Đồ thị biểu diễn độ nhớt của ba loại gelatin ................................................. 19 Hình 12 - Kết quả điện di SDS - PAGE trên gel polyacrylamide ................................. 21 Hình 13 - Đồ thị biểu diễn hàm lượng ẩm của ba loại gelatin ....................................... 22 Hình 14 - Đồ thị biểu diễn hàm lượng tro của ba loại gelatin ....................................... 22 Hình 15 - Đồ thị biểu diễn hàm lượng đạm của ba loại gelatin ..................................... 23 Hình 16 - Đồ thị biểu diễn giá trị pH của ba loại gelatin .............................................. 24 Hình 17 - Đồ thị biểu diễn cấu trúc của kẹo mềm làm từ ba loại gelatin ...................... 25 Hình 18 - Gelatin nguyên liệu ...................................................................................... 25 Hình 19 - Sản phẩm kẹo .............................................................................................. 25 Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 CHƯƠNG I. ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Gelatin là sản phẩm có được từ sự thuỷ phân collagen thu được từ da, mô liên kết, và xương động vật.Gelatin được sử dụng rộng rãi trong công nghệ chế biến thực phẩm, trong kỹ thuật nhiếp ảnh và cả trong y học. Gelatin được sử dụng với một số lượng lớn trong các sản phẩm thực phẩm. Như các sản phẩm sữa, các sản phẩm thịt, các sản phẩm kẹo: jam, jelly, kẹo mềm. Hầu hết các ứng dụng gelatin là sử dụng tính chất vật lý đặc biệt của nó hơn là vì giá trị dinh dưỡng. Hiện nay, trên thế giới sản xuất khoảng 140 000 - 160 000 tấn gelatin mỗi năm và mức độ sử dụng gelatin trong thực phẩm tăng trung bình khoảng 3%, chủ yếu sử dụng trong kẹo mứt và những sản phẩm có năng lượng thấp. Trong những năm gần đây, thủy sản đã trở thành một trong những ngành kinh tế mũi nhọn ở nước ta, trong đó cá tra phi lê đông lạnh là một trong những mặt hàng chủ lực. Một số tỉnh thuộc Đồng bằng Sông Cửu long như An giang, Đồng tháp, Vĩnh long và Cần thơ với điều kiện thiên nhiên ưu đãi đã và đang phát triển mạnh nghề nuôi trồng và chế biến thủy sản mà đặc biệt là mặt hàng cá tra phi lê đông lạnh. Phần thịt cá được sử dụng trong sản phẩm phi lê chỉ chiếm khoảng 30% trọng lượng thân cá; phần phụ phẩm mà chủ yếu là da, xương chiếm khoảng 70% (trong đó phần da cá chiếm 5-7%) trọng lượng thân cá thường được bỏ đi hoặc được bán với giá rất rẻ. Vì vậy việc nghiên cứu sản xuất gelatin từ da cá tra góp phần tạo ra hướng mới cho việc tận dụng nguồn phụ phẩm, nâng cao giá trị nguyên liệu cá tra. 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Đề tài nghiên cứu “Đánh giá chất lượng gelatin da cá tra” với mục đích đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng của gelatin như: độ nhớt, độ bền gel, hàm lượng protein, hàm lượng tro, độ ẩm, pH, trọng lượng phân tử. Từ đó chế biến thử nghiệm sản phẩm kẹo mềm từ gelatin da cá tra. So sánh cấu trúc sản phẩm khi sử dụng gelatin da cá tra với sản phẩm sử dụng gelatin Trung Quốc và gelatin Hải Phòng. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 CHƯƠNG II. LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 GIỚI THIỆU SƠ LƯỢC VỀ CÁ TRA Cá tra là một loài cá có giá trị kinh tế cao, phân bố ở khu vực sông Mê Kông, có mặt ở cả 4 nước Thái Lan, Lào, Campuchia và Việt Nam. Theo hệ thống phân loại của G.V.Lindberg (1974), cá tra thuộc: Lớp Cá Pisces Bộ Cá Nheo Siluriforms Họ Cá Tra Pangasidae Giống Cá Tra Pangasius Loài Cá Tra Pangasisus hypophthalmus (Sauvage, 1878 được trích dẫn bởi Võ Quốc Văn, 2004). Cá tra sống chủ yếu ở vùng nước ngọt, có thể sống được ở vùng nước lợ. Chúng có tính háo ăn, có thể tận dụng được nhiều loại thức ăn khác nhau. Mặt khác, chúng chịu đựng được tốt với môi trường khắc nghiệt, nuôi được ở mật độ cao, sống được ở nhiều loại hình mặt nước, cả những ao hồ có hàm lượng oxy hoà tan thấp, chúng tăng trưởng nhanh. Đặc điểm hình thái: cá tra có hình thoi, thân dài, dẹp bên. Cá tra không có vẩy, thân có màu xám, hơi xanh ở trên lưng, hai bên hông và bụng nhạt. Vây lưng và vây bụng màu xám đen, phần cuối vây đuôi có màu hơi đỏ. Kể từ năm 1990, sản phẩm cá tra phi lê đông lạnh đã trở thành một trong những mặt hàng chủ lực góp phần vào sự tăng trưởng liên tục của ngành thuỷ sản Việt Nam. Phụ phẩm từ quy trình sản xuất cá sau khi phi lê có thể chiếm đến 75% trọng lượng nguyên liệu (Shahidi, 1994), trong đó riêng phần da cá tra (được tách ra từ hai miếng thịt cá sau khi phi lê) chiếm từ 5-7% trọng lượng thân cá; đây chính là nguồn nguyên liệu tuyệt vời cho việc điều chế những thực phẩm giàu protein, bên cạnh đó còn làm giảm sự ô nhiễm môi trường và cải thiện chất lượng trong chế biến cá. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 2.2 GELATIN 2.2.1 Định nghĩa gelatin Gelatin là một hợp chất cao phân tử nhận được từ sự thuỷ phân collagen, là một thành phần protein cơ bản của động vật tìm thấy trong xương, da, gân (Ramchandran, 1967). Mặc dù, thuật ngữ gelatin đề cập đến những chất keo khác nhưng nó chỉ được ứng dụng đối với những nguyên liệu protein từ collagen (Rose,1987) Theo tổ chức Y Tế thế giới FAO/WHO 1973 giới thiệu tiêu chuẩn và sự nhận dạng, phân loại gelatin như là một thực phẩm có thể ăn được. 2.2.2 Collagen Collagen là một thành phần cấu trúc chính của các sợi mô liên kết màu trắng và nó hiện diện trong tất cả các mô và cơ quan. Collagen là thành phần cấu tạo chiếm khoảng 30% của tất cả các protein có trong động vật có xương sống và động vật không xương sống. Dưới kính hiển vi nó có dạng là sợi trắng đục được bao quanh bởi các protein và mucopolysaccharide khác. Thành phần acid amin của collagen gồm có 18 trong số 20 loại acid amin được tìm thấy trong protein. Collagen chứa một hàm lượng cao glycin, prolin và hydroxyprolin; các acid amin khác chỉ chiếm khoảng 13 – 15%. Hydroxyprolin là thành phần đặc trưng của collagen, nó chỉ chiếm 2% trong elastin. 2.2.3 Sự chuyển đổi collagen - gelatin Sự chuyển đổi collagen thành gelatin là sự chuyển đổi chủ yếu xảy ra trong việc sản xuất gelatin. Đó là sự chuyển đổi của những sợi collagen có tổ chức cao những sợi này không tan trong nước, tạo thành hệ thống khử polymer gọi là gelatin đã được mô tả Veis (1964). Sự phức tạp trong cấu trúc của collagen và sự đa dạng của các phương pháp xử lý bằng enzyme và hóa chất có thể áp dụng trong sản xuất gelatin, giải thích sự hiện diện đa dạng của nhiều loại gelatin. Mặc dù những phương pháp kiểm soát chất lượng và sản xuất hiện đại đã được sử dụng nhưng sản xuất gelatin thương mại vẫn còn phụ thuộc nhiều vào kinh nghiệm. Nó đòi hỏi phải xúc tác thuỷ phân bằng acid hay kiềm cho ra gelatin, một dạng keo trong nước (việc thuỷ phân bằng enzyme cũng được sử dụng). Cách đơn giản nhất để chuyển đổi collagen thành gelatin là làm biến đổi tính tan của collagen. Biến tính nhiệt có thể được thực hiện bằng cách gia nhiệt collagen trong môi trường acid yếu đến 40oC. Ở chế độ xử lý này, các sợi collagen tách ra thành các đơn vị Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 tropocollagen do bị cắt đứt các liên kết hydro và liên kết kỵ nước, việc này giúp cho sự ổn định đường xoắn ốc của collagen (Jonsh và Courts, 1977). Giai đoạn tiếp theo trong sự thuỷ phân collagen là sự duỗi thẳng của mạch, bao gồm việc cắt đứt cầu nối giữa các phân tử của 3 chuỗi xoắn ốc và giúp gelatin hòa tan. Sự thuỷ phân collagen có thể tạo nên - Sự hình thành của 3 chuỗi α độc lập. - Sự hình thành của 1 chuỗi β (2 chuỗi α được liên kết bởi một hoặc hai liên kết cộng hóa trị) và 1 chuỗi α độc lập. - Sự hình thành của một chuỗi γ (3 chuỗi liên kết bởi các liên kết cộng hóa trị) Khác biệt chủ yếu giữa các hình thức α, β và γ của gelatin là ở trọng lượng phân tử. Ở dạng α, trọng lượng phân tử thay đổi từ 80 000 đến 125 000 và ở dạng β từ 160 000 đến 250 000. Ở dạng γ có trọng lượng phân tử từ 240 000 đến 375 000 (Poppe, J. 1995) 2.2.4 Sản xuất gelatin Gelatin được sản xuất từ sự thuỷ phân collagen, với nguồn nguyên liệu chủ yếu là da và xương. Sản xuất gelatin công nghiệp ở Mỹ được bắt đầu vào năm 1850. Ở thời điểm này, nguồn nguyên liệu chính là da thú và xương nhưng việc sản xuất gia tăng đáng kể vào năm 1930 khi da heo được sử dụng như một nguồn nguyên liệu. Ở Châu Âu, bằng sáng chế đầu tiên về sản xuất gelatin được cấp ở Anh vào năm 1754. Hiện nay, Châu Âu trở thành khu vực quan trọng nhất trong việc sản xuất gelatin. Ở Việt Nam, việc thử nghiệm sản xuất gelatin từ da cá tra đã được Lâm Trọng Hiếu (Luận văn tốt nghiệp, 2003), Võ Quốc Văn (Luận án thạc sĩ, 2004), Nguyễn Thị Thuỳ Linh (Luận văn tốt nghiệp, 2005) nghiên cứu ở phạm vi phòng thí nghiệm. Qui trình sản xuất thử nghiệm gelatin từ da cá tra của Võ Quốc Văn (Luận án thạc sĩ, 20 Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Hình 1 - Qui trình sản xuất gelatin từ da cá tra Giải thích qui trình 1) Nguyên liệu: Nguyên liệu của quá trình sản xuất gelatin là phụ phẩm da cá Tra trong quy trình sản xuất cá phi lê của các nhà máy chế biến thủy sản. 2) Làm sạch: - Xử lý da cá: Da cá Tra tươi sau khi phi lê được cắt làm đôi để chuẩn bị cho các thí nghiệm tiếp theo. Da cá nếu chưa sử dụng phải được đưa đi cấp đông ngay và bảo quản ở nhiệt độ -200C cho đến khi sử dụng (thời gian bảo quản không quá 5 ngày). - Làm sạch da cá: Da cá được sau khi xử lý được ngâm quay trong nước (tỷ lệ là 1:6) trong thời gian 10 phút và được làm sạch bằng nước. Sau đó được ngâm quay 3 lần trong dung dịch 0.8M NaCl (tỷ lệ 1:6) trong thời gian 10 phút và được làm sạch bằng nước. Nguyên liệu Làm sạch Thuỷ phân Trích ly Lọc Cô đặc Sấy Nghiền Gelatin thành phẩm Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 - Xử lý da cá với dung dịch 0,2N NaOH: Da cá sau khi làm sạch được xử lý trước bằng cách ngâm quay 3 lần trong dung dịch 0,2N NaOH (tỷ lệ 1:6 w/v) trong thời gian 30 phút, sau đó da cá được làm sạch bằng nước và để ráo nước trước khi thủy phân. 3) Thủy phân: Acit được sử dụng trong quá trình thủy phân là acit citric với các nồng độ và thời gian thủy phân khác nhau được khảo sát. 4) Trích ly: Nguyên liệu sau khi thủy phân được tiến hành trích ly gelatin trong nước nóng. Các nhiệt độ nước trích ly khác nhau được khảo sát với thời gian trích ly qua đêm. 5) Lọc: Hỗn hợp sau khi trích ly được tiến hành thô bằng lưới lọc, sau đó lọc bằng bông thủy tinh hoặc bông gòn để loại bỏ các các chất béo và những cặn bã còn sót lại. Dung dịch sau khi lọc có thể ly tâm trong thời gian 5 phút ở tốc độ 6.000 vòng/phút để loại bỏ những cặn bã có kích thước nhỏ. 6) Cô đặc: Dịch lọc được cô đặc chân không ở nhiệt độ 550C cho đến khi nồng độ chất khô đạt từ 25 – 45%. 