Luận văn Quy trình phân tích hàm lượng Carbaryl, Dimethoate trong cải xanh bằng phương pháp HPLC
MỞ ĐẦU Dân số ngày càng gia tăng do đó nhu cầu về lương thực thực phẩm ngày càng đòi hỏi nhiều, cụ thể là các loại rau cung cấp trong các bữa ăn hằng ngày. Rau xanh không chỉ cung cấp một lượng lớn chất xơ, các sinh tố A, B, C mà còn cung cấp các nguyên tố vi lượng và đa lượng rất cần thiết trong cấu tạo tế bào. Rau xanh còn là một loại cây trồng có hiệu quả kinh tế cao, đồng thời cũng là mặt hàng xuất khẩu quan trọng của nhiều nước trên thế giới. Tuy nhiên thất thu hàng năm do các loài dịch hại gây ra cho nông nghiệp chiếm khoảng 35% sản lượng mùa màng (khoảng 75 tỷ đô la); trong đó thiệt hại do sâu là 13,8%; do bệnh cây là 11,6%; do cỏ dại là 9,5% (theo Cramer H.H., 1967). Nếu tính cho diện tích nông nghiệp toàn thế giới là 1,5 tỷ hecta không kể đồng cỏ và bãi hoang thì thiệt hại bình quân là 47-60 đô la trên một hecta. Để tránh thất thu, hiện nay có nhiều biện pháp được áp dụng để phòng trừ các loài dịch hại. Một trong các biện pháp đó là sử dụng thuốc bảo vệ thực vật. Bên cạnh những ưu điểm của thuốc bảo vệ thực vật như diệt dịch hại nhanh, có khả năng chặn đứng sự lan tràn phá hoại của sâu, bệnh, cho hiệu quả trực tiếp rõ rệt nó còn có một số nhược điểm, nếu sử dụng không đúng cách (phun quá liều hoặc phun gần ngày thu hoạch) đôi khi thuốc có thể gây độc cho thực vật hoăïc còn lưu trong nông sản và gây độc cho người, gia súc ăn phải, gây ô nhiễm môi trường [3] Theo thống kê, hàng năm ở miền Đông – Nam nước ta, tổng lượng thuốc bảo vệ thực vật sử dụng lên đến con số 1000 tấn, trong đó thuốc bảo vệ thực vật dùng trên rau rất lớn chiếm từ 50 – 80% tổng lượng thuốc dùng cho các loại cây trồng. Điều đó gây ra những mối nguy cho sức khỏe con người. Một số nơi xảy ra ngày càng nhiều và phổ biến tình trạng ngộ độc do rau xanh. Trên thế giới, hàng năm có trên 40000 người chết vì ngộ độc rau trên tổng số 2 triệu người bị ngộ độc (dựa theo thống kê của Tổ chức Lao động Quốc tế ILO). Tuy chưa có thống kê chính thức về số người ngộ độc do thuốc trừ sâu ở nước ta, nhưng theo những thông báo từ những năm qua về các trường hợp ngộ độc lẻ tẻ hay hàng loạt ở từng bệnh viện, từng địa phương cho thấy số người bị ngộ độc là một con số đáng kể. Từ năm 1993 đến tháng 6 năm 1998, có đến hàng chục ngàn người bị nhiễm độc do ăn phải rau quả còn dư lượng thuốc trừ sâu, nặng nhất vẫn là ở các tỉnh đồng bằng sông Cửu Long. Năm 1995, có 13000 người nhiễm độc và trong đó có đến 354 người chết. Trên cơ sở các tài liệu tham khảo tiếp cận được và kết quả khảo sát sơ bộ của khóa trước, luận văn này sẽ khảo sát thực nghiệm quy trình phân tích hàm lượng Carbaryl, Dimethoate trong cải xanh bằng phương pháp HPLC, với mục đích nâng cao hiệu suất thu hồi mẫu các hoạt chất đó từ rau để kết quả phân tích được chính xác hơn, và phù hợp với điều kiện thực tiễn ở PTN Hóa sinh của Bộ môn Công nghệ Thực phẩm
Bạn đang xem trước 20 trang tài liệu Luận văn Quy trình phân tích hàm lượng Carbaryl, Dimethoate trong cải xanh bằng phương pháp HPLC, để xem tài liệu hoàn chỉnh bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
aán phím START). Tính giaù trò trung bình cuûa dieän tích peak.
Tyû soá dieän tích peak cuûa maãu qua coät vaø maãu khoâng qua coät ôû cuøng noàng ñoä cho ta ñoä thu hoài maãu qua coät
Trong ñoù:
Sqc – dieän tích peak cuûa maãu qua coät.
Skqc – dieän tích peak cuûa maãu khoâng qua coät.
2.4. KHAÛO SAÙT QUY TRÌNH XÖÛ LYÙ VAØ PHAÂN TÍCH HAØM LÖÔNG CARBARYL, DIMETHOATE TRONG CAÛI XANH
2.4.1. Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa soá baäc trích ly leân haøm löôïng Carbaryl, Dimethoate
Söû duïng maãu 25ml Carbaryl 20ppm trong nöôùc caát, tieán haønh trích ly nhö ñoái vôùi rau ñeán baäc 3 theo sô ñoà:
25mL Carbaryl 20ppm
Laéc
50mL acetone
Khuaáy töø
5 – 7g NaCl
Taùch pha
Pha höõu cô
(1)
actonitrile
Ñònh möùc 10mL
Dòch phaân tích
Dòch phaân tích
actonitrile
Pha höõu cô
Coâ quay chaân khoâng
Traùng bình
Ñònh möùc 50mL
Dòch phaân tích
Pha nöôùc
acetone
Laéc
Taùch pha
2-3g NaCl
Pha höõu cô
Pha nöôùc
Laéc
Taùch pha
Coâ quay chaân khoâng
Traùng bình
(1)
Nöôùc
Hình 2.1. Sô ñoà quy trình trích caùc maãu chuaån Carbaryl (Dimethoate) trong nöôùc
Dòch trích thu ñöôïc ôû moãi baäc trích ly ñöôïc ñem phaân tích vôùi thieát bò HPLC, moãi maãu phaân tích 3 laàn laáy giaù trò trung bình cuûa dieän tích peak. Tyû soá giöõa dieän tích peak cuûa dòch trích vaø dieän tích peak cuûa maãu chuaån ban ñaàu quy veà noàng ñoä töông öùng cho ta hieäu suaát thu hoài maãu ôû moãi baäc trích ly.
Tieán haønh thí nghieäm töông töï ñoái vôùi Dimethoate.
