Luận văn Nghiên cứu quy trình phân tích Carbaryl, Dimethoate, Vitamin C trong cải bắp với thiết bị HPLC

thoate trong nöôùc. Chuaån bò pha ñoäng khaûo saùt: ôû ñaây chuùng ta tieán haønh khaûo saùt khaû naêng taùch Carbaryl vaø Dimethoate cuûa caùc pha ñoäng coù thaønh phaàn Axetonitril vaø nöôùc theo nhöõng tæ leä 85/15, 70/30, 55/45, 40/60. Tieán haønh pha caùc pha ñoäng vôùi tæ leä veà theå tích Axetonitril: nöôùc = 85/15, 70/30, 55/45, 40/60. ÖÙng vôùi moãi pha ñoäng naøy ta thöïc hieän phaân tích cho caû Carbaryl vaø Dimethoate ôû noàng ñoä 10 ppm ñaõ pha ôû treân. Moãi pha ñoäng khi phaân tích vôùi töøng chaát seõ cho soá lieäu veà thôøi gian löu vaø dieän tích peak töông öùng. 3.5. Xaây döïng caùc ñöôøng chuaån cuûa caùc chaát phaân tích Chuaån bò caùc dung dòch chuaån Carbaryl, Dimethoate, Vitamin C vôùi caùc noàng ñoä 1, 2, 5, 10, 20 ppm baèng caùch pha loaõng ra töø dung dòch chuaån goác 1000 ppm. Pha ñoäng choïn ñeå xaây döïng ñöôøng chuaån döïa vaøo keát quaû cuûa thí nghieäm muïc 3.4. Ñoái vôùi Carbaryl vaø Dimethoate choïn pha ñoäng laø Axetonitril: nöôùc theo tæ leä theå tích 55: 45. Coøn ñoái vôùi pha ñoäng phaân tích Vitamin C söû duïng laø methanol: heä ñeäm KH2PO4 coù pH = 2,8 theo theå tích 10 : 90. Heä ñeäm ñöôïc pha baèng caùch hoaø tan 6,5g KH2PO4 trong 1l nöôùc caát 2 laàn, chænh pH veà 2,8 baèng H3PO4 roài loïc baèng maøng 0,45µm. Tieán haønh ño caùc dung dòch Carbaryl vaø Dimethoate treân maùy saéc kyù vôùi caùc thoâng soá nhö muïc 3.3 treân. Moãi maãu chuaån phaân tích 3 laàn, laáy giaù trò trung bình cuûa dieän tích peak. Thieát laäp ñöôøng chuaån phuï thuoäc cuûa dieän tích peak thu ñöôïc vaøo noàng ñoä chaát phaân tích trong dung dòch maãu chuaån. 3.6. Xaùc ñònh ñoä thu hoài maãu qua coät cuûa moãi chaát öùng vôùi ñieàu kieän choïn phaân tích. Ñeå xaùc ñònh ñoä thu hoài maãu cuøa caùc chaát qua coät phaân tích ta tieán haønh phaân tích ôù caùc noàng ñoä töø 1 ñeán 20 ppm. ÔÛ cheá ñoä coù ñi qua coät: moãi noàng ñoä phaân tích 3 laàn theo cheá ñoä öùng vôùi chaát ñaõ neâu ôû treân, tính dieän tích peak trung bình (Xc). ÔÛ cheá ñoä khoâng cho qua coät: cöù khoaûng 1 phuùt ta tieâm maãu vaøo coät moät laàn vôùi theå tích 20 µl, sau 5 -6 phuùt thì döøng (caùc laàn bôm töø laàn 2 trôû ñi khoâng nhaán phím START). Tính giaù trò trung bình cuûa dieän tích peak ôû moãi noàng ñoä (X0). LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 25 Giaù trò hieäu suaát thu hoài qua coät Hc (%) ñöôïc tính theo coâng thöùc: Hc (%) = X X c 0  100 [Coâng thöùc 1] 3.7. Khaûo saùt caùc baäc trích ly Carbaryl, Dimethoate vaø xaùc ñònh hieäu suaát thu hoài qua caùc baäc. 3.7.1. Löïa choïn quy trình trích ly ñoái vôùi Carbaryl vaø Dimethoate. Taøi lieäu tham khaûo töø AOAC vaø caùc luaän vaên toát nghieäp ñaïi hoïc naêm tröôùc cho thaáy, quy trình phaân tích döïa treân caùc böôùc cô baûn: trích ly, laøm saïch, phaân tích treân thieát bò. Trong quy trình trích ly caùc chaát Carbaryl vaø Dimethoate thì quan troïng nhaát phaûi choïn ñöôïc dung moâi trích ly toát nhaát. ÔÛ ñaây chuùng toâi choïn dung moâi trích ly laø Axeton. Caùc böôùc tieán haønh cuûa quùa trình trích ly Carbaryl vaø Dimethoate ñöôïc thöïc hieän nhö sau: - Böôùc 1: Caân 100g maãu rau cho vaøo maùy xay Magic bullet, theâm 200 ml Aceton vaøo, nghieàn trong thôøi gian 1 phuùt. - Böôùc 2: Chuyeån hoãn hôïp sau khi nghieàn vaøo trong bercher 500 ml, traùng saïch maùy xay baèng Axeton, sau ñoù ñem ñi khuaáy töø trong thôøi gian 15 phuùt - Böôùc 3: Tieán haønh loïc chaân khoâng qua giaáy loïc treân pheãu loïc Buchner, thu dòch loïc vaøo Bercher 500 ml. Baõ giöõ laïi ôû treân pheãu. Caân khoaûng 20g muoái NaCl (tuøy vaøo löôïng nöôùc coù trong maãu) cho vaøo dòch trích, khuaáy caù töø ñeå hoøa tan hoaøn toaøn muoái - Böôùc 4: Chuyeån dòch ñaõ boå sung muoái vaøo trong phieãu chieát, taùch pha höõu cô ra khoûi pha nöôùc. - Böôùc 5: Laáy pha höõu cô phía treân ñem ñi coâ quay chaân khoâng cho ñeán khi caïn vaø dòch khoâng coøn thay ñoåi theå tích nöõa thì döøng. - Böôùc 6: Chuyeån phaàn dòch sau coâ quay vaøo bình ñònh möùc 100 ml, traùng bình coâ quay baèng 25 ml Axetonitril vaøo bình ñònh möùc tieáp tuïc ñònh möùc ñeán vaïch. - Böôùc 7: Dòch sau khi ñònh möùc ñem ñi loïc vôùi maøng loïc 0,45 µm sau ñoù ñaùnh sieâu aâm loaïi boït khí vaø tieán haønh phaân tích treân maùy HPLC. Sau ñaây laø sô ñoà khoái cuûa quy trình treân: (xem hình 3.1, trang 26) LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 26 Hình 3.1: Sô ñoà quy trình trích ly Carbaryl vaø Dimethoate. Coâ quay chaân khoâng 120 v/p, 45oC Traùng bình Taùch pha Pha nöôùc 20 g NaCL 100g rau Xay200 ml Axeton Laéc Loïc chaân khoâng Baõ Sieâu loïc 0,45 µm Dòch phaân tích Ñònh möùc 100 ml LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 27 3.7.2. Khaûo saùt hieäu suaát trích ly dòch Carbaryl vaø Dimethoate trong nöôùc qua caùc baäc trích ly. Caùch tieán haønh nhö sau: cho 25 ml dung dòch moãi chaát Carbaryl vaø Dimethoate 20 ppm ñaõ pha saün trích ly trong 50 ml Axeton. Sau ñoù cuõng tieán haønh khuaáy töø ñeå hoøa tan Carbaryl vaø Dimethoate vaøo trong Axeton. Tieán haønh gioáng caùc böôùc töø 4 ñeán 7 nhö quy trình muïc 3.7.1 treân. Pha höõu cô taùch ra laàn thöù nhaát sau khi tieán haønh caùc böôùc tieáp theo ta ñöôïc dòch trích baäc 1 ñem ñi phaân tích, tieáp tuïc laáy pha nöôùc boå sung theâm Axeton vaø muoái ñem ñi khuaáy töø tieáp thu ñöôc pha höõu cô vaø nöôùc laàn 2. Pha höõu cô tieáp tuïc quy trình phía sau thu dòch trích baäc 2, pha nöôùc thu ñöôïc laàn 2 laïi cho theâm Axeton vaø muoái ñem khuaáy töø vaø taùch pha laàn 3. Pha höõu cô thu ñöôïc laàn 3 tieáp tuïc quaù trình ñeå coù dòch trích baäc 3. Chæ khaûo saùt 3 baäc vì vaäy pha nöôùc laàn 3 ñöôïc loaïi boû. Dòch trích ly baäc 1, 2, 3 ñöôïc ñem ño treân maùy HPLC ñeå xaùc ñònh dieän tích caùc peak. Moãi maãu tieán haønh ño 3 laàn, laáy dieän tích peak trung bình. Ñeå tính ñöôïc hieäu suaát thu hoài caùc chaát qua caùc baäc trích ly ta tieán haønh ñoàng thôøi ño dieän tích peak cuûa dung dòch Carbaryl, Dimethoate 20 ppm ñem ñi trích ñeå so saùnh. Sô ñoà quy trình trích ñöôïc theå hieän ôû hình 3.2: (trang 28) 3.7.3 Khaûo saùt ñoä thu hoài maãu cuûa quy trình trích ly Carbaryl vaø Dimethoate treân maãu caûi baép Sô ñoà quy trình trích döïa treân quy trình