7) Sấy: Dung dịch sau khi cô đặc được tiến hành sấy bằng không khí đối lưu ở nhiệt độ 550C cho đến khi độ ẩm thấp hơn 15%. Nghiền: Gelatin sau khi sấy đạt độ ẩm yêu cầu được nghiền nhỏ, cho vào các túi PE hàn/cột kín miệng và bảo quản ở nơi thoáng mát. 2.3 Cấu trúc hóa học của gelatin Trong thành phần của gelatin, protein chiếm 86 – 90%, muối vô cơ chiếm không quá 2%, nước chiếm từ 8 – 12%. Phân tích 100g gelatin ta thu được 18 loại acid amin với tỷ lệ như trong bảng 1. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Bảng 1. Tỷ lệ (%) acid amin trong 100g gelatin sau khi thủy phân Loại acid amin Tỷ lệ Loại acid amin Tỷ lệ Loại acid amin Tỷ lệ Tyrosin 0,4 Threonin 2,0 Arginin 10,0 Methionin 0,7 Valin 2,2 Glutamic acid 10,3 Histidin 0,8 Leucin 2,5 Alanin 10,4 Hydroxylysin 0,9 Lysin 2,9 Hydroxyprolin 11,4 Isoleucin 1,0 Serin 3,4 Prolin 12,0 Phenylalanin 1,1 Aspartic acit 4,8 Glycin 23,2 Nguồn: Bringing Chemistry to Life, 2003. Gelatin không là chất hóa học đơn lẻ mà là hỗn hợp của những thành phần nhỏ được sắp xếp hoàn toàn do những amino acid tham gia bằng liên kết peptide tạo thành dạng polyme khác nhau về khối lượng phân tử từ 15 000 - 400 000 (Theo trích dẫn của Hồ Thị Xuân Hồng, 1998). Gelatin chứa 50,5% carbon, 6,8% hydrogen, 17% nitrogen, 25,2% oxygen và 0,5% lưu huỳnh. 2.4 Tính chất lý hóa học của gelatin - Sự hòa tan Gelatin hòa tan một phần trong nước lạnh, có khả năng hút nước hoặc trương nở khi được khuấy trong nước. Gelatin hấp thu nước khoảng 5–10 lần thể tích nó. Khi gia nhiệt khoảng 40oC sẽ tan chảy ra, hòa tan và tạo gel khi làm nguội. Sự chuyển từ dạng sol sang dạng gel có tính thuận nghịch và có thể lặp đi lặp lại nhiều lần. Đây chính là tính chất quan trọng được ứng dụng nhiều trong thực phẩm của gelatin. Mức độ hòa tan của gelatin bị ảnh hưởng của các yếu tố như: nhiệt độ, nồng độ và kích thước hạt gelatin. Gelatin không tan trong alcohol và hầu hết các dung môi hữu cơ khác. - Điểm đẳng điện Gelatin có thể hoạt động trong môi trường acid hoặc trong môi trường kiềm tuỳ thuộc vào pH. Trong dung dịch acid gelatin tham gia tích cực hơn dung dịch kiềm. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Ở pH trung tính, gelatin tham gia không đáng kể và được biết như là một pH đẳng điện hay điểm đẳng điện. Điểm đẳng điện của gelatin có thể thay đổi khoảng 4,8 – 9,4 (Eastoe et al, 1961 được trích dẫn bởi Lâm Trọng Hiếu, 2003). Quá trình xử lý gelatin bằng acid tạo điểm đẳng điện cao pI = 7–9. Quá trình xử lý gelatin bằng kiềm, collagen chịu sự tác động trong môi trường kiềm trước khi trích ly. Sự thuỷ phân bằng kiềm làm cho acid amin asparagine và glutamine của chuỗi polypeptide trở thành acid aspatic và acid glutamic một cách nhanh chóng và kết quả là gelatin được tạo ra có điểm đẳng điện pI = 4,8 – 5,2. - Khả năng tạo gel Thành phần của gelatin là các acid amin nhận được từ sự thuỷ phân collagen. Khi các phân tử protein bị biến tính tập hợp lại tạo thành một mạng lưới không gian có trật tự gọi là sự tạo gel. Khi protein bị biến tính, các cấu trúc (trừ cấu trúc bậc một) bị phá hủy, liên kết giữa các phân tử bị đứt. Các mạch polypeptide duỗi ra gần nhau tiếp xúc và liên kết với nhau tạo thành mạng lưới không gian 3 chiều mà mỗi vị trí tiếp xúc của các mạch là một nút. Các thành phần còn lại hình thành một mạng lưới không gian vô định hình chứa đầy pha phân tán (H2O) khi nồng độ tăng thì khả năng gel hóa tăng vì khả năng tiếp xúc giữa các mạch tăng. Các mắt lưới trong gel gelatin chủ yếu là do các liên kết hydro, liên kết hydro là liên kết yếu tạo ra sự linh động làm cho gel có được độ dẻo nhất định. Khi ta tăng nhiệt độ các liên kết hydro bị đứt và gel sẽ nóng chảy, khi để nguội liên kết trở lại và gel lại hình thành (Phạm Thu Cúc, 2002). Để tạo ra gel chắc hơn người ta có thể acid hoá nhẹ hay kiềm nhẹ để đưa pH của protein về điểm đẳng điện làm cho lực đẩy tĩnh điện trong gel bị triệt tiêu. Độ bền gel là thuộc tính quan trọng nhất của gelatin và được định nghĩa là trọng lượng gram cần thiết để đặt lên bề mặt gel đường kính 12,5 mm tạo ra một lõm sâu 4 mm đối với 112 gram gel gelatin tiêu chuẩn 6,67% ở 10oC. - Độ nhớt Độ nhớt là tham số quan trọng thứ hai của gelatin. Độ nhớt phụ thuộc vào nồng độ, độ nhớt tăng theo sự tăng nồng độ của gelatin. Độ nhớt cũng phụ thuộc vào nhiệt độ (trên 40oC thì độ nhớt giảm, độ nhớt giảm càng nhanh khi nhiệt độ tăng cao), pH (độ nhớt thấp nhất xảy ra tại điểm đẳng điện pI của gelatin). Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Độ nhớt gelatin làm ảnh hưởng đến đặc tính gel và điểm nóng chảy. Gelatin có độ nhớt cao mức độ nóng chảy và sự thành lập gel sẽ cao hơn so với gelatin có độ nhớt thấp. - Điểm nóng chảy Điểm nóng chảy là nhiệt độ mà ở đó có thể làm mềm gel của gelatin. Các yếu tố ảnh hưởng đến điểm nóng chảy + Thời gian ổn định: theo Stainsby and Taylor (1958) xác định rằng điểm nóng chảy của gelatin ở cấp độ cao thì phụ thuộc vào những điều kiện trong thời gian ổn định đầu tiên. + Nồng độ: khi độ tinh khiết của gelatin tăng thì điểm nóng chảy cũng tăng. + Muối: NaCl hạ thấp điểm nóng chảy của gelatin. - Độ trong Độ trong của dung dịch gelatin phụ thuộc vào sự trích ly và điều kiện trích ly. Lần trích ly đầu tiên cho gelatin có độ trong cao nhất, và giảm dần ở các lần trích ly sau. Dung dịch gelatin có độ đục cao nhất ở điểm đẳng điện. Để cải thiện độ trong của gelatin, trong quá trình trích ly có thể tiến hành lọc, tẩy trắng và lắng trong. - Màu sắc Màu sắc của gelatin phụ thuộc vào nguồn nguyên liệu, phương pháp sản xuất và số lần trích ly. Màu sắc được đánh giá bằng thiết bị đo màu phân tích (colorimeter). - Độ ẩm Hàm lượng ẩm của gelatin có thể lên đến 16%. Tuy nhiên, người ta thường bảo quản gelatin ở độ ẩm 10 – 13%, tại 13% ẩm và nhiệt độ 25oC gelatin cân bằng với độ ẩm tương đối của không khí RH = 60 – 65%. 2.5 Ứng dụng của gelatin trong công nghệ thực phẩm Hầu hết các ứng dụng của gelatin là sử dụng gelatin tính chất vật lý đặc biệt của nó hơn là vì giá trị dinh dưỡng. Các tính chất quan trọng của gelatin là: + Tạo gel thuận nghịch Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 + Có nhiệt độ nóng chảy thấp + Tạo gel một mình Việc sử dụng gelatin có thể chia thành các chức năng sau: + Tạo đông: jelly, jam, mứt đông các loại. + Ổn định: kem + Nhủ hóa: bản chất gelatin là protein có một đầu không phân cực nên có thể hòa tan trong dầu, chất keo này có khả năng nhủ tương hóa nước trong dầu. + Làm đặc: xốp, đồ hộp + Kết dính: kẹo, sản phẩm thịt + Làm trong rượu. 2.6 Tổng quan về gelatin da cá Thuỷ phân collagen trong da cá tra bằng acid sẽ thu được gelatin A. Sử dụng acid để thuỷ phân vì acid dễ làm biến tính các liên kết dọc trong collagen da cá (Montero et al, 1990, 1995), xử lý nhẹ hợp lý với acid hữu cơ cũng đủ để tác động hòa tan (Norland, 1990). Cách xử lý như thế sẽ dẫn đến gelatin có điểm đẳng điện nằm trong khoảng pI = 6 – 9 (Stainsby, 1987). M.C. Gómez et al (2001) đã tiến hành so sánh các đặc tính cơ bản về lưu biến học (độ nhớt, độ bền gel) và các đặc tính cấu trúc, hóa học (thành phần acid amin, sự phân bố trọng lượng phân tử và sự tạo xoắn ốc bộ ba) của gelatin từ da nhiều loại thuỷ sản. Gelatin từ các loài cá da trơn có khả năng tạo gel tốt nhất và gel có tính chịu nhiệt cao hơn so với gelatin từ các loài cá ưa lạnh (cá tuyết). M.Gudmundsson (2002) đã tiến hành so sánh các đặc tính lưu biến học giữa gelatin của một số loại cá (cá tuyết, cá megrim, cá ngừ, cá rô phi) và gelatin truyền thống (bò và heo). Điểm khác biệt của gelatin từ cá là chúng có các giá trị độ nhớt từ thấp đến cao. Chúng cũng có các giá trị độ bền gel từ thấp đến cao. Tuy nhiên, chúng có nhiệt độ nóng chảy và tạo gel thấp hơn gel từ gelatin truyền thống. Gelatin của cá nước lạnh có nhiều sự khác biệt so với gelatin truyền thống hơn gelatin từ cá nước ấm, phản ánh sự khác nhau của các acid amin hợp thành, gelatin của cá nước lạnh có hàm lượng acid amin thấp. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 B.Jamilah và K.G.Harvinder (2002) đã tiến hành khảo sát các đặc tính của gelatin từ da của một số loài cá như rô phi đen và cá rô phi đỏ. Gelatin từ hai loại rô phi đỏ và đen có kết cấu nhẹ, bóng và trắng sáng. Gelatin của da cá rô phi đen có mùi rất tanh trong khi gelatin của da cá rô phi đỏ có mùi rất nhẹ. Giá trị pH của chúng nằm trong khoảng lân cận của 3. Độ bền gel của gelatin từ da cá rô phi đen (180,8 g) cao hơn so với độ bền gel của gelatin từ da cá rô phi đỏ (128,1g). Gelatin từ da cá rô phi đen cũng có độ nhớt đặc biệt hơn, có điểm nóng chảy cao hơn và có hàm lượng acid amin cao hơn. Gelatin da cá tra đã được Võ Quốc Văn (2004), Lâm Trọng Hiếu (2003) và Nguyễn Thị Thùy Linh (2005) thử nghiệm trích ly và đã khảo sát một số yếu tố trong quá trình trích ly ảnh hưởng đến chất lượng gelatin như: ảnh hưởng của thời gian trích ly, ảnh hưởng của nồng độ HCl, ảnh hưởng của thời gian thuỷ phân, ảnh hưởng của nhiệt độ trích ly. Võ Quốc Văn (2004) đã tiến hành thử nghiệm chạy điện di gelatin da cá tra bằng phương pháp SDS – PAGE cho thấy gelatin da cá tra có 2 cặp band rất đặc trưng nằm gần nhau, một band có khối lượng phân tử khoảng 138 KDa, band còn lại có khối lượng phân tử khoảng 125 KDa, ngoài ra còn có một band có khối lượng phân tử khoảng 95 KDa. Đề tài sẽ tiến hành đánh giá một số tính chất lý hóa học của gelatin da cá tra được trích ly theo quy trình trích ly của Võ Quốc Văn ( 2004). Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 CHƯƠNG III. PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 3.1 PHƯƠNG TIỆN THÍ NGHIỆM - Thực hiện nghiên cứu, thu thập và xử lý số liệu tại phòng thí nghiệm bộ môn Công nghệ thực phẩm, Khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, Viện Nghiên Cứu và Phát Triển Công Nghệ Sinh Học. - Nguyên liệu sử dụng là geltin da cá tra, gelatin của Hải Phòng và gelatin của Trung Quốc. - Hóa chất, thiết bị thí nghiệm sử dụng các loại của phòng thí nghiệm bộ môn Công Nghệ Thực Phẩm, Khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, Viện Nghiên Cứu và Phát Triển Công Nghệ Sinh Học, Truờng Đại Học cần Thơ. - Thời gian thực hiện: từ 26/2/2007 đến 25/5/2007 3.1.1 Dụng cụ và thiết bị - Cân bàn, cân điện tử - Bình hút ẩm - Dụng cụ thuỷ tinh - Nhiệt kế - Tủ cấp đông - Tủ lạnh - Tủ sấy - Máy đo pH - Máy đo độ nhớt Brookfield - Máy đo cấu trúc SunRheotex - Lò nung - Thiết bị chạy điện di Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 - Oil bath - Hệ thống đốt đạm, lôi cuốn đạm - Bếp điện - Thiết bị ly tâm - Thiết bị cô đặc chân không 3.1.2 Hóa chất sử dụng - Dung dịch H2SO4 đậm đặc, H2SO4 0,1N - Acid Boric - Dung dịch NaOH (30%) - Chất xúc tác phân tích đạm - Acid citric - Pectin - NaOH tinh thể - Muối ăn - Acid HCl 3.1.3 Nguyên liệu - Gelatin da cá tra - Gelatin Hải Phòng - Gelatin Trung Quốc - Đường cát Sau đây là một số hình ảnh máy móc thiết bị sử dụng trong quá trình phân tích các chỉ tiêu. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Hình 8 – Máy đo độ nhớt Brookfield Hình 7 – Lò nung Hình 6 – Máy đo pH Hình 2 - Hệ thống đốt đạm Hình 3 - Hệ thống cất đạm Hình 4 - Máy sấy Hình 5 – Máy đo cấu trúc Rheotex Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 3.2 PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM Các chỉ tiêu phân tích và phương pháp phân tích - Chỉ tiêu vật lý + Xác định độ bền gel bằng máy đo cấu trúc Rheotex + Xác định độ nhớt bằng máy đo độ nhớt Brookfield - Chỉ tiêu hóa học + Xác định hàm lượng ẩm bằng phương pháp sấy ở 105oC đến khối lượng không đổi + Xác định hàm lượng tro bằng lò nung + Xác định hàm lượng đạm tổng số bằng phương pháp Kjeldahl + Xác định pH bằng máy đo pH + Xác định trọng lượng phân tử bằng phương pháp chạy điện di SDS-PAGE 3.3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 3.3.1 Phân tích các chỉ tiêu vật lý - Mục đích Xác định và so sánh hai đặc tính vật lý: độ bền gel và độ nhớt của 3 loại gelatin khác nhau – gelatin từ da cá tra, gelatin Hải Phòng và gelatin Trung Quốc. - Chuẩn bị mẫu + Đối với mẫu đo độ bền gel: mẫu được chuẩn bị ở nồng độ 6,67 (w/w) bằng cách ngâm trong nước lạnh có khuấy trộn 60 phút. Sau đó đun nóng ở 60oC trong 10 phút, điều chỉnh pH = 6, giữ dung dịch ở 60oC trong 3 giờ, sau đó tiến hành đo sau 17 giờ bảo quản ở 10oC (Theo tiêu chuẩn BSI 757, 1975) + Đối với mẫu đo độ nhớt: dung dịch được chuẩn bị với nồng độ 6,67% (w/w), đun nóng ở 60oC. (Theo tiêu chuẩn BSI 757,1975) - Tiến hành Tiến hành xác định độ bền gel và độ nhớt của 3 loại gelatin Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 • Gelatin da cá Tra • Gelatin Hải Phòng • Gelatin Trung Quốc + Mẫu được xác định độ bền gel bằng máy đo cấu trúc Rheotex + Mẫu được xác định độ nhớt bằng máy đo độ nhớt Brookfield Số lần lặp lại: mỗi loại gelatin khi xác định độ nhớt được lặp lại 9 lần và xác định độ bền gel được lặp lại 15 lần. 3.3.2 Phân tích các chỉ tiêu hóa học - Mục đích Xác định và so sánh một số chỉ tiêu hóa học của 3 loại gelatin - gelatin từ da cá tra, gelatin Hải Phòng và gelatin Trung Quốc. - Chuẩn bị mẫu + Đối với mẫu xác định ẩm: cân bằng cân phân tích khoảng 5 g mẫu cho vào cốc đã biết khối lượng. + Đối với mẫu xác định hàm lượng tro: mẫu sau khi xác định ẩm được đem đi đốt tro. + Đối với mẫu xác định hàm lượng đạm tổng số: cân bằng cân phân tích khoảng 1 gam mẫu cho vào ống đốt đạm cùng với 10 ml acid sunfuric đậm đặc và 5 gam chất xúc tác. + Đối với mẫu xác định pH: chuẩn bị mẫu ở nồng độ 6,67% (7,5 gam mẫu hòa cùng 105g nước cất), mẫu được cho vào nước lạnh khuấy đều trong 1giờ sau đó được giữ ở 60oC. + Đối với mẫu xác định trọng lượng phân tử: gelatin được hòa tan trong nước cất ở 60oC (100 mg/10 ml), ly tâm với tốc độ 7000 vòng /phút, loại bỏ phần cặn. Sau đó pha mẫu với dung dịch đệm, pha mẫu với tỷ lệ 1:2 (50 µl mẫu: 100 µl dung dịch đệm pha mẫu) trong ống eppendorf, lắc đều và đun cách thuỷ ở nhiệt độ 95oC trong 5 phút. Mẫu gelatin chuẩn (sử dụng trong phòng thí nghiệm, hãng Merck, trọng lượng phân tử từ 15.000 đến 250.000 Da) cũng được chuẩn bị như trên (Walker, 2002). Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 -Tiến hành Tiến hành phân tích các chỉ tiêu hóa học của 3 loại gelatin: da cá, Hải Phòng, Trung Quốc. Số lần lặp lại: đối với mỗi loại gelatin khi xác định hàm lượng tro và ẩm lặp lại 6 lần, xác định pH lặp lại 5 lần và xác định hàm lượng đạm lặp lại 12 lần, riêng chạy điện di lặp lại 2 lần. 3.3.3 Thử nghiệm chế biến sản phẩm kẹo mềm - Mục tiêu thí nghiệm So sánh cấu trúc của kẹo mềm làm từ ba loại gelatin: gelatin Trung Quốc, gelatin Hải Phòng và gelatin da cá tra. Từ đó xét khả năng ứng dụng vào thực phẩm của gelatin da cá tra. - Chuẩn bị mẫu Gelatin được cân theo khối lượng cho sẵn, sử dụng 9% gelatin, hòa tan vào trong nước lạnh để trương nở. Đường: 45%, pectin: 0,25%, acid citric: 0,5% - Sơ đồ bố trí thí nghiệm Hình 9 - Qui trình sản xuất thử nghiệm kẹo mềm gelatin Nấu Tạo gel Định hình Đánh giá cấu trúc Đường, pectin, acid citric Nguyên liệu Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Thí nghiệm được tiến hành với 3 loại gelatin ở cùng một nồng độ 9 %, mỗi loại gelatin được lặp lại 3 lần Các nhân tố khác được chọn cố định dựa trên các nghiên cứu trước và công thức ứng dụng. - Chỉ tiêu ghi nhận Sản phẩm được đánh giá dựa trên cấu trúc (đo bằng máy đo cấu trúc Rheotex). Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 CHƯƠNG IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU VẬT LÝ 4.1.1 Chỉ tiêu vật lý của gelatin da cá tra Bảng 2 - Kết quả độ bền gel và độ nhớt của gelatin da cá Tra Chỉ tiêu vật lý Giá trị trung bình Độ bền gel (gam lực) Độ nhớt (mPas) 38 4,5 4.1.2 Chỉ tiêu vật lý của gelatin Trung Quốc Bảng 3 - Kết quả độ bền gel và độ nhớt của gelatin Trung Quốc Chỉ tiêu vật lý Giá trị trung bình Độ bền gel (gam lực) Độ nhớt (mPas) 43 4,0 4.1.3 Chỉ tiêu vật lý của gelatin Hải Phòng Bảng 4 - Kết quả độ bền gel và độ nhớt của gelatin Hải Phòng Chỉ tiêu vật lý Giá trị trung bình Độ bền gel (gam lực) Độ nhớt (mPas) 92 5,8 4.2 THẢO LUẬN CÁC CHỈ TIÊU VẬT LÝ 4.2.1 Độ bền gel của 3 loại gelatin Bảng 5- Thống kê độ bền gel của 3 loại gelatin Loại nguyên liệu Da cá Trung Quốc Hải Phòng Độ bền gel (gam lực) 38c 43b 92a (Những chữ khác nhau trên cùng một hàng thì khác biệt có ý nghĩa thống kê ở độ tin cậy 95 %) Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Hình 10 - Đồ thị biểu diễn độ bền gel của 3 loại gelatin Qua kết quả phân tích thống kê và đồ thị cho thấy độ bền gel của 3 loại gelatin khác biệt có ý nghĩa. Độ bền gel của gelatin Hải Phòng là cao nhất và của da cá Tra là thấp nhất. Sự khác biệt này có thể giải thích là do nguồn gốc nguyên liệu, gelatin Trung Quốc và gelatin Hải Phòng có nguồn gốc từ động vật, mặc dù tất cả các loại gelatin đều chứa 18 loại acid amin nhưng lượng imino acid (prolin và hydroxyprolin) thì khác nhau. Theo kết quả nghiên cứu của Norland Prod, Inc., 1999-2000 cho thấy gelatin từ da cá có hàm lượng imino acid thấp hơn gelatin có nguồn gốc từ động vật. Và như ta đã biết, độ bền gel của gelatin có được là do sự linh động của liên kết hydro, với hàm lượng imino acid thấp liên kết hydro của gelatin khi tan trong nước thấp do đó mà độ bền gel của gelatin từ da cá sẽ thấp hơn gelatin làm từ động vật. Hơn nữa với kết quả chạy điện di cho thấy gelatin da cá Tra có trọng lượng phân tử thấp hơn hai loại gelatin kia, đó cũng là một trong những nhân tố ảnh hưởng đến độ bền gel. 4.2.2 Độ nhớt của 3 loại gelatin Bảng 6- Thống kê độ nhớt của 3 loại gelatin Loại nguyên liệu Da cá Trung Quốc Hải Phòng Độ nhớt (mPas) 4,5ab 4,0b 5,8a (Những chữ giống nhau trên cùng một hàng thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê ở độ tin cậy 95 %) 0 20 40 60 80 100 Da cá Trung Quốc Hải Phòng Loại nguyên liệu Đ ộ bề n ge l (g am lự c) Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Hình 11 - Đồ thị biểu diễn độ nhớt của 3 loại gelatin Qua kết quả phân tích thống kê và đồ thị cho thấy độ nhớt của gelatin Hải Phòng là cao nhất. Độ nhớt của gelatin Trung Quốc và Hải Phòng khác biệt có ý nghĩa. Độ nhớt của gelatin da cá khác biệt không ý nghĩa với gelatin Trung Quốc và Hải Phòng ở mức ý nghĩa 5%. Như vậy, qua kết quả phân tích hai chỉ tiêu vật lý độ bền gel và độ nhớt thấy rằng gelatin da cá và gelatin Trung quốc không khác biệt nhiều tuy độ bền gel của gelatin da cá có thấp hơn gelatin Trung quốc nhưng mức độ chênh lệch không cao trong khi giá thành thì có sự cách biệt lớn. 4.3 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU HÓA HỌC 4.3.1 Chỉ tiêu hóa học của gelatin da cá tra Bảng 7 - Kết quả chỉ tiêu hóa học của gelatin da cá tra Chỉ tiêu hóa học Giá trị trung bình Độ ẩm (%) Độ tro (%) Protein tổng số (%) pH 5,18 1,43 85,46 3,58 0 2 4 6 8 Da cá Trung Quốc Hải Phòng Loại nguyên liệu Đ ộ n hớ t (m Pa s) Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 4.3.2 Chỉ tiêu hóa học của gelatin Trung Quốc Bảng 8 - Kết quả chỉ tiêu hóa học của gelatin Trung Quốc Chỉ tiêu hóa học Giá trị trung bình Độ ẩm (%) Độ tro (%) Protein tổng số (%) pH 10,76 1,41 87,84 5,75 4.3.3 Chỉ tiêu hóa học của gelatin Hải Phòng Bảng 9 - Kết quả chỉ tiêu hóa học của gelatin Hải Phòng Chỉ tiêu hóa học Giá trị trung bình Độ ẩm (%) Độ tro (%) Protein tổng số (%) pH 10,51 1,67 90,78 4,22 - Trọng lượng phân tử Kết quả điện di SDS-PAGE trên gel polyacrylamide với gel tập trung 4% và gel phân tích 7,5% thể hiện trong hình 12. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Hình 12. Kết quả điện di SDS-PAGE trên gel polyacrylamide - Giếng 1: Gelatin da cá Tra - Giếng 2: Gelatin của Trung Quốc - Giếng 3: Gelatin của Hải Phòng - Giếng 4: Gelatin của Hải Phòng - Giếng 5: Gelatin da cá Tra - Giếng 6: Gelatin của Trung Quốc. 4.4 THẢO LUẬN CÁC CHỈ TIÊU HÓA HỌC 4.4.1 Hàm lượng ẩm của 3 loại gelatin Bảng 10 - Thống kê hàm lượng ẩm của 3 loại gelatin Loại nguyên liệu Da cá Trung Quốc Hải Phòng Hàm lượng ẩm (%) 5,18 10,76 10,51 (Những chữ khác nhau trên cùng một hàng thì khác biệt có ý nghĩa thống kê ở độ tin cậy 95 %) 1 2 3 4 5 6 Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Hình 13 - Đồ thị biểu diễn hàm lượng ẩm của 3 loại gelatin Qua kết quả phân cho thấy độ ẩm của gelatin Trung Quốc là cao nhất và độ ẩm của gelatin da cá tra là thấp nhất. Hàm lượng ẩm của gelatin da cá phân tích được có khác biệt so với kết quả phân tích của Nguyễn Thị Thùy Linh (2005). Sự khác biệt này có thể giải thích là do qui trình sản xuất khác nhau. 4.4.2 Hàm lượng tro của 3 loại gelatin Bảng 11 - Thống kê hàm lượng tro của 3 loại gelatin Loại nguyên liệu Da cá Trung Quốc Hải Phòng Hàm lượng tro (%) 1,43a 1,41a 1,67a (Những chữ giống nhau trên cùng một hàng thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê ở độ tin cậy 95 %) 0 2 4 6 8 10 12 Da cá Trung Quốc Hải Phòng Loại nguyên liệu Hà m lư ợ n g ẩm (% ) Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Hình 14 - Đồ thị biểu diễn hàm lượng tro của 3 loại gelatin Qua kết quả phân tích thống kê và đồ thị cho thấy hàm lượng tro của 3 loại nguyên liệu khác biệt không ý nghĩa ở mức ý nghĩa 5%. 4.4.3 Hàm lượng đạm của 3 loại gelatin Bảng 12 - Thống kê hàm lượng đạm của 3 loại gelatin Loại nguyên liệu Da cá Trung Quốc Hải Phòng Hàm lượng đạm (%) 85,46b 87,84b 90,78a (Những chữ giống nhau trên cùng một hàng thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê ở độ tin cậy 95 %) Hình 15 - Đồ thị biểu diễn hàm lượng đạm của 3 loại gelatin Qua kết quả phân tích thống kê và đồ thị cho thấy hàm lượng đạm của gelatin Hải Phòng là cao nhất và khác biệt có ý nghĩa với gelatin da cá và Trung Quốc. Gelatin 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 Da cá Trung Quốc Hải Phòng Loại nguyên liệu Hà m lư ợ n g tr o (% ) 82 84 86 88 90 92 Da cá Trung Quốc Hải Phòng Loại nguyên liệu Đ ạm tổ n g số (% ) Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 da cá và gelatin Trung Quốc có hàm lượng đạm không khác biệt nhau ở mức ý nghĩa 5%. Hàm lượng đạm của gelatin da cá phân tích được có khác biệt so với kết quả phân tích của Lâm Trọng Hiếu (2003) và Nguyễn Thị Thùy Linh (2005). Điều này có thể giải thích là do sự khác biệt về nguồn gốc nguyên liệu và qui trình sản xuất gelatin khác nhau. 4.4.4 Giá trị pH của 3 loại gelatin Bảng 13 - Thống kê giá trị pH của 3 loại gelatin Loại nguyên liệu Da cá Trung Quốc Hải Phòng pH 3,58c 5,75a 4,22b (Những chữ khác nhau trên cùng một hàng thì khác biệt có ý nghĩa thống kê ở độ tin cậy 95 %) Hình 16 - Đồ thị biểu diễn giá trị pH của 3 loại gelatin Qua bảng phân tích thống kê và đồ thị biểu diễn cho thấy giá trị pH của 3 loại gelatin khác biệt có ý nghĩa. pH của gelatin Trung Quốc là cao nhất và pH của gelatin da cá tra là thấp nhất. 4.4.5 Trọng lượng phân tử của gelatin Do điều kiện hóa chất chuẩn chưa về kịp trong thời gian thí nghiệm nên không thể xác định chính xác trọng lượng phân tử của từng loại gelatin. Đề tài tiến hành chạy điện di trên cơ sở so sánh sự khác biệt trọng lượng phân tử của ba loại gelatin. Kết quả điện di SDS-PAGE trên gel polyacrylamide cho thấy gelatin từ da cá Tra có một cặp band rất đặc trưng nằm gần nhau. Điều này phù hợp với kết quả chạy 0 2 4 6 8 Da cá Trung Quốc Hải Phòng Loại nguyên liệu pH Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 điện di của Võ Quốc Văn (2004). Gelatin Trung Quốc và Hải Phòng có band trọng lượng phân tử lớn hơn gelatin da cá Tra. Nhìn chung, sau khi phân tích một số chỉ tiêu hóa học của 3 loại gelatin nhận thấy gelatin Hải Phòng là tốt nhất. Gelatin da cá Tra và gelatin Trung Quốc hàm lượng tro và hàm lượng đạm tổng số tương đương nhau. Gelatin da cá Tra có trọng lượng phân tử thấp hơn gelatin Trung Quốc và Hải Phòng. 4.5 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN CẤU TRÚC CỦA SẢN PHẨM KẸO MỀM GELATIN Bảng 14 - Kết quả và thống kê cấu trúc kẹo mềm từ 3 loại gelatin Loại nguyên liệu Da cá Trung Quốc Hải Phòng Cấu trúc kẹo (g lực) 163c 282b 488a (Những chữ khác nhau trên cùng một hàng thì khác biệt có ý nghĩa thống kê ở độ tin cậy 95 %) Hình 17 - Đồ thị biểu diễn cấu trúc của kẹo mềm làm từ 3 loại gelatin Qua kết quả phân tích thống kê và đồ thị biểu diễn cho thấy cấu trúc kẹo mềm làm từ 3 loại gelatin khác biệt có ý nghĩa. Cấu trúc kẹo làm từ gelatin Hải Phòng có cấu trúc bền nhất và kẹo làm từ gelatin da cá tra có độ bền thấp hơn. Kẹo làm từ gelatin da cá tra cho cấu trúc mềm hơn hai loại kia nhưng với cấu trúc này cho thấy gelatin da cá tra có thể ứng dụng vào thực phẩm. Như vậy với mỗi loại gelatin khác nhau và với những sản phẩm khác nhau cần tìm ra tỉ lệ gelatin thích hợp để có sản phẩm hoàn chỉnh nhất 0 100 200 