2.4.2. Xaùc ñònh ñoä thu hoài maãu Carbaryl, Dimethoate cuûa quaù trình trích ly
Söû duïng maãu 100g rau, 100g rau coù boå sung 10ml dung dòch Carbaryl 100ppm, 100g rau coù boå sung 20ml dung dòch Carbaryl 100ppm, 100g rau coù boå sung 25ml dung dòch Carbaryl 100ppm, ñeå qua ñeâm sau ñoù tieán haønh xay nhoû trong 100 mL Aceton, theâm 100ml Aceton ñem khuaáy töø trong 15 phuùt. Tieán haønh loïc chaân khoâng qua giaáy loïc 0.6mm, thu dòch, phaàn baõ cho vaøo erlen 250 mL, theâm 50mL Aceton, khuaáy töø trong 10 phuùt, loïc loaïi baõ. Toång dòch loïc thu ñöôïc seõ ñöôïc xöû lyù nhö quy trình ôû hình treân (hình 2.1.). Sau ñoù ñöôïc phaân tích baèng thieát bò HPLC, xaùc ñònh dieän tích peak caùc maãu khoâng boå sung, coù boå sung Carbaryl treân rau vaø maãu Carbaryl trong nöôùc coù cuøng noàng ñoä töông ñöông ñeå so saùnh xaùc ñònh ñoä thu hoài maãu (Recovery)
Trong ñoù:
Sbs – Dieän tích maãu boå sung chuaån
Srau – Dieän tích maãu rau khoâng theâm chuaån
Sch – Dieän tích maãu chuaån trong nöôùc noàng ñoä töông öùng
Tieán haønh töông töï vôùi caùc maãu khoâng boå sung, boå sung 2.5ml, 5ml, 10ml dung dich Dimethoate 100ppm. Xaùc ñònh ñoä thu hoài maãu Dimethoate cuûa quaù trình trích ly.
Tieán haønh thí nghieäm töông töï nhöng khoâng boå sung chuaån tröïc tieáp vaøo rau maø boå sung vaøo dòch trích sau quaù trình xay vaø loïc chaân khoâng. Xaùc ñònh vaø so saùnh ñoä thu hoài maãu khi boå sung chuaån vaøo dòch vaø khi boå sung vaøo rau.
Töø ñoä thu hoài maãu khi boå sung chuaån vaøo rau, ta tính ñöôïc löôïng Carbaryl, Dimethoate thöïc teá coù trong rau baèng coâng thöùc sau
Trong ñoù:
X – Haøm löôïng Carbaryl (Dimethoate) thöïc teá coù trong rau (ppm).
S – Dieän tích peak cuûa maãu trích ly töø rau ño baèng thieát bò HPLC.
H – Ñoâï thu hoài maãu qua coät (%).
R – Ñoä thu hoài maãu cuûa quy trình trích khi boå sung chuaån vaøo rau(%).
A – Heä soá goùc cuûa phöông trình ñöôøng chuaån
2.4.2. Qui trình trích maãu Carbaryl, Dimethoate töø caûi xanh
Caân 100 g maãu rau, xay nhoû trong 100 mL Aceton, theâm 100ml Aceton ñem khuaáy töø trong 15 phuùt. Tieán haønh loïc chaân khoâng qua giaáy loïc 0.6mm, dòch loïc thu ñöôïc cho vaøo becher 250 mL, phaàn baõ cho vaøo erlen 250 mL, theâm 50mL Aceton, khuaáy töø trong 10 phuùt, loïc thu dòch loïc. Troän hai phaàn dòch loïc laïi theâm 25 - 30 g muoái NaCl (tuøy vaøo löôïng nöôùc coù trong maãu), khuaáy caù töø ñeå hoøa tan hoaøn toaøn muoái. Dòch sau khuaáy töø ñöôïc cho vaøo pheãu chieát, chôø moät thôøi gian cho taùch pha thu pha höõu cô phía treân. Pha nöôùc phía döôùi cho vaøo becher, theâm 50 mL aceton, ñöôïc ñem ñi khuaáy töø. Tieáp tuïc taùch pha thu pha höõu cô ôû treân. Troän chung pha höõu cô ôû caùc laàn taùch pha laïi vôùi nhau, sau ñoù tieán haønh coâ ñaëc chaân khoâng dòch trích ñieàu kieän nhieät ñoä 35oC, vaän toác quay 120 voøng/phuùt. Dòch sau coâ quay ñöôïc traùng laïi nhieàu laàn baèng Acetonitrile. Ñònh möùc dòch trích baèng nöôùc caát 2 laàn, söû duïng bình ñònh möùc 100 mL, ñaùnh sieâu aâm ñeå ñuoåi boït khí vaø loïc laïi baèng maøng loïc 0.2µm (ñöôøng kính: 13 mm, haõng Agilent). Tieán haønh phaân tích vôùi thieát bò HPLC, cheá ñoä vaän haønh thieát bò nhö khi chaïy ñöôøng chuaån.
2.5. ÖÙNG DUÏNG QUY TRÌNH XÖÛ LYÙ VAØ PHAÂN TÍCH CARBARYL, ÑEÅ XAÙC ÑÒNH HIEÄU SUAÁT PHAÂN HUYÛ CARBARYL TRONG CAÛI XANH SAU QUAÙ TRÌNH CHIEÁU XAÏ
2.5.1. Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa lieàu chieáu tôùi möùc ñoä phaân huûy Carbaryl trong nöôùc
Chieáu xaï caùc maãu dung dòch 6, 10, 12, 20ppm Carbaryl trong nöôùc vôùi caùc lieàu chieáu 1, 3 kGy. Phaân tích caùc maãu treân cuøng vôùi maãu ñoái chöùng (maãu khoâng chieáu xaï).
Tyû soá dieän tích peak cuûa maãu ñaõ chieáu xaï vôùi maãu ñoái chöùng xaùc ñònh hieäu suaát phaân huûy Carbaryl.
2.5.2. Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa lieàu chieáu tôùi möùc ñoä phaân huûy Carbaryl trong caûi xanh
Chieáu xaï maãu caûi xanh ôû lieàu chieáu cao hôn ngöôõng cho pheùp:
Chuaån bò maãu chieáu xaï: caân 100g caûi xanh, theâm Carbaryl vôùi löôïng gaáp ñoâi dö löôïng toái ña cho pheùp treân caûi xanh (20mL dung dòch Carbaryl 100ppm), ñeå qua ñeâm ñeå thuoác ngaám vaøo rau, sau ñoù ñem maãu ñi chieáu xaï. Lieàu chieáu 1.5 vaø 3 kGy.
Phaân tích maãu caûi xanh ñaõ chieáu xaï cuøng vôùi maãu ñoái chöùng (maãu caûi xanh coù taåm theâm Carbaryl nhöng khoâng chieáu xaï). Tyû soá dieän tích peak cuûa maãu ñaõ chieáu xaï vôùi maãu ñoái chöùng xaùc ñònh hieäu suaát phaân huûy Carbaryl trong rau.
Chieáu xaï maãu caûi xanh ôû caùc lieàu chieáu thaáp (baèng vaø nhoû hôn ngöôõng cho pheùp):
Chuaån bò maãu caûi xanh töông töï nhö treân nhöng chæ taåm theâm Carbaryl vôùi löôïng baèng dö löôïng toái ña cho pheùp treân rau (10mL dung dòch Carbaryl 100ppm), ñeå qua ñeâm vaø ñem maãu ñi chieáu xaï. Chieáu xaï ôû caùc lieàu 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 vaø 1 kGy.
Phaân tích vaø ñaùnh giaù keát quaû nhö treân.
2.6. KHAÛO SAÙT QUY TRÌNH PHAÂN TÍCH VITAMIN C BAÈNG THIEÁT BÒ SAÉC KYÙ LOÛNG HIEÄU NAÊNG CAO AÙP (HPLC)
2.6.1. Khaûo saùt phoå haáp thuï tia cöïc tím cuûa Vitamin C trong dung dòch
Tieán haønh queùt phoå dung dòch Vitamin C trong heä ñeäm phosphat, pH=2.8 noàng ñoä 10ppm. Söû duïng cuvet thaïch anh vaø quy trình queùt phoå töï ñoäng trong vuøng böôùc soùng töø 190 nm ñeán 400 nm.