ôû sô ñoà hình 3.1 vaø keát quaû choïn soá baäc seõ ñöôïc trình baøy ôû phaàn keát quaû vaø baøn luaän. Tieán haønh khaûo saùt ñoä thu hoài Carbaryl vaø Dimethoate treân ñoái töôïng phaân tích laø caûi baép. Caûi baép ñöôïc mua ôû chôï ñem veà baûo quaûn trong ngaên maùt cuûa tuû laïnh. Ñeå ñaùnh giaù möùc ñoä hoaøn thieän cuûa moät quy trình phaân tích chuùng toâi döïa vaøo ñoä thu hoài maãu. Ñoä thu hoài maãu laø möùc ñoä thu hoài löôïng hoaït chaát ñaõ theâm vaøo trong maãu rau khi phaân tích. Vì vaäy ta phaûi bieát chính xaùc löôïng thuoác theâm vaøo treân rau. Vaø tính hieäu suaát thu hoài döïa treân löôïng thuoác theâm vaøo naøy. Ta tieán haønh khaûo saùt ñoä thu hoài maãu ôû caùc noàng ñoä boå sung töông öùng vôùi löôïng phun theâm 2,5 ; 5 ; 10 ml dung dòch 100 ppm Carbaryl, Dimethoate vaøo caûi baép vaø löôïng theâm cuõng 2,5 ; 5; 10 ml dung dòch chuaån Carbaryl, Dimethoate 100 ppm vaøo dòch trích ñaõ ñöôïc loïc chaân khoâng. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 28 Nöôùc Dòch phaân tích 3 25mL Carbaryl , Dimethoate 20ppm 50mL Axeton Khuaáy töø 5 – 7g NaCl Taùch pha 2mL Axetonitril Ñònh möùc 10mL Dòch phaân tích 2 2nl Axetonitril Pha höõu cô Coâ quay chaân khoâng Traùng bình Ñònh möùc 50mL Dòch phaân tích 1 Pha nöôùc AxetonKhuaáy Taùch pha 2-3g NaCl Pha höõu cô Pha nöôùc Khuaáy töø Taùch pha Coâ quay chaân khoâng Traùng bình Hình 3.2: Sô ñoà trích ly 3 baäc Axeton 2-3g NaCl Pha höõu cô LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 29  Xaùc ñònh ñoä thu hoài cuûa Carbaryl, Dimethoate cuûa caûi baép khi boå sung tröïc tieáp dung dòch chuaån leân rau: Vôùi moãi chaát ta seõ chuaån bò 4 maãu rau 100g trong ñoù: - Maàu 1 khoâng boå sung gì caû - Maãu 2 boå sung 2,5 ml dung dòch chuaån 100 ppm - Maãu 3 boå sung 5 ml dung dòch chuaån 100 ppm - Maãu 4 boå sung 10 ml dung dòch chuaån 100 ppm Sau ñoù tieán haønh trích maãu theo quy trình ñaõ choïn. Phaân tích baèng HPLC nhö ñaõ moâ taû phaàn tröôùc. Xaùc ñònh dieän tích peak caùc maãu khoâng boå sung vaø coù boå sung Carbaryl, Dimethoate treân rau nhö treân, ñoàng thôøi ño maãu Carbaryl, Dimethoate trong nöôùc ôû noàng ñoä töông ñöông vôùi löôïng chaát chuaån boå sung sau khi ñaõ ñònh möùc ñeå ñem phaân tích treân maùy HPLC. Ñoä thu hoài maãu H(%) ôû moãi noàng ñoä boå sung ñöôïc tính: (Xb [Coâng thöùc 2] Vôùi Xb: dieän tích peak trung bình caùc laàn ño cuûa maãu coù boå sung theâm chaån X: dieän tích peak trung bình caùc laàn ño cuûa maãu khoâng boå sung Xchuan: dieän tích peak trung bình caùc laàn ño cuûa caùc chuaån töông öùng noàng ñoä ñaõ boå sung.  Xaùc ñònh ñoä thu hoài maãu Carbaryl, Dimethoate khi boå sung vaøo dòch caûi baép sau khi ñaõ loïc baõ: Ñoái vôùi moãi chaát khaûo saùt ta cuõng tieán haønh chuaån bò 4 maãu rau caûi baép, moãi maãu 100g. Moãi maãu cuõng ñöôïc trích ly 2 baäc cho caû baõ vaø taùch pha. Nhöng trong thí nghieäm naøy ta khoâng boå sung dung dòch chuaån Carbaryl, Dimethoate vaøo trong rau maø boå sung vaøo dòch qua loïc chaân khoâng sau khi ñaõ trích 2 laàn treân rau. Nhö vaäy ñoä thu hoà löôïng chaát chuaån theâm vaøo trong thí nghieäm naøy so saùnh vôùi ñoä thu hoài khi phun chaát chuaån tröïc tieáp leân rau trong thí nghieäm treân seõ cho ta thaáy söï maát maùt löôïng chaát vaãn coøn naèm trong baõ vaø söï toån thaát qua khaâu loïc chaân khoâng. Tieán haønh trích ly 8 maãu caûi baép, moãi maãu 100g thöïc hieän theo quy trình treân nhöng ôû khaâu dòch loïc tröôùc khi khuaáy töø 1 seõ coù 6 maãu ñöôïc boå sung caùc löôïng töông öùng 2,5; 5; 10 ml dung dòch chuaån 100 ppm cho moãi chaát Carbaryl, Dimethoate, 2 maãu H(%) = X XX chuan b )(  100 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 30 coøn laïi khoâng boå sung gì theâm. Trong quaù trình laáy maãu, caùc maãu boå sung cuøng moät chaát vaø maãu traéng ñoái chöùng phaûi laáy cuøng moät traùi caûi baép ñeå traùnh sai soá. Phaân tích treân maùy HPLC moãi maãu 3 laàn, laáy keát quûa dieän tích peak trung bình ño ñöôïc. 3.8. ÖÙng duïng quy trình phaân tích Carbaryl ñeå khaûo saùt söï phaân huûy Carbaryl trong caûi baép sau khi chieáu xaï lieàu thaáp. Vôùi quy trình phaân tích Carbaryl ñaõ ñöôïc khaûo saùt vaø choïn nhö treân, chuùng toâi thöïc hieän trích ly caùc maãu caûi baép coù boå sung theâm 5 ppm Carbaryl ñaõ ñöôïc xöû lyù chieáu xaï ôû caùc lieàu chieáu 0,2 ; 0,4; 0,6; 0,8; 1 KGy. Ñeå xem xeùt söï aûnh höôûng cuûa chieáu xaï ñeán löôïng Carbaryl trong caûi baép laø nhö theá naøo. Xöû lyù maãu rau ñem ñi chieáu xaï: ÖÙng vôùi moãi lieàu chieáu xaï chuùng toâi duøng nguyeân traùi caûi baép taåm vaøo moät löôïng dung dòch chuaån Carbaryl vôùi haøm löôïng 5 ppm töông öùng vôùi boå sung löôïng 5 mg Carbaryl vaøo 1kg caûi baép. Sau khi taåm theâm Carbaryl vaøo maãu caûi baép ñöôïc ñeå qua ñeâm trong ngaên maùt cuûa tuû laïnh. Chuaån bò theâm moät maãu caûi baép ñoái chöùng nghóa laø maãu naøy cuõng ñöôïc taåm theâm 5 ppm Carbaryl baûo quaûn trong ñieàu kieän gioáng caùc maãu treân nhöng khoâng ñem ñi chieáu xaï. Sau ñoù maãu ñöôïc gôûi ñi chieáu xaï ôû Vieän coâng ngheä haït nhaân Ñaø Laït. Maãu sau khi chieáu xaï xong tieán haønh laáy moãi maãu 100g ñem ñi trích ly Carbaryl vaø phaân tích treân HPLC. 3.9. Khaûo saùt hieäu suaát thu hoài cuûa quy trình trích ly Vitamin C trong caûi baép. 3.9.1. Quy trình trích ly Vitamin C trong caûi baép Döïa vaøo taøi lieäu tham khaûo “Giaùo trình phaân tích thöïc phaåm” [10], chuùng toâi xaây döïng quy trình trích ly Vitamin C nhö sau: Laáy maãu rau khoaûng 25g ñem xay trong trong dung dòch ñeäm KH2PO4 pH = 2,8 ñeå trích ly Vitamin C coù trong caûi baép. Sau ñoù tieán haønh loïc baèng heä thoáng loïc chaân khoâng. Dòch loïc thu ñöôïc ñöôïc ñònh möùc leân 100 ml, sau ñoù tieáp tuïc loïc qua maøng loïc 0,45 µm thu ñöôïc dòch chieát Vitamin C cho phaân tích. Dòch thu ñöôïc tieáp tuïc pha loaõng 10 laàn baèng dung dòch ñeäm. Sau ñoù tieán haønh phaân tích vôùi dòch ñaõ pha loaõng naøy treân maùy HPLC. Sô ñoà quy trình trích ly Vitamin C töø caûi baép nhö hình 3.3 (trang 31). 3.9.2. Khaûo saùt hieäu suaát trích ly ñoái vôùi quy trình trích ly Vitamin C trong caûi baép Ñeå coù theå tính ñöôïc hieäu suaát thu hoài ta phaûi theâm löôïng chaát chuaån bieát tröôùc haøm löôïng vaøo maãu caàn phaân tích vaø coù maãu traéng ñoái chöùng ñeå so saùnh. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 31 Caùch thöùc tieán haønh: ÔÛ ñaây chuùng toâi khaûo saùt hieäu suaát thu hoài chung cuûa caû quy trình trích vaø khaûo saùt söï maát maùt rieâng cuûa khaâu loïc baõ vaø cuûa baõ soùt laïi.  Khaûo saùt ñoä thu hoài cuûa caû quy trình trích ly Vitamin C trong caûi baép Chuaån bò maãu trích ly: laáy 4 maãu caûi baép cuøng töø moät traùi, moãi maãu caân 25g. Sau ñoù tieán haønh xöû lyù maãu nhö sau: - Maãu 1: khoâng boå theâm chuaån Vitamin C - Maåu 2: boå sung theâm 5ml dung dòch chuaån 1000 ppm Vitamin C vaøo rau - Maãu 3: boå sung theâm 10 ml dung dòch chuaån 1000 ppm Vitamin C vaøo rau - Maãu 4: boå sung theâm 15 ml dung dòch chuaån 1000 ppm Vitamin C vaøo rau. Hình 3.3: Quy trình trích ly Vitamin C 25g rau Xay Loïc chaân khoâng Ñònh möùc 100mL Sieâu loïc Dòch chieát Vitamin C 75 mL dd ñeäm LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 32 Tieán haønh trích ly caùc maãu ñaõ xöû lyù treân theo quy trình trích ly nhö muïc 3.9.1 thu ñöôïc dòch loïc chuaån bò cho phaân tích HPLC. Ñoàng thôøi cuõng pha loaõng töø dung dòch goác 1000 ppm thaønh caùc dung dòch coù noàng ñoä 5 ppm, 10 ppm, 15 ppm. Dòch loïc thu ñöôïc cuûa caùc maãu tieán haønh pha loaõng leân 10 laàn baèng caùch laáy moãi maãu dòch 1ml cho vaøo bình ñònh möùc 10 ml vaø ñònh möùc tôùi vaïch baèng dung dòch ñeäm pH =2,8. Ñaùnh sieâu aâm caùc maãu tröôùc khi phaân tích treân maùy. Ño maãu treân maùy HPLC. Moãi maãu ño laëp laïi 3 laàn, laáy giaù trò trung bình dieän tích peak ño ñöôïc.  Khaûo saùt söï maát maùt Vitamin C trong baõ vaø quaù trình loïc. Laáy 4 maãu caûi baép moãi maãu 50g töø cuøng moät traùi. Sau ñoù tieán haønh quy trình trích ly nhö muïc 3.9.1. Dòch loïc thu ñöôïc sau khi loïc chaân khoâng tieán haønh xöû lyù nhö sau: - Dòch loïc maãu 1: khoâng boå sung chuaån Vitamin C - Dòch loïc maãu 2: boå sung theâm 5 ml dung dòch chuaån Vitamin C - Dòch loïc maãu 3: boå sung theâm 10 ml dung dòch chuaån Vitamin C - Dòch loïc maãu 4: boå sung theâm 15 ml dung dòch chuaån Vitamin C. Tieáp tuïc quy trình trích vaø thu ñöôïc dòch trích sau sieâu loïc qua maøng 0,45 µm. Pha loaõng dòch trích moãi maãu leân 10 laàn, ñaùnh sieâu aâm taát caû caùc maãu vaø tieán haønh phaân tích treân maùy HPLC. Moãi maãu ño laëp laïi 3 laàn, laáy giaù trò trung bình dieän tích peak ño ñöôïc. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 33 Chöông 4: KEÁT QUAÛ VAØ BAØN LUAÄN 4.1. Kết quả khaûo saùt phoå haáp thu cuûa Carbaryl, Dimethoate, Vitamin C: 4.1.1. Phoå haáp thu UV cuûa Carbaryl trong nöôùc. Hình 4.1: Phoå haáp thu UV cuûa dung dòch Carbaryl trong nöôùc Döïa vaøo ñoà thò phoå haáp thu UV cuûa Carbabyl ôû hình 4.1 ta thaáy Carbaryl coù 2 ñænh haáp phuï ôû böôùc soùng 220 vaø 280 nm. Nhöng ôû böôùc soùng 220 ñoä haáp thu ñaït ñöôïc cao hôn. So saùnh vôùi keát quaû cuûa naêm tröôùc keát quaû naøy hoaøn toaøn gioáng. Nhö vaäy coù theå choïn böôùc soùng 220 nm ñeå ñaët cheá ñoä cho daàu doø UV khi ño Carbabryl cuûa maùy HPLC. 4.1.2. Phoå haáp thu UV cuûa Dimethoate trong nöôùc. Hình 4.2: Phoå haáp thu UV cuûa dung dòch chuaån Dimethoate trong Axetonitril: nöôùc Phổ hấp thu của Dimethoat -0.5 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 200 220 240 260 280 Bước sóng (nm) Đ ộ h ấ p th u Phổ hấp thu của carbaryl 0 0.4 0.8 1.2 1.6 200 220 240 260 280 300 320 340 Bước sóng (nm) Đ ộ h ấ p th u LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 34 Phoå haáp thu cuûa Dimethoate ôû hình 4.2 thu được khi chỉnh pH của dung dịch Dimethoate ở pH = 6. Ñoà thò coù moät ñænh haáp thu ôû böôùc soùng 204 nm cho keát quaû phuø hôïp vôùi naêm tröôùc. Ñoàng thôøi chuùng toâi nhaän thaáy trong quaù trình ño quang phoå cuûa Dimethoate trong nöôùc coù söï aûnh höôûng lôùn cuûa pH dung dòch. Khi chænh pH cuûa dung dòch Dimethoate ôû giaù trò 9 – 10, chuùng toâi thaáy phoå haáp thu khoâng coù ñænh haáp thu cöïc ñaïi vaø hình daïng ñöôøng phoå dao ñoäng zích zaéc. Ñieàu naøy coù theå giaûi thích laø ôû moäi tröôøng pH = 9 -10 mang tính kieàm thì Dimethoate khoâng oån ñònh vaø bò phaân huûy nhanh laøm cho giaù trò ñoä haáp thu khi ño dao ñoäng nhieàu. 4.1.3. Phoå haáp thu UV cuûa Vitamin C trong ñeäm: Phoå queùt ñöôïc cho thaáy ñænh haáp thu cöc ñaïi cuûa Vitamin C ôû 245 nm, keát quaû naøy hoaøn toaøn phuø hôïp vôùi taøi lieäu phaân tích Vitamin C cuûa boä moân. Nhö vaäy luaän vaên naøy cuõng ñaët giaù trò böôùc soùng ñaàu doø UV cuûa maùy HPLC laø 245 nm khi ño viamin C trong suoát luaän vaên. 4.2. Keát quaû khaûo saùt pha ñoäng ñoái vôùi Carbaryl vaø Dimethoate 4.2.1. Keát quaû khaûo saùt pha ñoäng cuûa Carbaryl: Keát quaû veà dieän tích peak vaø thôøi gian löu khi khaûo saùt caùc pha ñoäng khaùc nhau cho thaáy khi taêng daàn löôïng Axetonitril leân thì dieän tích peak taêng theo vaø thôøi gian löu giaûm daàn.Ñieàu ñoù chöùng toû tæ leä Axetonitril caøng lôùn thì khaû naêng röûa giaûi cuûa pha ñoäng caøng cao.Vì Axetonitril laø dung moâi phaân cöïc duøng ñeå röûa giaûi coät pha ñaûo trong phaân tích caùc chaát coù ñoä phaân cöïc trung bình ñeán maïnh. Luaän vaên naøy khaûo saùt khaû naêng röûa giaûi cuûa caùc pha ñoäng vaø töø ñoù choïn ra pha ñoäng phuø hôïp ñeå tieáp tuïc khaûo saùt Carbaryl trong caùc phaàn sau luaän vaên. Phổ Vitamin C trong dung dịch đệm -0.1 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 210 240 270 300 330 360 390 Bước sóng (nm) Đ ộ hấ p th u Hình 4.3: Phoà haáp thu UV dung dòch Vitamin C trong ñeäm LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 35 Baûng 4.1: Dieän tích peak vaø thôøi gian löu cuûa Carbaryl ôû caùc pha ñoäng Heä pha ñoäng Thôøi gian löu trung bình, phuùt Dieän tích peak trung bình 40/60 11,374 ± 0.038 1270426 ± 60726 55/45 6,291 ± 0.084 1507740,7 ± 7791 70/30 5,502 ± 0,166 1775789,7 ±18823 85/15 3,359 ± 0.806 2016552 ± 52632 Ñeå choïn ñöôïc moät pha ñoäng chaïy HPLC ta khoâng chæ döïa vaøo khaû naêng röûa giaûi cao maø coøn phaûi xem xeùt veà thôøi gian löu phuø hôïp.Vaø coøn tính ñeán vieäc tieát kieäm dung moâi söû duïng vì dung moâi chaïy HPLC laø dung moâi coù chí phí ñaét. Thôøi gian löu choïn phaûi laøm sao khoâng quaù daøi ñeå ruùt ngaén thôøi gian phaân tích cuõng nhö khoâng quaù ngaén vì thôøi gian löu ngaén deã truøng vôùi peak dung moâi ra, luùc ñoù dieän tích peak ño ñöôïc seõ khoâng chính