300 400 500 600 Da cá Trung Quốc Hải Phòng Loại gelatin Cấ u tr úc kẹ o (ga m lự c) Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Theo qui trình sản xuất gelatin da cá tra của Võ Quốc Văn, tác giả đã đưa ra chi phí sản xuất 1 kg gelatin thể hiện ở bảng 15. Bảng 15 - Chi phí sản xuất 1 kg gelatin từ da cá Tra. Nội dung chi phí Đơn vị tính Số lượng Đơn giá Thành tiền (VNĐ/1Kg) Da cá kg 6,400 500 3,200 Muối (NaCl) kg 5,391 1,500 8,087 NaOH kg 0,922 6,500 5,990 Acit citric kg 0,614 13,000 7,987 Nhân công người/kg 0,080 50,000 4,000 Điện KW 10,000 1,000 10,000 Nước m3 1,000 2,500 2,500 Khác (5% tổng số) / / / 2,088 Khấu hao thiết bị (200,000,000 đồng, 5 năm) 3,704 Tổng cộng 47,557 Bảng 16 - Giá thành của 3 loại gelatin phân tích TT Loại gelatin Giá thành (VNĐ/Kg) 1. Gelatin thô (của Hải Phòng sản xuất) 0050,000 2. Gelatin thô của Trung Quốc 0180,000 3. Gelatin da cá tra 47,557 Hải Phòng-Trung Quốc- Da cá Hình 18 - Nguyên liệu gelatin Hình 19 - Sản phẩm kẹo Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 Bảng 15 và bảng 16 cho thấy gelatin từ da cá Tra có giá thành sản phẩm (47,557 đ/kg) rẻ hơn so với hai loại gelatin hiện có trên thị trường đặc biệt là gelatin ngoại nhập (180,000 đ/kg). Và với kết quả khảo sát một số chỉ tiêu chất lượng gelatin da cá tra nhận thấy gelatin da cá tra có chất lượng gần bằng với gelatin Trung Quốc, và có thể ứng dụng gelatin da cá tra vào trong thực phẩm. Điều này mở ra một khả năng hiện thực cho việc sản xuất gelatin từ da cá Tra, một nguồn nguyên liệu rẻ tiền mà lâu nay chưa được sử dụng. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 CHƯƠNG 5. KẾT LUẬN Sau khi tiến hành phân tích một số chỉ tiêu lý hóa học của ba loại gelatin: gelatin da cá tra, gelatin Trung Quốc và gelatin Hải Phòng thu được kết quả như sau: - Gelatin da cá tra và gelatin Trung quốc có độ nhớt và hàm lượng đạm tổng số tương đương nhau, độ bền gel của gelatin Trung Quốc cao hơn gelatin da cá nhưng sự khác biệt không lớn lắm. - Hàm lượng tro của ba loại gelatin không khác biệt nhau về mặt thống kê. - Gelatin da cá tra có độ ẩm, pH và độ bền gel thấp hơn gelatin Trung Quốc và Hải Phòng. - Gelatin Trung Quốc có độ ẩm và giá trị pH cao nhất. - Gelatin Hải Phòng có độ nhớt, độ bền gel và hàm lượng đạm tổng số cao nhất. Sau khi thử nghiệm chế biến sản phẩm kẹo mềm từ ba loại gelatin, tuy gelatin da cá tra cho sản phẩm có độ dẻo thấp hơn hai loại kia nhưng với độ dẻo có được có thể kết luận gelatin da cá tra có thể ứng dụng vào thực phẩm. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 CHƯƠNG 6. ĐỀ NGHỊ - Tiến hành chạy điện di lại với hóa chất chuẩn để xác định trọng lượng phân tử của gelatin da cá Tra cũng như gelain Trung Quốc và Hải Phòng. - Phân tích thêm một số chỉ tiêu lý hoá học của gelatin như: màu sắc, độ tinh khiết, độ trong, mùi, độ hòa tan, chỉ tiêu vi sinh, thành phần acid amin và khả năng bảo quản để có kết luận đầy đủ hơn về chất lượng của gelatin da cá Tra. - Khảo sát để tìm ra nồng độ gelatin tối thích cho sản phẩm kẹo mềm, bổ sung thêm các thành phần khác để có sản phẩm hoàn chỉnh. - Đánh giá chất lượng của gelatin da cá Tra được sản xuất từ những qui trình khác nhau để tìm ra qui trình sản xuất tốt nhất. - Thử nghiệm chế biến nhiều sản phẩm khác nhau có sử dụng gelatin da cá để có thể kết luận một cách đầy đủ hơn khả năng ứng dụng vào thực phẩm của gelatin da cá Tra. Luận văn tốt nghiệp khóa 28 – 2007 Trường Đại Học Cần Thơ 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Lâm Trọng Hiếu (2003), Xây dựng quy trình sản xuất gelatin từ da cá tra, Trường Đại học Cần thơ. Nguyễn Thị Thùy Linh (2005), Khảo sát ảnh hưởng của loại và nồng độ acid sử dụng đến khả năng trích ly gelatin từ da cá tra, Trường Đại Học Cần Thơ. Phạm Thu Cúc (2002), Sinh hoá tập I, Trường Đạo Học Cần Thơ Võ Quốc Văn (2004), Nghiên cứu khảo sát trích ly gelatin từ da cá tra, Trường Đại học cần Thơ. Hồ Thị Xuân Hồng (1998), Khảo sát sự thay đổi các biện pháp tạo đông đến giá trị cảm quan và chất lượng dinh dưỡng của sản phẩm gà áo Jelly, Trường Đại Học Cần Thơ. Tiếng Anh Gómez – Guillen, M.C.,and P. Montero (2001), Extraction of gelatin from megrim (Lepidorhombus boscii) skins with several organic acids. Journal of Food Science 66(2): 213-216 Gudmunsson, M (2002), Rheological properties of fish gelatin. Journal of Food Science 67(6): 2172-2176. Ingvild J. Haug, Kurt I. Draget, Olav Smidsrod. Physical and rheological properties of fish gelatin compared to mammalian gelatin. Food Hydrolloids xx(0000): xxx-xxx. Jamilah, B.,and K.G. Harvinder (2002), Properties of gelatin from skins of fish black tilapia (Oreochromis mossambicus) and red tilapia (Oreochromis nilotica). Food Chemistry 77: 81 – 84. M.C.Gómez-Guillen, J. Turnay, M.D.Fernandez-Diaz, N. Ulmo, M.A. Lizarbe, P.Montero. Structure and physical properties of gelatin extracted from different marine species: acomparative study. Food hydrocolloids 16 (2002) 25 – 34. Poppe, J. 1995. Thickening and gelling for food: 99 - 123 Các trang web