2.6.2. Xaây döïng ñöôøng chuaån xaùc ñònh haøm löôïng Vitamin C trong dung dòch
Pha chuaån goác: caân 0.05g acid ascorbic, hoaø tan vaø ñònh möùc 50mL baèng dung dòch acid H3PO4, pH = 2.8 , thu ñöôïc dung dòch goác coù noàng ñoä 1000ppm.
Pha loaõng dung dòch goác thaønh caùc noàng ñoä mong muoán (1, 2, 5, 10, 20) baèng dung dòch acid H3PO4, pH = 2.8 .
Theå tích dung dòch ruùt ra, mL
Bình ñònh möùc söû duïng, mL
Noàng ñoä dung dòch thu ñöôïc, ppm
1
1
50
100
20
10
Töø dung dòch acid ascorbic 10ppm:
Theå tích dung dòch ruùt ra, mL
Bình ñònh möùc söû duïng, mL
Noàng ñoä dung dòch thu ñöôïc, ppm
5
5
1
10
25
10
5
2
1
Ñieàu kieän vaän haønh heä thoáng HPLC:
Heä pha ñoäng chaïy saéc kyù laø heä ñeäm vaø methanol vôùi tyû leä 90/10 (söû duïng methanol HPLC, nöôùc caát 2 laàn). Heä ñeäm ñöôïc pha baèng caùch hoaø tan 6.5g KH2PO4 trong 1L nöôùc caát 2 laàn, chænh pH veà 2.8 baèng H3PO4 roài loïc baèng maøng 0.45µm.
Toác ñoä doøng giöõ coá ñònh 1mL/phuùt.
Theå tích bôm maãu 20µL.
Ñaàu doø UV hoaït ñoäng ôû böôùc soùng 245nm.
Moãi maãu chuaån ñöôïc ño 3 laàn, laáy giaù trò trung bình cuûa dieän tích peak vaø thôøi gian löu. Phöông trình bieåu dieãn söï phuï thuoäc cuûa dieän tích peak vaøo noàng ñoä chính laø phöông trình ñöôøng chuaån.
2.6.3. Xaùc ñònh ñoä thu hoài Vitamin C qua coät
Söû duïng caùc maãu chuaån Vitamin C noàng ñoä 1-20ppm.
ÔÛ cheá ñoä qua coät: moãi noàng ñoä phaân tích 3 laàn laáy giaù trò trung bình dieän tích peak.
ÔÛ cheá ñoä khoâng qua coät (maãu ñöôïc pha ñoäng daãn thaúng ñeán ñaàu doø khoâng qua coät phaân tích): sau khoaûng 1 phuùt, ta laïi bôm 20 mL maãu vaøo, sau 5 – 6 phuùt thì döøng (caùc laàn bôm töø laàn 2 trôû ñi khoâng nhaán phím START). Tính giaù trò trung bình cuûa dieän tích peak.
Tyû soá dieän tích peak cuûa maãu qua coät vaø maãu khoâng qua coät ôû cuøng noàng ñoä cho ta ñoä thu hoài maãu.
2.7. PHAÂN TÍCH HAØM LÖÔÏNG VITAMIN C TRONG CAÛI XANH BAÈNG PHÖÔNG PHAÙP SAÉC KYÙ LOÛNG CAO AÙP
2.7.1. Quy trình trích Vitamin C töø caûi xanh
Caân 10g caûi xanh, ñem nghieàn vaø trích ly baèng 150mL dung dòch ñeäm photphat. Sau ñoù loïc chaân khoâng, thu dòch loïc, phaàn baõ tieáp tuïc ñöôïc trích ly baäc hai baèng 50mL dung dòch ñeäm. Dòch loïc thu ñöôïc töø hai laàn trích cho vaøo bình ñònh möùc vaø ñònh möùc 250mL baèng dung dòch ñeäm phosphat. Sau ñoù ñöôïc ñaùnh sieâu aâm ñeå ñuoåi boït khí vaø loïc laïi baèng maøng loïc 0.2 µm. Tieán haønh phaân tích vôùi thieát bò HPLC theo cheá ñoä vaän haønh cuûa Vitamin C ñaõ trình baøy ôû treân.
10g rau
Nghieàn
Trích ly
Loïc chaân khoâng
Ñònh möùc 250mL
Sieâu loïc
Dòch chieát Vitamin C
150mL dd ñeäm
Baõ
Trích ly
Loïc chaân khoâng
50mL dd ñeäm
Hình 2.2. Sô ñoà quy trình trích Vitamin C töø caûi xanh
2.7.2. Xaùc ñònh ñoä thu hoài maãu cuûa quy trình trích ly
Söû duïng maãu 10g rau, maãu 10g rau coù boå sung 5ml dung dòch vitamin C noàng ñoä 500ppm, maãu rau coù boå sung 7.5ml dung dòch vitamin C noàng ñoä 500ppm, maãu rau coù boå sung 10ml dung dòch vitamin C noàng ñoä 100ppm. Tieán haønh trích töông töï nhö ñoái vôùi maãu rau, ñònh möùc 250ml. Phaân tích baèng thieát bò HPLC, xaùc ñònh dieän tích peak caùc maãu khoâng boå sung, coù boå sung Carbaryl treân rau vaø maãu Carbaryl trong nöôùc coù cuøng noàng ñoä töông ñöông ñeå so saùnh xaùc ñònh ñoä thu hoài maãu.
Tieán haønh song song cuøng vôùi maãu boå sung chuaån vaøo dòch trích töø rau sau quaù trình trích ly.
CHÖÔNG 3. KEÁT QUAÛ VAØ BAØN LUAÄN
3.1. KHAÛO SAÙT QUY TRÌNH PHAÂN TÍCH CARBARYL, DIMETHOATE BAÈNG PHÖÔNG PHAÙP SAÉC KYÙ LOÛNG CAO AÙP (HPLC)
3.1.1. Keát quaû khaûo saùt phoå haáp thuï tia cöïc tím cuûa trong dung dòch
Quaù trình khaûo saùt phoå haáp thu nhaèm muïc ñích tìm böôùc soùng thích hôïp cho chaát caàn phaân tích, thoâng thöôøng ñoù laø böôùc soùng maø taïi ñoù ñoä haáp thu ñaït cöïc ñaïi.
Vieäc löïa choïn ñöôïc böôùc soùng phuø hôïp seõ giuùp naâng cao hieäu quaû cuõng nhö ñoä nhaïy cuûa quy trình phaân tích.
Hình 3.1. Ñoà thò phoå haáp thu tia UV cuûa Carbaryl trong heä 55%Acetonitrile-45%nöôùc
Töø ñoà thò trong hình treân cho thaáy phoå haáp thuï tia UV cuûa dung dòch Carbaryl trong 55%Acetonitrile-45%nöôùc coù hai ñænh haáp thu ôû böôùc soùng 220nm vaø 280nm. Do ñoä haáp thu ôû böôùc soùng 220nm cao hôn so vôùi ñænh haáp thu ôû böôùc soùng 280nm, neân böôùc soùng cuûa ñaàu doø UV cuûa thieát bò HPLC seõ ñöôïc ñaët ôû 220nm khi phaân tích Carbaryl.
Hình 3.2. Ñoà thò phoå haáp thu tia UV cuûa Dimethoate trong heä 55%Acetonitrile-45%nöôùc
Töông töï ôû ñoà thò treân cho thaáy phoå haáp thuï tia UV cuûa dung dòch Dimethoate trong heä 55%Acetonitrile-45%nöôùc coù 1 ñænh haáp thu ôû böôùc soùng 204nm. Do ñoù ñeå naâng cao ñoä nhaïy cuûa quy trình phaân tích thì khi phaân tích Dimethoate vôùi thieát bò HPLC böôùc soùng cuûa ñaàu doø ñöôïc ñaët ôû 204nm.