xaùc. Döïa treân Baûng 4.1 ôû treân ta thaáy pha ñoäng vôùi tæ leä Axetonitril : nöôùc laø 55/45 laø coù theå chaáp nhaän ñöôïc. Neáu taêng tæ leä naøy leân 70/30 thì thôøi gian löu giaûm xuoáng khoâng ñaùng keå maø laïi taêng leân moät löôïng khoâng ít dung moâi neân choïn pha ñoäng naøy khoâng kinh teá laém. 4.2.2. Keát quaû khaûo saùt aûnh höôûng thaønh phaàn pha ñoäng phaân tích Dimethoate Baûng 4.2: Dieän tích vaø thôøi gian löu cuûa Dimethoate ôû caùc pha ñoäng Heä pha ñoäng Thôøi gian löu trung bình, phuùt Dieän tích peak trung bình 40/60 6,549 ± 0,100 184982,3 ± 961,9 55/45 3,973 ± 0,063 219896 ± 7476 70/30 3,654 ± 0,048 342067,7 ± 15324 85/15 2,971 ± 0,004 364542 ± 17498 Töông töï khaûo saùt pha ñoäng cuûa Carbaryl, ñoái vôùi Dimethoate ta cuõng tieán haønh khaûo saùt ñeå choïn ra pha ñoäng phuø hôïp nhaát. Döïa treân Baûng 4.2 ta thaáy Dimethoate cuõng vaäy khi taêng tæ leä cuûa Axetonitril thì thôøi gian löu giaûm ñoàng thôøi dieän tích peak LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 36 taêng leân. ÔÛ pha ñoäng tæ leä 70/30 vaø 85/15 dieän tích peak khaù cao so vôùi tæ leä 55/45 vaø 40/60. Nhöng ôû pha ñoäng 55/45 cho saéc kyù ñoà coù hình daïng caân ñoái hôn so vôùi caùc pha ñoäng khaùc. Chuùng toâi thaáy pha ñoäng 55/45 cho thôøi gian löu vaø dieän tích peak töông ñoái trung bình giöõa caùc pha ñoäng. Vì luaän vaên naøy ñoàng thôøi khaûo saùt ñoái vôùi hai chaát neân chuùng toâi choïn pha ñoäng chaïy Dimethoate cuõng laø 55/45 ñeå tieän vieäc phaân tích ñoàng thôøi cho hai chaát. Muïc ñích laø tieát kieäm thôøi gian khi chuyeån töø phaân tích chaát naøy sang chaát kia vì thôøi gian thay pha ñoäng ñeå phaân tích moät chaát raát laâu môùi coù theå phaân tích oån ñònh. 4.3. Keát quaû xaây döïng ñöôøng chuaån Carbaryl, Dimethoate, Vitamin C 4.3.1. Ñöôøng chuaån cuûa carabryl trong dung dòch nöôùc: Pha ñoäng cho phaân tích Carbaryl vaø Dimethoate duøng laø Axetonitril: nöôùc theo tæ leä 55/45. Hình 4.4: Saéc kyù ñoà ño chuaån Carbaryl ôû noàng ñoä 10 ppm (a) vaø 5 ppm (b) Hình 4.5: Đường chuẩn phaân tích Carbaryl trong nước y = 185795x R2 = 0,9932 0 1000000 2000000 3000000 4000000 0 5 10 15 20 25 Noàng ñoä Carbaryl, ppm 6.297 6,198 ( a) (b) Dieän tích peak LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 37 Keát quaû ño caùc maãu chuaån cuûa Carbaryl ôû caùc noàng ñoä cho dieän tích peak vaø thôøi gian löu coù ñoä laëp laïi toát, vôùi ñoä leäch chuaån chaáp nhaän ñöôïc cho sai soá thöïc nghieäm < 5%. Ñöôøng chuaån xaây döïng cho khoaûng noàng ñoä töø 1 ppm ñeán 20 ppm coù ñoä tuyeán tính cao vôùi heä soá töông quan R = 0,996. 4.3.2. Ñöôøng chuaån Dimethoate trong dung dòch nöôùc: Töông töï Carbaryl, ñoái vôùi Dimthoate keát quaû thu ñöôïc cuõng coù ñoä laëp laïi cao giöõa caùc laàn ño. Ñöôøng chuaån trong khoaûng noàng ñoä ño töø 1ppm ñeán 20 ppm coù ñoä tuyeán tính cao R = 0,997. ÔÛ ñaây ta thaáy thôøi gian löu cuûa Dimethoate khoaûng gaàn 4 phuùt ngaén hôn so vôùi thôøi gian löu cuûa Carbaryl laø hôn 6 phuùt coù theå giaûi thích ñöôïc laø do ñoä phaân cöïc cuûa Dimethoate lôùn hôn so vôùi ñoä phaân cöïc cuûa Carbaryl. Vì vaäy pha ñoäng seõ loâi keùo Dimthoate ra nhanh hôn so vôùi Carbaryl. Hình 4.6: Saéc kyù ñoà ño chuaån Dimethoate ôû noàng ñoä 5 ppm (a) vaø 1 ppm (b) Hình 4.7: Ñöôøng chuaån phaân tích Dimethoate trong dung dòch Axetonitril: nöôùc y = 16006x R2 = 0,995 0 100000 200000 300000 400000 0 5 10 15 20 25 Noàng ñoä Dimethoat, ppm 3,937 3,968 (a) (b) Dieän tích peak LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 38 4.3.3. Ñöôøng chuaån dung dòch Vitamin C trong ñeäm: Keát quaû ñöôøng chuaån cuûa Vitamin C trong khoaûng noàng ñoä ño töø 1 ppm ñeán 20 ppm nhö hình 4.7. Sai soá giöõa caùc laàn ño < 5 % laø chaáp nhaän ñöôïc, heä soá tuyeán tính cuûa ñöôøng chuaån cao R = 0,997. Hình 4.8: Saéc kyù ñoà ño chuaån Vitamin C 1ppm vaø 2 ppm Hình 4.9: Ñöôøng chuaån Vitamin C trong dung dòch ñeäm  Ngöôõng ñònh löôïng cuûa maùy HPLC Do haïn cheá cuûa phaàn meàm öùng duïng ghi vaø xöû lyù soá lieäu neân khoâng theå tính ñöôïc giaù trò lyù thuyeát cuûa ngöôõng phaùt hieän (LOD) vaø ngöôõng ñònh löôïng (LOQ). Giôùi haïn ñònh löôïng (LOQ) cuûa qui trình phaân tích cho ba chaát treân ñöôïc xaùc ñònh qua thöïc nghieäm baèng caùch ño caùc maãu chuaån coù noàng ñoä thaáp. Thöïc nghieäm cho thaáy keát quaû ño oån ñònh vaø coù ñoä laëp laïi toát (caû dieän tích peak laãn thôøi gian löu) ôû noàng ñoä 0,1ppm ñoái vôùi Dimethoate. Coù theå laáy ñaây laø ngöôõng ñònh löôïng cuûa Dimethoate. Döïa vaøo heä soá goùc cuûa ñöôøng chuaån cuûa 3 chaát, chuùng toâi thaáy ñoä nhaïy cuûa maùy ñoái vôùi Carbaryl laø lôùn nhaát roài tôùi Vitamin C vaø Dimethoate. Nhö vaäy döïa vaøo tæ soá heä soá goùc ñöôøng y = 29352x R 2 = 0,9957 0 100000 200000 300000 400000 500000 0 5 10 15 20 25 Noàng ñoä Vitamin C, ppm Dieän tích peak 2,397 2,397 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 39 chuaån vaø ngöôõng ñònh löôïng cuûa Dimethoate laø 0,1 ppm, chuùng toâi suy ra ñöôïc ngöôõng ñònh löôïng cuûa Vitamin C laø 0,05 ppm vaø Carbaryl laø 0,008 ppm. 4.3. Keát quaû ñoä thu hoài maãu Carbaryl, Dimthoate vaø Vitamin C: 4.3.1. Ñoä thu hoài maãu Dimethoate qua coät: Phaân tích caùc maãu Dimethoate coù noàng ñoä 1 – 20ppm laëp laïi 3 laàn, laáy giaù trò trung bình cuûa dieän tích peak vaø thôøi gian löu. Sau ñoù cuõng tieáp tuïc phaân tích caùc maãu naøy nhöng ñeå doøng pha ñoäng daãn maãu thaúng tôùí ñaàu doø, khoâng qua coät phaân tích. Laáy giaù trò trung bình cuûa dieän tích peak maãu khoâng qua coät. Tæ soá giöõa dieän tích peak cuûa maãu qua coät vaø maãu khoâng qua coät noàng ñoä töông öùng laø ñoä thu hoài maãu qua coät. Ta coù baûng sau: Baûng 4.3: Ñoä thu hoài qua coät cuûa Dimethoate: Maãu qua coät Maãu khoâng qua coät Ñoä thu hoài maãu qua coät, % Noàng ñoä maãu, ppm Dieän tích peak RSD% Dieän tích peak RSD% 1 34538,3 2,48 107228 4,31 32,21 ± 1,57 2 61590,5 3,68 151350 3,24 40,69 ± 1,99 5 163449,5 4,12 253129,8 4,2 64,57 ± 3,74 10 211424,5 3,84 323055,3 3,09 65,45 ± 3,2 20 463938,3 1,51 584562 3,4 79,36 ± 2,93 Tính ñoä thu hoài theo coâng thöùc 1 muïc 3.6, ta thaáy ñoä thu hoài maãu qua coät cuûa Dimethoate taêng leân khi taêng noàng ñoä maãu. Ñieàu naøy coù theå giaûi thích laø do ôû noàng ñoä thaáp moät löôïng nhoû Dimethoate bò giöõ laïi cuõng laøm aûnh höôûng ñaùng keå ñeán keát quaû. Nhìn chung thì keát quaû ñoä thu hoài maãu cuõng töông ñoái cao, chöùng toû heä pha ñoäng röûa giaûi Dimethoate khaù toát. 4.3.2. Ñoä thu hoài qua coät cuûa Carbaryl: Tieán haønh töông töï nhö ñoái vôùi Dimethoate ta coù baûng sau: LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 40 Baûng 4.4: Ñoä thu hoài qua coät cuûa Carbaryl Maãu qua coät Maãu khoâng qua coät Ñoä thu hoài maãu qua coät, % Noàng ñoä maãu, ppm Dieän tích peak RSD% Dieän tích peak RSD% 1 195813,5 4,69 236675 1,55 82,74 ± 4,07 2 313848,8 1,44 372470,8 1,27 84,26 ± 1,61 5 750989,5 3,9 788714,8 1,42 95,22 ± 3,95 10 1512305 0,74 1543244 0,72 98,00 ± 1,00 Ñoä thu hoài maãu qua coät cuûa Carbaryl cao hôn raát nhieàu so vôùi caùc maãu Dimethoate, ñieàu naøy chöùng toû heä pha ñoäng Axetonitril/ nöôùc vôùi thaønh phaàn 55/45 röûa giaûi Carbaryl ra khoûi coät toát hôn nhieàu so vôùi röûa giaûi Dimethoate. Tuy nhieân ñeå thuaän tieän trong quaù trình thí nghieäm, taïo söï oån ñònh cho coät phaân tích, trong luaän vaên naøy chæ duøng moät heä pha ñoäng 55/45 ñeå phaân tích caû 2 chaát. 4.3.3.Ñoä thu hoài qua coät cuûa Vitamin C: Döïa vaøo keát quaû treân baûng 4.5 ta thaáy ñoä thu hoài qua coät cuûa Vitamin C khaù cao, taêng daàn khi noàng ñoä maãu taêng. Baûng 4.5: Ñoä thu hoài qua coät cuûa Vitamin C Maãu qua coät Maãu khoâng qua coät Ñoä thu hoài maãu qua coät, % Noàng ñoä maãu, ppm Dieän tích peak RSD% Dieän tích peak RSD% 1 30427 1,56 35170 2,34 86,51 ± 2,43 2 57752 4,78 65252 4,17 88,51 ± 5,57 5 143544 5,01 157669 1,34 91,04 ± 4,71 10 281456 4,3 302972 2,45 92,9 ± 4,58 20 559646 1,45 598297 4,3 93,54 ± 4,23 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 41 4.4. Keát quaû khaûo saùt hieäu suaát trích ly dòch Carbaryl vaø Dimethoate trong nöôùc qua caùc baäc trích ly. Theo taøi lieäu luaän vaên naêm tröôùc quaù trình trích ly chæ tieán haønh moät baäc vaø löôïng maãu xöû lyù nhoû neân hieäu suaát thu hoài töø rau caûi baép cuûa quaù chæ ñaït 70,38% ñoái vôùi Carbaryl vaø 82% ñoái vôùi Dimethoate. Vì vaäy chuùng toâi tieán haønh khaûo saùt theâm soá baäc trích ly ñeå ñaït ñöôïc hieäu suaát thu hoài maãu cao hôn. Tröôùc heát chuùng toâi khaûo saùt treân dung dòch chuaån trong nöôùc cuûa hai chaát Carbaryl vaø Dimethoate ñeå xem soá baäc trích ly thöïc söï yù nghóa laø bao nhieâu. Sau khi taùch pha ta thu ñöôïc pha höõu cô vaø pha nöôùc. Pha höõu cô tieáp tuïc ñöôïc xöû lyù nhö laàn 1, thu ñöôïc dòch 1 ñem ñi phaân tích. Coøn pha nöôùc laïi tieáp tuïc cho Axeton vaøo, qua caùc quaù trình nhö tröôùc ta thu ñöôïc dòch 2 ñem ñi phaân tích. Tieáp tuïc taùch pha ôû laàn 2 vaø laøm nhö laàn 1 ñöôïc dòch 3. ÔÛ 2 laàn xöû lyù sau, dòch ñöôïc ñònh möùc 10mL. moãi maãu phaân tích 3 laàn, laáy giaù trò trung bình cuûa dieän tích peak vaø thôøi gian löu, ta thu ñöôïc baûng sau: Baûng 4.6: Keát quaû khaûo saùt caùc baäc trích ly Dimethoate Baäc trích ly Dieän tích peak RSD% Soá baäc trích ly Ñoä thu hoài maãu (%) 1 (ñònh möùc 25mL) 2 (ñònh möùc 10mL) 3 (ñònh möùc 10mL) 290692,6 11318,3 1248 1,08 3,93 4,52 1 2 3 90,81 ± 1,98 92,22 ± 4,14 92,38 ± 5,81 Töø keát quaû dieän tích peak caùc maãu ño ñöôïc naøy ta tính ñöôïc ñoä thu hoài maãu qua caùc baäc trích ly töông öùng. Ñoái vôùi trích ly moät baäc thì ñoä thu hoài maãu ñaït ñöôïc khaù cao, khoaûng 90,81%. khi taêng theâm moät baäc trích ly thì ñoä thu hoài taêng leân laø 92,22%, coøn khi taêng leân 3 baäc thì ñoä thu hoài taêng leân khoâng ñaùng keå. Do ñoù ñeå tieát kieäm thôøi gian vaø dung moâi, ta seõ tieán haønh trích ly 2 baäc. Töông töï ta coù keát quaû ñoái vôùi Carbaryl nhö baûng 4.7 sau: Baûng 4.7: Keát quaû khaûo saùt caùc baäc trích ly Carbaryl Baäc trích ly Dieän tích peak RSD (%) Soá baäc trích Ñoä thu hoài maãu (%) 1 (ñònh möùc 25 ml) 2 (ñònh möùc 10 ml) 3 (ñònh möùc 10 ml) 3383912 280926 138435 0,18 2,09 1,18 1 2 3 90,05 ± 3,22 94,09 ± 3,89 95,58 ± 4,11 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 42 Ñoái vôùi carabryl chuùng toâi cuõng choïn 2 baäc trích ly vì keát quaû cho thaáy ôû baäc thöù 3 ñoä thu hoài maãu taêng leân khoâng ñaùng keå maø laïi toán theâm thôøi gian vaø dung moâi ñeå thöïc hieän. Töø keát quaû naøy chuùng toâi ñöa ra ñöôïc quy trình trích ly 2 baäc cho Carbaryl vaø Dimethoate trong caûi baép nhö hình 4.10 sau: (trang 43) 4.5. Keát quaû khaûo saùt ñoä thu hoài maãu cuûa quy trình trích ly Carbaryl vaø Dimethoate treân maãu caûi baép: 4.5.1. Keát quaû ñoä thu hoài Carbaryl cuûa caûi baép  Ñoä thu hoài maãu cuûa Carbaryl boå sung leân rau vaø ñeå qua ñeâm: Caùc maãu sau khi ñöôïc trích ly ñem ñi phaân tích moãi maãu ít nhaát 3 laàn, keát quaû thu ñöôïc ôû baûng sau: Baûng 4.8: Keát quaû ño maãu xaùc ñònh ñoä thu hoài cuûa Carbaryl Maãu Dieän tích peak RSD (%) Maãu traéng 40 706 2,78 Boå sung 2,5 ml 381443 5.03 Boå sung 5 ml 865077 4,89 Boå sung 10 ml 1702964 5,01 Chuaån 2,5 ml 398339 2,07 Chuaån 5 ml 897271 1,96 Chuaån 10 ml 1759452 1,50 Töø keát quaû naøy chuùng toâi tieán haønh tính ñoä thu hoài maãu cuûa quy trình phaân tích theo coâng thöùc 2 ôû muïc 3.7.3 ñöôïc keát quaû sau: Maãu Ñoä thu hoài (%) Boå sung 2,5 ml 85,53 Boå sung 5 ml 91,87 Boå sung 10 ml 94,6 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 43 Khuaáy töø 125 – 27g NaCl 100g Caûi baép Xay200mL Axeton Taùch pha 1 50ml Axeton Laéc 50mL Axeton Dòch phaân tích Ñònh möùc 100mL 25mL Axetonitril Traùng bình Pha höõu cô Pha nöôùc Coâ quay chaân khoâng Sieâu aâm Sieâu loïc Pha nöôùc Khuaáy töø 2 Taùch pha 2 Pha höõu cô Hình 4.10: Quy trình trích ly caûi baép Loïc 1 Laéc Loïc 2 Baõ LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 44  Ñoä thu hoài maãu carabryl khi boå sung theâm carabryl vaøo dòch trích rau: Khaùc vôùi vieäc boå sung theâm carabryl vaøo rau nhö ôû treân, thí nghieäm naøy chuùng toâi boå sung theâm Carbaryl vaøo ngay dòch trích sau qua trình loïc baõ ñeå khaûo saùt xem löïong Carbaryl bò maát maùt trong giai ñoaïn loïc vaø coøn soùt trong baõ laø bao nhieâu. Baûng 4.9: Keát quaû ño maãu xaùc ñònh ñoä thu hoài Carbaryl theâm vaøo dòch Maãu Dieän tích peak RSD (%) Maãu traéng 43134 1,08 Boå sung 2,5 ml 399139 4,60 Boå sung 5 ml 900240 3,67 Boå sung 10 ml 1765974 5,10 Chuaån 2,5 ml 398339 2,07 Chuaån 5 ml 897271 1,96 Chuaån 10 ml 1759452 1,50 Keát