ÔÛ ñaây, ban ñaàu khi Dimethoate ñöôïc pha trong nöôùc thì sau khi queùt, phoå thu ñöôïc bò nhieãu, khoâng xaùc ñònh ñöôïc ñænh haáp thu. Khi chuyeån pha Dimethoate trong pha ñoäng (55%ACN:45%H2O) phoå thu ñöôïc coù ñænh haáp thu cöïc ñaïi taïi böôùc soùng 204nm nhö ñaõ noùi ôû treân. Khi kieåm tra laïi pH cuûa pha ñoäng, ta thaáy noù coù giaù trò vaøo khoaûng töø 5-6, coøn trong nöôùc coù pH töø 9 – 10. Ñieàu naøy coù theå giaûi thích laø do trong moâi tröôøng kieàm Dimethoate deã bò phaân huûy gaây nhieãu phoå thu ñöôïc.
3.1.2. Keát quaû nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa thaønh phaàn pha ñoäng
Vieäc löïa choïn ñöôïc heä pha ñoäng phuø hôïp coù yù nghóa quan troïng trong phöông phaùp phaân tích baèng thieát bò saéc kyù loûng cao aùp. Pha ñoäng thích hôïp seõ giuùp naâng cao hieäu quaû phaân tích cuõng nhö taêng khaû naêng phaân taùch chaát vaø ñoä thu hoài maãu. Thaønh phaàn cuûa pha ñoäng coù theå aûnh höôûng maïnh ñeán thôøi gian löu vaø dieän tích peak cuûa chaát caàn phaân tích.
Thôøi gian löu (ñænh peak) khoâng neân quaù ngaén. Neáu thôøi gian löu quaù ngaén coù theå aûnh höôûng ñeán söï ñoái xöùng cuûa peak vaø peak ra coù theå quaù gaàn vôùi peak cuûa dung moâi. Maët khaùc, thôøi gian löu cuõng khoâng ñöôïc quaù laâu vì keùo daøi thôøi gian phaân tích seõ laøm giaûm ñoä thu hoài maãu bôûi töông taùc cuûa maãu vôùi pha tónh maïnh hôn. Beân caïnh ñoù maát quaù nhieàu thôøi gian phaân tích maãu, toán pha ñoäng.
Hình 3.3.Ñoà thò thôøi gian löu-dieän tích peak cuûa Carbaryl khi thay ñoåi tyû leä ACN:H2O
Töø ñoà thò trong hình treân ta thaáy khi ta taêng löôïng Acetonitrile trong thaønh phaàn pha ñoäng thì dieän tích peak thu ñöôïc taêng leân ñoàng thôøi thôøi gian löu giaûm xuoáng. Ñieàu naøy coù theå giaûi thích moät caùch deã daøng do Acetonitrile laø dung moâi röûa coät neân khi taêng löôïng Acetonitrile leân thì toác ñoä cuõng nhö haøm löôïng Carbaryl ñöôïc röûa giaûi ra khoûi coät taêng leân.
Ta thaáy ôû heä pha ñoäng 40%Acetonitrile:60%Nöôùc thôøi gian löu taêng leân raát cao (11.374 ± 0,038) phuùt so vôùi khi söû duïng pha ñoäng vôùi tyû leä 55/45.
ÔÛ caùc heä pha ñoäng 70/30, 85/15 dieän tích peak coù taêng leân nhöng khoâng ñaùng keå, beân caïnh ñoù keát quaû ño ra coù ñoä laëp laïi khoâng cao.
ÔÛ heä pha ñoäng coù tyû leä Acetonitrile laø 55% ta thaáy thôøi gian löu khoâng quaù ngaén cuõng khoâng quaù daøi (6.291 ± 0.084 phuùt), ñoä laëp laïi cao, hình daïng peak ñoái xöùng. Vì vaäy khi phaân tích Carbaryl ta choïn heä pha ñoäng vôùi tyû leä 55%Acetonitrile-45%nöôùc ñeå cho keát quaû phaân tích toát nhaát.
Hình 3.4.Ñoà thò thôøi gian löu-dieän tích peak cuûa Dimethoate khi thay ñoåi tyû leä ACN:H2O
Ñoái vôùi Dimethoate khi söû duïng heä pha ñoäng 70% acetonitrile 30% nöôùc, dieän tích peak taêng leân ñaùng keå so vôùi khi duøng heä pha ñoäng 55% acetonitrile-45% nöôùc tuy nhieân keát quaû ño ñöôïc coù ñoä laëp laïi khoâng cao.
ÔÛ heä pha ñoäng 55%Acetonitrile-45%nöôùc thôøi gian löu cuûa Dimethoate khoâng quaù ngaén (3,973 ± 0,064) phuùt, taùch ra so vôùi peak cuûa Carbaryl vaø cuûa caùc thaønh phaàn khaùc trong rau, dieän tích peak thu ñöôïc töông ñoái cao. Beân caïnh ñoù khi söû duïng cuøng heä pha ñoäng 55%Acetonitrile-45%Nöôùc ta coù theå tieán haønh phaân tích ñoàâng thôøi caû hai chaát, giuùp tieát kieäm thôøi gian thay pha ñoäng cuõng nhö giuùp tieát kieäm löôïng dung moâi tieâu hao. Ñoàng thôøi coù cô sôû so saùnh vôùi soá lieäu thöïc nghieäm trong caùc luaän vaên ñaõ thöïc hieän tröôùc ñaây.
Do ñoù ñeå thuaän tieän ta söû duïng cuøng heä pha ñoäng 55%Acetonitrile-45%nöôùc cho caû Dimethoate vaø Carbaryl. Ñaây laø heä pha ñoäng coù thaønh phaàn acetonitrile töông ñoái, khoâng quaù cao nhöng vaãn coù theå röûa giaûi toát caùc chaát ra khoûi coät phaân tích. Ñöôøng neàn oån ñònh, peak thu ñöôïc ñeàu heïp, ñoái xöùng. Thôøi gian löu cuûa caùc chaát ôû cheá ñoä pha ñoäng naøy khoâng quaù daøi, dieän tích peak thu ñöôïc coù ñoä laëp laïi chaáp nhaän ñöôïc (ñoä leäch chuaån töông ñoái khoâng quaù 5%).
Tuy nhieân neáu coù ñieàu kieän ta neân phaân tích Dimethoate vôùi pha ñoäng 70/30 ñeå taêng ñoä thu hoài maãu.
3.1.3. Xaây döïng ñöôøng chuaån xaùc ñònh haøm löôïng Carbaryl, Dimethoate trong dung dòch
Ñöôøng chuaån xaùc ñònh haøm löôïng Carbaryl trong dung dòch:
Ñöôøng chuaån ñöôïc xaây döïng taïi 5 noàng ñoä maãu chuaån 1, 2, 5, 10, 20ppm.
Vôùi cheá ñoä chaïy saéc kyù vaø böôùc soùng hoaït ñoäng cuûa ñaàu doø UV nhö ñaõ löïa choïn, saéc kyù ñoà cuûa caùc maãu dung dòch chuaån Carbaryl trong nöôùc coù daïng nhö treân ñoà thò hình 3.5. Saéc kyù ñoà cuûa caùc maãu naøy cho moät peak duy nhaát, töông ñoái heïp, thôøi gian löu (ñænh peak) oån ñònh ôû giaù trò (6.288 ± 0.032) phuùt. Ñöôøng neàn oån ñònh, ít nhieãu.