quaû töø baûng treân chuùng toâi tính ñöôïc ñoä thu hoài maãu ra keát quaû nhö sau: Maãu Ñoä thu hoài (%) Boå sung 2,5 ml 89,17 ± 4,5 Boå sung 5 ml 92,2 ± 3,87 Boå sung 10 ml 95,5 ± 5,15 4.5.2. Keát quaû ñoä thu hoài Dimethoate cuûa caûi baép:  Ñoä thu hoài maãu cuûa Dimethoate boå sung leân rau vaø ñeå qua ñeâm Caùc maãu caûi baép ñöôïc boå sung theâm löôïng dung dòch chuaån sau khi tieán haønh trích ly, tieán haønh ñem phaân tích moãi maãu ít nhaát 3 laàn, keát quaû thu ñöôïc ôû baûng sau 4.10: (trang 45) LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 45 Baûng 4.10: Keát quaû ño maãu xaùc ñònh ñoä thu hoài cuûa Dimethoate Maãu Dieän tích peak RSD (%) Maãu traéng 26518 3,01 Boå sung 2,5 ml 99846 4,01 Boå sung 5 ml 128588 3,90 Boå sung 10 ml 220272 4,10 Chuaån 2,5 ml 51205 1,04 Chuaån 5 ml 84256 1,17 Chuaån 10 ml 186593 1,50 Ñoä thu hoài tính töø keát quaû thu ñöôïc ôû treân nhö sau: Maãu Ñoä thu hoài (%) Boå sung 2,5 ml 84,61 ± 4,31 Boå sung 5 ml 85,65 ± 4,28 Boå sung 10 ml 87,76 ± 4,65  Ñoä thu hoài maãu carabryl khi boå sung theâm Dimethoate vaøo dòch trích rau Caùc maãu ñem ño treân maùy HPLC thu ñöôïc keát quaû: Baûng 4.11: Keát quaû ño maãu Dimethoate boå sung vaøo dòch sau loïc Maãu Dieän tích peak RSD(%) Maãu traéng 24991 3.12 Boå sung 2,5 ml 68754 4,12 Boå sung 5 ml 101639 2.56 Boå sung 10 ml 195660 3,56 Chuaån 2,5 ml 51205 1,04 Chuaån 5 ml 84256 1,17 Chuaån 10 ml 186593 1,50 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 46 Ñoä thu hoài tính theo coâng thöùc 2 ôû muïc 3.7.3, töø soá lieäu cuûa baûng treân cho keát quaû sau: Maãu Ñoä thu hoài(%) Boå sung 2,5 ml 85 ± 4,42 Boå sung 5 ml 90,9 ± 3,72 Boå sung 10 ml 91,46 ± 4,48 Nhö vaäy keát quaû ñoä thu hoài maãu cuûa quy trình trích ly töông ñoái cao, ñoái vôùi Carbaryl töø 85,53% ñeán 94,6% vaø ñoái vôùi Dimethoate töø 84,61% ñeán 87,76%. So vôùi keát quaû cuûa naêm tröôùc thì keát quaû naøy töông ñoái cao. Ñoä thu hoài cuûa Carabryl cao hôn cuûa Dimethoate nhöng khoâng quaù lôùn. Ñieàu ñoù cho thaáy quy trình phaân tích löïa choïn coù khaû naêng phaân tích khaù toát haøm löôïng Carbaryl cuõng nhö Dimethoate trong caûi baép. Ngoaøi ra keát quaû ñoä thu hoài cuûa maãu boå sung theâm vaøo dòch coøn cho chuùng ta thaáy raèng giai ñoaïn loïc baõ laøm maát maùt moät löôïng ñeán khoaûng 3,64 % ñoái vôùi Carbaryl vaø khoaûng 5,25 % ñoái vôùi Dimethoate. Töø soá lieäu ño ñöôïc cuûa maãu traéng caûi baép ñoái vôùi Carbaryl vaø Dimethoate ta coù theå tính ra ñöôïc haøm löôïng thaät söï cuûa Carabryl vaø Dimethoate coù trong maåu rau ñaõ mua ngoaøi thò tröôøng.  Thieát laäp coâng thöùc tính haøm löôïng Carbaryl vaø Dimethoate coù trong rau: Ñoái vôùi quy trình phaân tích Carbaryl vaø Dimethoate ñaõ choïn, chuùng toâi ñaõ xaùc ñònh ñöôïc ñoä thu hoài maãu qua khaâu ño treân maùy HPLC vaø trong quaù trình trích ly Carbaryl vaø Dimethoate nhö ôû treân. Nhö vaäy khi coù moät maãu rau caûi baép, chuùng toâi tieán haønh trích nhö quy trình trích treân vaø phaân tích treân maùy HPLC keát quaû ra dieän tích peak cuûa chaát caàn ño. Töø soá lieäu dieän tích peak naøy, döïa vaøo ñöôøng chuaån moãi chaát vaø ñoä thu hoài qua töøng khaâu, chuùng toâi coù theå xaùc ñònh ñöôïc haøm löôïng chaát caàn phaân tích. Töø keát quaû ñoä thu hoài maãu qua coät baûng 4.3, 4.4 vaø ñoä thu hoài cuûa quy trình trích ly baûng 4.8, 4.10, keát quaû ñöôøng chuaån hình 4.4, 4.5, thieát laäp ñöôïc coâng thöùc sau: Ñoái vôùi Dimethoate: F m ppmX Smau  86 100 45,56 100 16006 100)( [Coâng thöùc 3] Ñoái vôùi Carbaryl: F m ppmX Smau  67,90 100 05,90 100 185795 100)( [Coâng thöùc 4] LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 47 Vôùi m: khoái löôïng maãu ñem phaân tích (g) F: Heä soá pha loaõng maãu tröôùc khi phaân tích treân maùy HPLC Smau: Dieän tích peak ño ñöôïc bôûi maùy HPLC Caùc giaù trò 56,45; 90,05 vaø 86; 90,67 laàn löôït laø ñoä thu hoài qua coät trung bình vaø ñoä thu hoài quy trình trích trung bình cuûa Dimethoate vaø Carbaryl. Caùc giaù trò 16006 vaø 185795 laàn löôït laø heä soá goùc ñöôøng chuaån cuûa dung dòch Dimethoate vaø Carbaryl.  Xaùc ñònh dö löôïng Carbaryl vaø Dimethoate coù trong caûi baép: Maãu caûi baép ño haøm löôïng Carbaryl coù dieän tích peak 43134 aùp duïng coâng thöùc 4 treân tính ñöôïc haøm löôïng laø 0,28 ppm. Nhö vaäy haøm löôïng naøy laø beù hôn so vôùi giaù trò giôùi haïn cho pheùp cuûa Carbaryl treân rau caûi baép laø 5 ppm. Töông töï ñoái vôùi dö löôïng cuûa Dimethoate, maãu ño coù dieän tích peak 36518 aùp duïng coâng thöùc 3 tính ñöôïc haøm löôïng Dimethoate coù tron caûi baép laø 4,7 ppm. Dö löôïng naøy vöôït möùc giôùi haïn cho pheùp cuûa Dimethoate treân caûi baép laø 2 ppm. Theo thoâng tin chuùng toâi bieát ñöôïc töø Trung taâm nghieân cöùu vaø phaùt trieån noâng döôïc VIPESCO thì hieän nay thuoác tröø saâu Carbaryl löôïng söû duïng ñaõ ít haún ñi. Nhöng Dimethoate thì vaãn coøn söû duïng phoå bieán. Nhö vaäy keát quaû phaân tích treân ñoái vôùi caûi baép laø phuø hôïp vôùi thoâng tin nhaän ñöôïc. 4.6. Keát quaû khaûo saùt söï phaân huûy Carbaryl döôùi taùc duïng cuûa chieáu xaï: ÖÙng duïng quy trình trích ly Carbaryl töø caûi baép vaøo phaân tích maãu caûi baép coù boå sung theâm 5 ppm Carbaryl ñem ñi chieáu xaï ôû caùc lieàu chieáu khaùc nhau ñeå xem xeùt khaû naêng phaân huûy carabryl trong dòch rau cuûa tia böùc xaï. Caùc maãu sau khi trích ly ñöôïc ñem phaân tích moãi maãu ít nhaát 3 laàn, laáy keát quaû dieän tích peak ño ñöôïc so saùnh vôùi dieän tích peak cuûa maãu caûi baép boå sung theâm 5 ppm laøm ñoái chöùng chuùng toâi ra ñöôïc hieäu suaát phaân huûy Carbaryl ôû caùc lieàu chieáu khaùc nhau. Keát quaû hieäu suaát phaân huûy Carbaryl theo caùc lieàu chieáu khaùc nhau ñöôïc theå hieän treân hình 4.11: (trang 48) LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 48 Hiệu suất phân hủy Carbaryl trên cải bắp 85.73 75.63 61.45 44.0837.75 0 20 40 60 80 100 1Liều chiếu (KGy) H iệ u su ất (% ) 1 KGy 0,8 KGy 0,6 Kgy 0,4 KGy 0,2 KGy Hình 4.11: Hieäu suaát phaân huûy treân caûi baép ôû caùc lieàu chieáu khaùc nhau Keát quaû treân cho thaáy khi taêng lieàu chieáu daàn töø 0,2 KGy leân tôùi 1 KGy thì khaû naêng phaân huûy cuûa carabryl caøng taêng,ñieàu naøy cuõng hôïp lyù vì khi taêng lieàu chieáu thì naêng löôïng cung caáp caøng taêng daãn ñeán möùc ñoä laøm phaân huûy Carbaryl cuõng taêng theo.Theo keát quaû ñoä thu hoài maãu cuûa Carbaryl qua quy trình trích ly laø töông ñoái cao nhö vaäy soá lieäu ño ñöôïc cuûa maãu rau caûi baép sau khi chieáu xaï coù theå tin caäy cao hôn.Nhö vaäy töø keát quaû naøy chuùng toâi thaáy vôùi lieàu chieáu ñeán 1KGy cuõng coù theå laøm giaûm löôïng Carbaryl ñeán 85,73 %, keát quaû naøy cho khaû naêng coù theå öùng duïng chieáu xaï ñeå laøm giaûm dö löôïng thuoác tröø saâu treân rau ñaûm baûo an toaøn veä sinh cho rau quaû tröôùc khi söû duïng. 