Dieän tích peak thu ñöôïc cuõng coù ñoä laëp laïi chaáp nhaän ñöôïc, ñoä leäch chuaån töông ñoái dao ñoäng döôùi 5,0%.
(a)
(b)
(c)
Hình 3.5. Sắc kyù ñoà chaïy ñöôøng chuaån Carbaryl
Noàng ñoä 1ppm
Noàng ñoä 5ppm
Noàng ñoä 10ppm
Xaây döïng ñoà thò dieän tích peak trung bình thu ñöôïc töø saéc kyù ñoà theo noàng ñoä Carbaryl trong caùc maãu chuaån, söû duïng phöông phaùp hoài quy tuyeán tính xaùc ñònh phöông trình ñöôøng chuaån. Ñöôøng chuaån thu ñöôïc coù heä soá töông quan R= 0.996> 0.95, laø chaáp nhaän ñöôïc.
Hình 3.6. Ñöôøng chuaån phaân tích cuûa Carbaryl trong nöôùc vôùi thieát bò HPLC
Heä soá goùc thu ñöôïc sai leäch khoâng nhieàu so vôùi heä soá goùc thu ñöôïc trong luaän vaên khoaù tröôùc (heä soá goùc ôû luaän vaên khoaù tröôùc laø185947), tuy coù nhoû hôn moät chuùt song sai leäch khoâng quaù 1%, vaãn naèm trong vuøng sai soá thöïc nghieäm. Maët khaùc qua moät naêm söû duïng noùi chung hieäu naêng cuûa coät saéc kyù coù theå bò aûnh höôûng. [7]
Ñöôøng chuaån xaùc ñònh haøm löôïng Dimethoate trong dung dòch:
Thôøi gian löu vaø dieän tích peak thu ñöôïc khi phaân tích caùc maãu chuaån Dimethoate naèm trong ngöôõng chaáp nhaän ñöôïc (ñoä leäch chuaån töông ñoái khoâng quaù 5%). Hình daïng peak ñoái xöùng.
Thôøi gian löu naøy ngaén hôn haún so vôùi thôøi gian löu cuûa peak thu ñöôïc töø caùc maãu dung dòch chuaån Carbary, theå hieän ñoä phaân cöïc cuûa Dimethoate maïnh hôn cuûa Carbaryl. Keát quaû naøy coù theå giaûi thích ñöôïc khi so saùnh coâng thöùc caáu taïo cuûa Dimethoate vôùi Carbaryl.
Hình daïng peak vaø thôøi gian löu cho thaáy coù khaû naêng taùch ñöôïc Dimethoate khoûi Carbaryl vôùi cheá ñoä chaïy saéc kyù ñaõ löïa choïn (coät saéc kyù, thaønh phaàn pha ñoäng, toác ñoä doøng, theå tích maãu bôm vaøo heä thoáng). Thôøi gian löu ngaén cuõng goùp phaàn ruùt ngaén thôøi gian phaân tích maãu, giaûm chi phí dung moâi vaø hö hao thieát bò.
(a)
(b)
(c)
Hình 3.7. Saéc kí ñoà chaïy ñöôøng chuaån Dimethoate
(a) Noàng ñoä 1ppm
(b) Noàng ñoä 5ppm
(c) Noàng ñoä 20ppm
Xaây döïng ñoà thò dieän tích peak trung bình thu ñöôïc töø caùc saéc kyù ñoà theo noàng ñoä Dimethoate trong caùc maãu chuaån, söû duïng phöông phaùp hoài quy tuyeán tính xaùc ñònh phöông trình ñöôøng chuaån. Ñöôøng chuaån ñi qua goác toaï ñoä, coù ñoä tin caäy cao, heä soá töông quan R= 0.997> 0.95, laø chaáp nhaän ñöôïc.
Hình 3.8. Ñöôøng chuaån phaân tích cuûa Dimethoate trong heä 55%Acetonitrile-45%nöôùc vôùi thieát bò HPLC
Cuøng quy luaät nhö ñoái vôùi Carbaryl, heä soá goùc thu ñöôïc khi phaân tích caùc maãu chuaån Dimethoate cuõng nhoû hôn heä soá goùc thu ñöôïc trong luaän vaên khoaù tröôùc (heä soá goùc ôû luaän vaên khoaù tröôùc laø 17370).[8]
Ñoä thu hoài qua coät cuûa Carbaryl, Dimethoate
Ñoä thu hoài maãu Carbaryl qua coät phaân tích:
Hình 3.9. Saéc kyù ñoà Carbaryl 10ppm ôû cheá ñoä khoâng qua coät
Hình 3.10. Saéc kyù ñoà Carbaryl 10ppm ôû cheá ñoä qua coät
Baûng 3.1. Ñoä thu hoài qua coät cuûa Carbaryl ôû caùc noàng ñoä
Noàng ñoä maãu, ppm
Maãu qua coät
Maãu khoâng qua coät
Ñoä thu hoài maãu qua coät, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak
1
195813,5 ± 9183,7
236675 ± 3668,5
82,74± 4,09
2
313848,8 ± 4519,4
372470,8 ± 4730,4
84,26± 1,62
5
750989,5 ± 29288,6
788714,8 ± 11199,8
95,22± 3,95
10
1512305 ± 11191,1
1543244 ± 11111,4
98,00± 1,01
Töø keát quaû treân ta thaáy ñoä thu hoài qua coät taêng leân khi taêng noàng ñoä. Ñieàu naøy coù theå giaûi thích laø do ôû noàng ñoä nhoû moät löôïng Carbaryl bò giöõ laïi trong coät cuõng aûnh höôûng maïnh ñeán keát quaû thu ñöôïc. Ñoä thu hoài qua coät cuûa Carbaryl khaù cao (ñaït 98% ôû noàng ñoä 10ppm), chöùng toû heä dung moâi söû duïng coù khaû naêng röûa giaûi Carbaryl ra khoûi coät raát toát.
Ñoä thu hoài qua coät cuûa Dimethoate:
Hình 3.11. Saéc kyù ñoà Dimethoate 10ppm ôû cheá ñoä khoâng qua coät
Hình 3.12. Saéc kyù ñoà Dimethoate 10ppm ôû cheá ñoä qua coät
Baûng 3.2. Ñoä thu hoài qua coät cuûa Dimethoate ôû caùc noàng ñoä
Noàng ñoä maãu, ppm
Maãu qua coät
Maãu khoâng qua coät
Ñoä thu hoài maãu qua coät, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak
1
34538,3 ± 856,5
107228,0 ± 4621,5
32,21 ± 1,60
2
61590,5 ± 2266,5
151350,0 ± 4903,7
40,69 ± 2,00
5
163449,5 ± 6734,1
253129,8 ± 10631,5
64,57 ± 3,80
10
211424,5 ± 8118,7
323055,3 ± 9982,4
65,45 ± 3,23
20
463938,3 ± 856,5
584562,0 ± 4621,5
79,36 ± 2,95
Keát quaû treân cho ta thaáy ñoät thu hoài qua coät cuûa Dimethoate thaáp hôn so vôùi cuûa Carbaryl, chöùng toû heä pha ñoäng 55%Acetonitrile-45%nöôùc röûa giaûi Carbaryl ra khoûi coät toát hôn nhieàu so vôùi röûa giaûi Dimethoate.