4.7. Keát quaû khaûo saùt ñoä thu hoài cuûa quy trình trích Vitamin C töø caûi baép: 4.7.1. Ñoä thu hoài Vitamin C khi boå sung theâm chuaån vaøo rau: Vôùi quy trình trích nhö phaàn treân ñaõ giôùi thieäu, chuùng toâi tieán haønh trích ly caùc maãu caûi baép coù boå sung theâm chuaån Vitamin C, sau khi pha loaõng maãu ñem ño treân maùy saéc kyù thu ñöôïc keát quaû ôû baûng 4.12 sau: (trang 49) LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 49 Baûng 4.12: Keát quaû ño maãu boå sung Vitamin C Maãu Dieän tích peak RSD(%) Maãu traéng 71938 2,78 Boå sung 5 ml 189076 3,56 Boå sung 10 ml 312040 5.23 Boå sung 15 ml 453275 2,67 Chuaån 5 ml 141236 1,23 Chuaån 10 ml 282400 2,34 Chuaån 15 ml 423679 1,23 Töø baûng treân ta coù theå tính ñöôïc ñoä thu hoài cuûa Vitamin C cho keát quaû sau: Maãu Ñoä thu hoài(%) Boå sung 5 ml 82 ± 3,38 Boå sung 10ml 84,41 ± 5,31 Boå sung 15 ml 86,5 ± 3,49 Keát quaû ñoä thu hoài cuûa Vitamin C ñaït ñöôïc töø 82% ñeán 86,5% töông ñoái cao. So saùnh vôùi keát quaû ñaït ñöôïc cuûa naêm ngoaùi laø 89,5% thì keát quaû ño ñöôïc cuûa naêm nay coù thaáp hôn moät ít nhöng khoâng ñaùng keå. Coù theå laø do thao thaùc thí nghieäm, sai soá chuû quan do ngöôøi thöïc hieän. Vì Vitamin C laø moät chaát deã phaân huûy döôùi aùnh saùng neân thôøi gian sau khi trích ly xong ñeán khi phaân tích cuõng laøm aûnh höôûng lôùn ñeán haøm löôïng Vitamin C ño ñöôïc. Thôøi ñieåm tieán haønh trích ly vaø phaân tích cuõng aûnh höôûng ñeán keát quaû thu ñöôïc, thí nghieäm tieán haønh vaøo buoåi toái nhieät ñoä thaáp vaø ít aùnh saùng gaét thì Vitamin C cuõng ít phaân huûy hôn so vôùi tieán haønh thí nghieäm vaøo buoåi ban ngaøy nhaát laø buoåi tröa. Nhìn chung vôùi ñoä thu hoài maãu ñaït ñöôïc qua ñeà taøi nhö vaäy cho thaáy quy trình trích ly vaø phaân tích Vitamin C ñaõ choïn coù theå aùp duïng toát ñeå phaân tích Vitamin C trong rau vôùi ñoä tin vaäy cao. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 50 4.7.2. Ñoä thu hoài Vitamin C khi boå sung vaøo dòch rau: Ñoä thu hoài cuûa Vitamin C khi boå sung vaøo tröïc tieáp vaøo dòch rau so saùnh vôùi ñoä thu hoài cuûa Vitamin C khi boå sung treân rau seõ cho thaáy söï maát maùt vaø löôïng Vitamin C coøn soùt laïi trong baõ, caùc maãu rau sau khi boå sung Vitamin C vaøo dòch tieán haønh caùc giai ñoaïn tieáp theo thu ñöôïc dòch phaân tích, tieán haønh ño moãi maãu ít nhaát 3 laàn thu ñöôïc baûng: Baûng 4.13: Keát quaû ño maãu boå sung Vitamin C vaøo dòch Maãu Dieän tích peak RSD(%) Maãu traéng 72370 2,56 Boå sung 5 ml 190567 5,1 Boå sung 10 ml 317688 3,45 Boå sung 15 ml 460137 4,57 Chuaån 5 ml 141236 1,23 Chuaån 10 ml 282400 2,34 Chuaån 15 ml 423679 1,23 Ñoä thu hoài tính ñöôïc nhö sau: Maãu Ñoä thu hoài (%) Boå sung 5 ml 83,99 ± 4,87 Boå sung 10ml 86 ± 4,20 Boå sung 15 ml 88 ± 4,66 So saùnh 2 ñoä thu hoài ta thaáy giai ñoaïn loïc maãu vaø baõ cuõng laøm maát maùt moät löôïng Vitamin C khoaûng 1,5%. Töø keát quaû ño ñöôïc ôû maãu khoâng boå sung theâm Vitamin C ta coù theå tính ñöôïc haøm löôïng Vitamin C thöïc coù trong caûi baép trong maãu rau mua ngoaøi chôï ñeå phaân tích. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 51 Töông töï nhö thieát laäp coâng thöùc tính haøm löôïng Carbaryl vaø Dimethoate trong caûi baép, chuùng toâi cuõng laäp coâng thöùc tính haøm löôïng Vitamin C trong caûi baép nhö sau: F m ppmX Smau  3,84 100 5,90 100 29352 100)( [Coâng thöùc 5] Trong coâng thöùc giaù trò 90,5 vaø 84,3 laø giaù trò ñoä thu hoài qua coät trung bình vaø ñoä thu hoài quy trình trích Vitamin C trung bình. Vôùi dieän tích peak 72 370 ñoái vôùi maãu traéng caûi baép ño haøm löôïng Vitamin C, aùp duïng coâng thöùc 5 treân tính ñöôïc haøm löôïng Vitamin C coù trong caûi baép ñem phaân tích laø 129,2 ppm. So saùnh keát quaû naøy vôùi haøm löôïng Vitamin C coù trong caûi baép theo taøi lieäu tham khaûo [9] laø 300 ppm, cho thaáy haøm löôïng Vitamin C thöïc teá trong maãu ño ñöôïc thaáp hôn nhieàu. Coù nhieàu nguyeân nhaân daãn ñeán söï sai leäch lôùn naøy, theo chuùng toâi thöù nhaát coù theå laø do maãu rau caûi baép mua ngoaøi chôï veà phaân tích coù thôøi gian sau thu hoaïch laâu hôn so vôùi soá lieäu maø taøi lieäu tham khaûo coù neân theo thôøi gian baûo quaûn löôïng Vitamin C ñaõ bò toån thaát. Thöù hai trong quaù trính trích ly maãu cuõng bò maát maùt do thôøi gian phaân tích keùo daøi trong khi ño maãu. Thöù ba laø haøm löôïng Vitamin C coù trong maãu rau thì khoù trích ly ra hôn laø löôïng Vitamin C boã sung vaøo rau ñeå trích ly khi khaûo saùt ñoä thu hoài maãu. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 52 Chöông 5: KEÁT LUAÄN VAØ KIEÁN NGHÒ 5.1 Keát luaän: Keát quaû luaän vaên coù theå ñöôïc toùm taét nhö sau: 1. Ñaõ khaûo saùt ñöôïc phoå haáp thu cuûa Carbarayl, Dimethoate, Vitamin C trong vuøng böôùc soùng UV töø ñoù choïn ra ñöôïc böôùc soùng toái öu ñeå phaân tích caùc chaát treân treân thieát bò HPLC vôùi ñaàu doø UV- VIS. 2. Ñaõ khaûo saùt ñoä thu hoài cuûa Carbaryl, Dimethoate vaø Vitamin C khi qua coät HPLC. Keát quaû cho thaáy, ñoái vôùi Vitamin C vaø Carbaryl ñoä thu hoài töông ñoái cao khoaûng ñeán 93,54 vaø 98%. Rieâng ñoái vôùi Dimethoate do choïn pha ñoäng 55/45 neân ñoä thu hoài qua coät HPLC hôi thaáp hôn khoaûng tôùi 79,36%. 3. Ñaõ khaûo saùt ñöôïc quy trình phaân tích cho caû Carbaryl vaø Dimethoate vôùi soá baäc trích ly coù yù nghóa choïn laø 2 baäc. 4. Ñaõ khaûo saùt ñöôïc ñoä thu hoài maãu ñoái vôùi quy trình phaân tích Carbaryl, Dimethoate vaø Vitamin C. Keát quaû ñoä thu hoài maãu cuûa caùc chaát vôùi quy trình choïn phaân tích laø khaù cao töø 84,61% ñeán 95,5%. 