Tuy nhieân nhö ñaõ noùi ôû treân ñeå thuaän tieän cho quaù trình phaân tích cuõng nhö taïo söï oån ñònh cho coät, vaãn söû duïng heä pha ñoäng 55% acetonitrile 45% nöôùc.
3.2. KHAÛO SAÙT QUY TRÌNH XÖÛ LYÙ VAØ PHAÂN TÍCH HAØM LÖÔÏNG CARBARYL, DIMETHOATE TRONG CAÛI XANH
3.2.1. Keát quaû khaûo saùt aûnh höôûng cuûa soá baäc trích ly leân haøm löôïng Carbaryl, Dimethoate
Hieäu suaát thu hoài maãu khi trích ly Carbaryl:
Dieän tích peak thu ñöôïc ôû baäc 1 khaù cao. Töø baäc trích ly thöù hai trôû ñi dieän tích peak thu ñöôïc ñaõ giaûm ñaùng keå (chæ coøn khoaûng 8.3% ôû baäc trích ly thöù 2 vaø chæ coøn chöa ñeán 5% ôû baäc trích thöù 3).
Baûng 3.3. Thôøi gian löu vaø dieän tích peak trung bình theo baäc trích ly
Baäc trích ly
Thôøi gian löu
Dieän tích peak
1 (ñònh möùc 25)
2 (ñònh möùc 10mL)
3 (ñònh möùc 10mL)
6,293 ± 0,02
6,303 ± 0,02
6,300 ± 0,02
3383912,0 ± 6091,0
280926,0 ± 5646,6
138435,7 ± 1633,5
Töø keát quaû naøy ta tính ñöôïc ñoä thu hoài maãu qua caùc baäc trích ly töông öùng. Ñoái vôùi trích ly baäc 1 thì ñoä thu hoài maãu ñaït ñöôïc khaù cao, khoaûng 91.06%, khi taêng theâm moät baäc trích ly thì ñoä thu hoài taêng leân laø 94.09%, coøn khi taêng leân baäc 3 thì ñoä thu hoài taêng leân 95.58%. Töø baäc trích ly thöù 3 trôû ñi ñoä thu hoài Carbaryl taêng leân khoâng ñaùng keå, do ñoù ñeå tieát kieäm thôøi gian vaø dung moâi, ta seõ tieán haønh trích ly 2 baäc.
Baûng 3.4. Ñoä thu hoài maãu Carbaryl theo baäc trích ly
Baäc trích ly
Ñoä thu hoài maãu(%)
1 (ñònh möùc 25)
2 (ñònh möùc 10mL)
3 (ñònh möùc 10mL)
91,06 ± 1,49
94,09 ± 2,41
95,58 ± 2,69
Hieäu suaát thu hoài maãu cuûa quaù trình trích ly dimethoate:
Töông töï nhö Carbaryl, ñoái vôùi Dimethoate dieän tích peak thu ñöôïc ôû laàn trích ly töø baäc thöù 2 trôû ñi nhoû hôn raát nhieàu so vôùi dieän tích peak thu ñöôïc töø laàn trích ñaàu tieân.
Baûng 3.5. Thôøi gian löu vaø dieän tích peak cuûa Dimethoate theo baäc trích ly
Baäc trích ly
Thôøi gian löu
Dieän tích peak
1 (ñònh möùc 50)
2 (ñònh möùc 10mL)
3 (ñònh möùc 10mL)
3,903 ± 0,027
3,901 ± 0,026
3,910 ± 0,048
145346,3 ± 1569,7
11318,3 ± 444,8
1248,0 ± 56,4
Töø keát quaû naøy ta tính ñöôïc ñoä thu hoài maãu qua caùc baäc trích ly töông öùng. Ñoái vôùi trích ly moät baäc thì ñoä thu hoài maãu ñaït ñöôïc khaù cao, khoaûng 90.81%. khi taêng theâm moät baäc trích ly thì ñoä thu hoài taêng leân laø 92.22%, coøn khi taêng leân baäc 3 thì ñoä thu hoài taêng leân khoâng ñaùng keå. Do ñoù ta cuõng seõ tieán haønh trích ly 2 baäc khi phaân tích maãu Dimethoate.
Baûng 3.6. Ñoä thu hoài maãu Dimethoate theo baäc trích ly
Baäc trích ly
Ñoä thu hoài maãu(%)
1 (ñònh möùc 50)
2 (ñònh möùc 10mL)
3 (ñònh möùc 10mL)
90,81 ± 1,98
92,22 ± 4,14
92,38 ± 5,89
Ñoä thu hoài maãu Carbaryl, Dimethoate cuûa quy trình trích ly töø rau
Keát quaû phaân tích haøm löôïng Carbaryl, Dimethoate trong rau chòu aûnh höôûng cuûa hieäu suaát thu hoài maãu sau coät HPLC vaø hieäu suaát thu hoài maãu sau quaù trình trích (tröôùc khi ñöa vaøo coät HPLC). Do ñoù, ñeå xaùc ñònh hieäu suaát thu hoài maãu cuûa qui trình trích löïa choïn, caàn laøm ñoàng thôøi qui trình naøy vôùi maãu rau, vaø vôùi maãu rau coù theâm chuaån ñeå so saùnh.
Ñoä thu hoài maãu Carbaryl cuûa quy trình trích ly:
Hình 3.13. Saéc kyù ñoà phaân tích maãu caûi xanh khoâng boå sung Carbaryl
Hình 3.14. Saéc kyù ñoà phaân tích maãu caûi xanh boå sung 10ppm Carbaryl
Baûng 3.7. Ñoä thu hoài Carbaryl töø caùc maãu boå sung chuaån leân rau
Maãu boå sung
Thôøi gian löu , phuùt
Thôøi gian löu TB, phuùt
RSD, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak TB
RSD, %
Ñoä thu hoài maãu (%)
0
6,21
6,155
1,73
71728
71514,3
1,74
6,032
72639
6,223
70176
10ppm
5,990
6,108
1,78
1500381
1489454
0,69
74,10 ± 1,80
6,203
1487943
6,133
1480037
20ppm
6,202
6,179
0,79
3021836
3018616
0,24
81,09 ± 1,86
6,123
3010375
6,212
3023636
25ppm
6,204
6,207
1,56
3892276
3803251
3,06
83,99 ± 3,11
6,306
3845750
6,112
3671728
Ñoä thu hoài maãu taêng theo söï taêng noàng ñoä maãu boå sung.
Ñoä thu hoài maãu thu ñöôïc trong luaän vaên naøy cao hôn nhieàu so vôùi ñoä thu hoài maãu trong luaän vaên khoaù tröôùc ñaõ tieán haønh. Ñieàu naøy chöùng toû vieäc taêng soá baäc trích ly coù yù nghóa trong vieäc thu hoài löôïng Carbaryl coù trong nguyeân lieäu ban ñaàu. Maët khaùc, kinh nghieäm trong thao taùc thöïc nghieäm thu ñöôïc töø caùc nghieân cöùu thaêm doø ôû luaän vaên tröôùc cuõng goùp phaàn khoâng nhoû caûi tieán kyõ naêng thöïc nghieäm, naâng cao ñoä thu hoài maãu.
Vieäc taêng ñoä thu hoài maãu cuõng cho thaáy ñöôïc hieäu quaû cuûa quy trình trích ly laø khaù toát, coù khaû naêng trích ñöôïc cô baûn dö löôïng Carbaryl trong rau.
Keát quaû tính haøm löôïng Carbaryl trong maãu rau mua ôû chôï:
Döïa vaøo coâng thöùc trong phaàn thöïc nghieäm ta tính ñöôïc haøm löôïng Carbaryl coù trong maãu rau ban ñaàu laø
Keát quaû naøy phuø hôïp vôùi thöïc teá söû duïngï Carbaryl hieän nay (theo thoáng keâ cuûa Vipesco thì tình hình tieâu thuï caùc loaïi thuoác coù chöùa hoaït chaát Carbaryl ñaõ giaûm haún)
Baûng 3.8. Ñoä thu hoài Carbaryl töø caùc maãu boå sung chuaån vaøo dich chieát töø rau
Maãu boå sung
Thôøi gian löu , phuùt
Thôøi gian löu trung bình, phuùt
RSD, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak trung bình
RSD, %
Ñoä thu hoài maãu (%)
0
6,306
6,305
0,03
71728
71514,3
1,74
6,303
72639
6,307
70176
10
6,306
6,305
0,02
1600619
1545374
3,13
77,03 ± 3,01
6,304
1525131
6,306
1510372
20
6,308
6,306
0,04
3163038
3108449
2,4
83,56 ± 2,77
6,303
3138673
6,306
3023636
25
6,304
6,305
0,04
3862206
3932033
1,58
86,89 ± 2,28
6,308
3952383
6,303
3981510
Töø baûng treân cho ta thaáy ñoä thu hoài maãu khi ta boå sung chuaån vaøo dòch chieát cao hôn khi ta boå sung chuaån vaøo rau. Ñieàu naøy coù theå deã daøng lyù giaûi do Carbaryl coù theå bò maát maùt trong giai ñoaïn trích ly töø rau. Do ñoù ñeå giaûm bôùt löôïng maát maùt naøy ta coù theå taêng thôøi gian khuaáy töø ñeå taêng thôøi gian tieáp xuùc giöõa dung moâi vôùi Carbaryl, giaûm löôïng Carbaryl coøn trong baõ rau.
Ñoä thu hoài maãu Dimethoate cuûa quy trình trích ly:
Hình 3.15. Saéc kyù ñoà phaân tích maãu caûi xanh khoâng boå sung Dimethoate
Hình 3.16. Saéc kyù ñoà phaân tích maãu caûi xanh boå sung 2,5ppm Dimethoate
Baûng 3.9. Ñoä thu hoài maãu cuûa caùc maãu boå sung chuaån Dimethoate vaøo rau
Maãu boå sung
Thôøi gian löu , phuùt
Thôøi gian löu trung bình, phuùt
RSD, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak trung bình
RSD, %
Ñoä thu hoài maãu (%)
0
4,048
4,008
1,34
2944
2720,33
4,43
4,03
2714
3,947
2603
2,5
4,044
4,014
1,43
32596
32579
1,35
65,76 ± 3,30
3,948
33009
4,05
32133
5
4,03
3,996
1,09
58051
58162
3,00
69,03 ± 4,05
4,012
59959
3,947
56476
10
4,048
4,009
0,87
120976
121196,3
1,49
72,08 ± 4,01
3,98
119507
4,00
123106
Ñoä thu hoài maãu cuûa Dimethoate cuõng taêng leân so vôùi keát quaû maø khoùa tröôùc ñaõ ñaït ñöôïc. Ñieàu naøy cho thaáy quy trình trích ly naêm nay hieäu quaû hôn trong vieäc thu hoài haøm löôïng Dimethoate coù trong maãu rau.
Keát quaû tính haøm löôïng Dimethoate trong maãu rau mua ôû chôï:
Haøm löôïng naøy nhoû hôn dö löôïng toái ña cho pheùp trong rau (2ppm).
Baûng 3.10. Ñoä thu hoài maãu Dimethoate töø caùc maãu boå sung chuaån vaøo dòch chieát töø rau
Maãu boå sung
Thôøi gian löu , phuùt
Thôøi gian löu TB,phuùt
RSD, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak TB
RSD, %
Ñoä thu hoài maãu (%)
0
4,048
4,063
0,51
2944
2720,33
4,43
4,055
2714
4,087
2603
2,5
4,087
4,076
0,44
33556
33498,33
2,26
67,61 ± 3,61
4,085
32714
4,055
34225
5
4,047
4,047
0,01
60920
60022,67
1,38
71,24 ± 3,72
4,048
59864
4,047
59284
10
4,045
4,046
0,03
122736
123673,3
3,58
73,55 ± 4,75
4,045
128489
4,047
119795
Töông töï nhö ñoái vôùi Carbaryl khi boå sung chuaån tröïc tieáp vaøo dòch ñoä thu hoài maãu cuõng taêng leân.
3.2.3. Qui trình trích maãu Carbaryl, Dimethoate töø caûi xanh
Quy trình trích ly ñöôïc xaây döïng döïa vaøo taøi lieäu tham khaûo, ñöôïc ñieàu chænh cho phuø hôïp vôùi ñieàu kieän cuûa phoøng thí nghieäm cuõng nhö keát quaû khaûo saùt aûnh höôûng cuûa soá baäc trích ly leân haøm löôïng Carbaryl, Dimethoate.
So vôùi taøi lieäu tham khaûo, qui trình thöïc hieän trong luaän vaên ñaõ caét caùc böôùc: taùch pha Acetonitrile töø hoãn hôïp Acetonitrile – Petroleum ete, hoøa tan dung moâi Acetonitrile vôùi Dicloromethane, huùt kieät pha nöôùc baèng muoái Natri sulfat, röûa giaûi qua coät Nuchar – Celite, söû duïng Aceton laøm dung moâi trích ly, taêng soá baäc trích ly leân 2 baäc.
Veà Dicloromethane: theo taøi lieäu tham khaûo, qui trình tieán haønh trích thuoác tröø saâu Carbamate thöông phaåm neân caàn phaûi tieán haønh nhieàu böôùc ñeå laøm giaøu maãu vaø loaïi bôùt caùc taïp chaát khoâng caàn thieát ñeå quaù trình phaân taùch qua coät saéc kí loûng toát hôn. Trong luaän vaên naøy, Carbaryl duøng phun taåm leân rau coù ñoä tinh khieát 98% neân khoâng nhaát thieát phaûi söû duïng theâm Dicloromethane.
Veà dung moâi:theo baûng 1.3 vaø 1.5, ñoä tan cuûa Carbaryl, Dimethoate trong Aceton khaù cao, cao hôn nhieàu so vôùi Methanol vaø töông ñöông so vôùi Acetonitrile. Maëc khaùc khi söû duïng dung moâi Methanol ñeå trích ly gaây khoù khaên cho vieäc taùch pha duø ñaõ taêng löôïng muoái cho vaøo. Do ñoù choïn Aceton laøm dung moâi trích maãu Carbaryl, Dimethoate töø rau.
Veà coät Nuchar – Celite: vieäc khoâng cho dòch trích röûa giaûi qua coät Nuchar – Celite coù theå daãn ñeán löôïng taïp chaát nhieàu laøm hö coät saéc kyù nhöng dòch trích sau ñònh möùc ñaõ coù qua maøng loïc 0.2 μm (loaïi ñöôïc caùc taïp chaát thoâ) roài môùi phaân tích baèng HPLC. Tuy nhieân, boû qua giai ñoaïn naøy laøm saéc kyù ñoà cuûa maãu thu ñöôïc phöùc taïp hôn nhieàu (coù nhieàu peak hôn) neân höôùng ñeà xuaát cho caùc nghieân cöùu tieáp theo caàn thöû nghieäm theâm giai ñoaïn naøy.