5. Ñaõ aùp duïng quy trình trích ñeå ño haøm löôïng Carnaryl, Dimethoate vaø Vitamin C treân caùc maãu rau caûi baép mua ôû chôï. Keát quaû dö löôïng cuûa Carbaryl laø an toaøn döôùi möùc giôùi haïn cho pheùp. Dö löôïng cuûa Dimethoate thi cao hôn dö löôïng cho pheùp. Haøm löôïng Vitamin C ño ñöôïc treân rau thaáp hôn so vôùi giaù trò tham khaûo trong taøi lieäu. 6. Ñaõ aùp duïng quy trình phaân tích ñeå ñaùnh giaù aûnh höôûng cuûa chieáu xaï leân söï phaân huûy Carbaryl trong caûi baép. Keát quaû ñoä phaân huûy Carbaryl vôùi caùc lieàu chieáu < 1 KGy taêng daàn theo lieàu chieáu, vôùi lieàu chieáu 1 KGy xaùc ñònh ñoä phaân huûy cuûa Carbaryl laø 85,73 %. 5.2. Kieán nghò: Do thôøi gian vaø ñieàu kieän thöïc hieän luaän vaên coù haïn maø khoái löôïng ñoøi hoûi phaûi khaûo saùt khoâng ít neân ñeå cho thuaän lôïi vaø giaûm thôøi gian phaân tích, chuùng toâi ñaõ choïn cuøng pha ñoäng cho phaân tích caû 2 chaát Carbaryl vaø Dimethoate.Vì vaäy ñeå cho ñoä thu hoài qua coät ñoái vôùi Dimethoate cao hôn thì coù theå choïn pha ñoäng Axetonitril : nöôùc tæ leä 70/30 thay vì 55/45 nhö chuùng toâi ñaõ khaûo saùt. Dòch trích cuûa Carbaryl vaø Dimethoate ñem phaân tích treân maùy HPLC coøn chöùa nhieàu taïp chaát, coù theå laøm aûnh höôûng ñeán khaû naêng taùch cuûa pha ñoäng, saéc kyù ñoà ño ñöôïc khoâng ñöôïc ñeïp. Ñeå loaïi boû heát caùc taïp chaát cuûa dòch trích vaø laøm giaàu caáu töû caàn phaân tích chuùng toâi ñeà nghò dòch trích caàn phaûi ñöôïc laøm giaøu maãu qua quaù trình trích ly pha raén (SPE) ñeå keát quaû ño ñöôïc chính xaùc vaø ít bò aûnh höôûng cuûa neàn caùc chaát coù trong rau. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 53 TAØI LIEÄU THAM KHAÛO [1]. Ñaøo Vaên Hoaèng, Kyõ thuaät toång hôïp caùc hoùa chaát Baûo veä thöïc vaät. Nhaø xuaát baûn Khoa hoïc Kyõ thuaät, 2003. [2]. Phuøng Voõ Caåm Hoàng, Khaûo saùt dö löôïng Cypermethrin vaø Fenobucarb ôû caûi ngoït vaø ñaäu Cove taïi huyeän Hocmon vaø treân thò tröôøng Tp HCM. Luaän vaên thaïc só. Tröôøng Ñaïi hoïc Baùch khoa Tp HCM, 2003. [3]. Traàn Thò Ngoïc Linh, Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa chieáu xaï lieàu thaáp leân tính chaát caûm quan vaø haøm löôïng Vitamin C trong caûi xanh, caûi baép vaø döa leo. Luaän vaên toát nghieäp. Tröôøng Ñaïi hoïc Baùch khoa Tp HCM, 2007. [4]. Nguyeãn Traàn Oanh, Hoùa hoïc Baûo veä thöïc vaät. Nhaø xuaát baûn Noâng nghieäp, 1997. [5]. Löu Thò Thu Trang, Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa chieáu xaï lieàu thaáp leân dö löôïng Dimethoate trong caûi xanh, caûi baép, döa leo. Luaân vaên toát nghieäp, Tröôøng Ñaïi hoïc Baùch khoa Tp HCM, 2007. [6]. Traàn Thò Mai Traâm, Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa chieáu xaï lieàu thaáp leân dö löôïng Dimethoate trong caûi xanh, caûi baép, döa leo. Luaân vaên toát nghieäp, Tröôøng Ñaïi hoïc Baùch khoa Tp HCM, 2007. [7]. Buøi Caùch Tuyeán, Giaùo trình thuoác baûo veä thöïc vaät. Tröôøng Ñaïi hoïc Noâng laâm. Tp HCM, 1996. [8]. Nguyeãn Thò Thu Vaân, Phaân tích ñònh löôïng, Nhaø xuaát baûn Ñaïi hoïc quoác gia Tp.HCM, 2004. [9]. Traàn Khaéc Phi, Kyõ thuaät troàng rau saïch, Nhaø xuaát baûn Noâng nghieäp, 1997. [10]. Caùc taùc giaû. Giaùo trình thí nghieäp phaân tích thöïc phaåm – Phaàn 2. Tröôøng Ñaïi hoïc Baùch khoa Tp HCM. [11]. A Primer, HPLC for food analysis, Agilent Technologies, 1996 – 2001, 134 trang [12]. AOAC Official Method 967.21, Ascorbic Acid in Vitamin Preparations and Juices, 1968. [13].AOAC Official Method 964.18, Carbaryl Insectiside Residuses. Colorimetric Method, AOAC Official Method of Analysis, 1995. [14].AOAC Official Method 975.40, N-MethylCarbarmateInsectiside Residuses. Gas Chromatographic Method, AOAC Official Method of Analysis, 1995. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 54 [15]. 89132002000600003 [16]. [17]. [18]. AME [26] [19]. AME [27] [20].www.quynhluong.gov.vn [21]. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 55 PHUÏ LUÏC Baûng 1: Dieän tích peak vaø thôøi gian löu xaây döïng ñöôøng chuaån Carbaryl Noàng ñoä, ppm Thôøi gian löu , phuùt Thôøi gian löu trung bình, phuùt RSD, % Dieän tích peak Dieän tích peak trung bình RSD, % 6.313 357834 6.187 3642341 6.267 6.256 1.02 3409350 354334.3 3.40 6.333 408334 6.198 4189482 6.233 6.255 1.12 430958 419413.3 2.70 6.367 977156 6.297 9640265 6.187 6.284 1.44 957236 966139.3 1.05 6.363 1995450 6.198 196440110 6.313 6.291 1.34 1955700 1971850 1.06 6.385 3507441 6.288 376760720 6.288 6.320 0.89 3634308 3636452 3.58 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 56 Baûng 2: Dieän tích peak vaø thôøi gian löu xaây döïng ñöôøng chuaån Dimethoate Noàng ñoä, ppm Thôøi gian löu , phuùt Thôøi gian löu trung bình, phuùt RSD, % Dieän tích peak Dieän tích peak trung bình RSD, % 4.128 14363 3.987 154961 3.977 4.031 2.09 15521 15126.7 4.37 3.975 33184 4.038 361452 4.092 4.035 1.45 35945 35091.3 4.72 3.998 75348 4.212 756935 3.952 4.054 3.42 75968 75669.7 0.41 4 147474 3.945 14564410 4.02 3.988 0.97 142072 145063.3 1.89 4.143 319871 4.005 33120120 4.155 4.1 2.03 334231 328434.3 2.3 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 57 Baûng 3: Dieän tích peak vaø thôøi gian löu xaây döïng ñöôøng chuaån Vitamin C Noàng ñoä, ppm Thôøi gian löu , phuùt Thôøi gian löu trung bình, phuùt RSD, % Dieän tích peak Dieän tích peak trung bình RSD, % 2.397 42426 2.397 430721 2.397 2.397 0.00 42778 42758.7 0.76 2.408 78163 2.402 797142 2.402 2.404 0.14 79611 79162.7 1.10 2.407 161823 2.4 1601715 2.4 2.402 0.17 158997 160330.3 0.89 2.403 287161 2.402 28752810 2.402 2.402 0.02 287268 287319.0 0.07 2.407 582738 2.402 58595120 2.402 2.404 0.12 583404 584031.0 0.29 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 58 Maãu boå sung 5 ml Maãu traéng Maãu boå sung 10 ml Hình 1: Saéc kyù ñoà ño Vitanmin C Maãu boå sung 5 ml Maãu boå sung 2,5 ml Maãu boå sung 10 ml Maãu traéng Hình 2: Saéc kyù ñoà ño Carbaryl trong caûi baép 2,234 2,397 2,4 6,297 6,233 6,267 6,333 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 59 Maãu traéng Maãu boå sung 5 ml Maãu boå sung 2,5 ml Maãu boå sung 10 ml Hình 3: Saéc kyù ñoà ño Dimethoate trong caùc maãu caûi baép boå sung dung dòch chuaån Dimethoate Hình 4: Saéc kyù ñoà ñoä thu hoài qua coät cuûa Dimethoate 10 ppm Hình 5: Saéc kyù ñoà ñoä thu hoài qua coät cuûa Carbaryl 5 ppm 3,937 3,968 3,923,923 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 60 Hình 6: Saéc kyù ñoà ñoä thu hoài qua coät cuûa Vitamin C 10 ppm