Soá baäc trích ly: trích ly ñeán baäc hai nhaèm laøm taêng ñoä thu hoài maãu cuûa quy trình trích.
Vôùi quy trình trích ly naøy coù theå aùp duïng ñeå phaân tích ñoàng thôøi Carbaryl vaø Dimethoate. Tuy nhieân ñoä thu hoài maãu cuûa Dimethoate con chöa cao, neáu coù ñieàu kieän caàn caûi thieän theâm quy trình trích vaø thaønh phaàn pha ñoäng khi phaân tích Dimethoate.
Sô ñoà khoái quy trình trích ly:
25mL acetonitrile
Pha höõu cô
100mL Aceton
Nghiền
Loïc
50mL acetone
Laéc
Loïc
Pha nöôùc
Pha höõu cô
Taùch pha
Khuaáy töø
50mLacetone
Pha nöôùc
Taùch pha
100mL acetone
Laéc
100g cải xanh
Coâ quay chaân khoâng
Traùng bình
Ñònh möùc 100mL
Sieâu aâm
Sieâu loïc
Dòch phaân tích
Baõ
Khuaáy töø
25 – 27g NaCl
Hình 3.17. Sô ñoà khoái quy trình trích ly Carbaryl, Dimethoate töø rau
3.3. HIEÄU SUAÁT PHAÂN HUYÛ CARBARYL TRONG CAÛI XANH SAU QUAÙ TRÌNH CHIEÁU XAÏ
3.3.1. Xaùc ñònh aûnh höôûng cuûa lieàu chieáu tôùi möùc ñoä phaân huûy Carbaryl trong nöôùc
Baûng 3.11. Hieäu suaát phaân huyû Carbaryl trong caùc maãu nöôùc sau chieáu xaï
Lieàu chieáu
Noàng ñoä (ppm)
Thôøi gian löu trung bình
RSD%
Dieän tích peak trung bình
RSD%
Hieäu suaát phaân huyû
1,0
kGy
6
0
0
0
0
100%
10
5,661
0,04
334090,3
4,88
82%
12
5,664
0,05
385553,7
4,31
82,7%
20
5,668
0,03
444741,97
3,85
80,00%
3 kGy
6
0
0
0
0
100%
10
0
0
0
0
100%
12
5,7
0,11
60954,67
3,63
97,27%
20
5,7
0,09
483601,3
2,67
86,99%
Ñoái vôùi maãu 6ppm Carbaryl trong nöôùc ôû lieàu chieáu 1kGy ta khoâng coøn thaáy xuaát hieän peak cuûa Carbaryl nöõa. Ñieàu naøy chöùng toû lieàu chieáu 1kGy ñuû ñeå phaân huyû hoaøn toaøn löôïng Carbaryl coù trong maãu nöôùc 6ppm.
Ñoái vôùi maãu 10ppm, hieäu suaát phaân huyû ôû lieàu chieáu 1kGy laø 82% thì khi taêng lieàu chieáu leân 3kGy hieäu suaát phaân huyû ñaït 100%, chöùng toû lieàu 3kGy coù theå phaân huyû hoaøn toaøn löôïng Carbaryl coù trong maãu 10pm.
ÔÛ lieàu chieáu 3kGy, maãu 20ppm ñaõ bò phaân huyû ñeán 86.99%.
Töø keát quaû ôû treân ta thaáy vieäc chieáu xaï ñaõ laøm phaân huûy ñaùng keå dö löôïng Carbaryl trong nöôùc vaø coù theå coù yù nghóa nhaát ñònh trong vieäc phaân huyû Carbaryl trong rau. Möùc ñoä phaân huyû phuï thuoäc vaøo lieàu chieáu söû duïng vaø haøm löôïng Carbaryl coù trong maãu ban ñaàu.
3.3.2. Xaùc ñònh aûnh höôûng cuûa lieàu chieáu tôùi möùc ñoä phaân huûy Carbaryl trong caûi xanh
Chieáu xaï maãu caûi xanh ôû lieàu chieáu cao hôn ngöôõng cho pheùp:
Hình 3.18. Hieäu suaát phaân huyû Carbaryl trong caûi xanh ôû caùc lieàu chieáu cao
Töø keát quaû treân ta thaáy khi taêng lieàu chieáu xaï leân thì hieäu suaát phaân huyû Carbaryl cuõng taêng leân.
ÔÛ lieàu chieáu 3 kGy, löôïng Carbaryl phaân huûy leân ñeán 68.09%. Tuy nhieân hieäu suaát phaân huyû naøy thaáp hôn nhieàu so vôùi hieäu suaát phaân huyû cuûa caùc maãu nöôùc ôû cuøng noàng ñoä. Ñieàu naøy cho thaáy caùc thaønh phaàn trong rau coù aûnh höôûng khaù lôùn ñeán hieäu suaát phaân huyû Carbaryl do taùc ñoäng chieáu xaï.
Chieáu xaï maãu caûi xanh ôû caùc lieàu chieáu thaáp:
Hình 3.19. Ñoà thò hieäu suaát phaân huyû cuûa Carbaryl ôû caùc lieàu chieáu thaáp
Keát quaû treân cho thaáy töø lieàu chieáu 0.4kGy trôû leân Carbaryl trong caûi xanh coù theå bò phaân huyû ñeán hôn 50%. Töùc laø neáu trong rau caûi coù dö löôïng Carbaryl gaáp ñoâi dö löôïng cho pheùp treân rau (20ppm), thì chæ caàn ôû lieàu chieáu 0.4kGy cuõng ñaõ laøm giaûm dö löôïng xuoáng ñaït möùc cho pheùp cuûa dö löôïng.
3.4. KHAÛO SAÙT QUY TRÌNH PHAÂN TÍCH VITAMIN C BAÈNG THIEÁT BÒ SAÉC KYÙ LOÛNG HIEÄU NAÊNG CAO AÙP (HPLC)
3.4.1. Khaûo saùt phoå haáp thuï tia cöïc tím cuûa Vitamin C trong dung dòch
Hình 3.20. Phoå haáp thu Vitamin C trong heä ñeäm phosphat
Ñoà thò treân cho thaáy phoå haáp thuï tia UV cuûa maãu chuaån Vitamin C trong heä ñeäm phosphat coù ñænh haáp thu ôû böôùc soùng 245nm. Do ñoù khi phaân tích Vitamin C vôùi thieát bò HPLC, böôùc soùng cuûa ñaàu doø UV ñöôïc ñaët ôû 245nm.
Xaây döïng ñöôøng chuaån dung dòch Vitamin C trong heä ñeäm:
Vôùi cheá ñoä chaïy saéc kyù vaø böôùc soùng hoaït ñoäng cuûa ñaàu doø UV nhö ñaõ löïa choïn, saéc kyù ñoà cuûa caùc maãu dung dòch chuaån Carbaryl trong nöôùc coù daïng nhö treân ñoà thò hình 3.5. Saéc kyù ñoà cuûa caùc maãu naøy cho moät peak duy nhaát, töông ñoái heïp, thôøi gian löu oån ñònh. Ñöôøng neàn oån ñònh, ít nhieãu.
(a)
(b)
(c)
Hình 3.21. Saéc kyù ñoà chaïy ñöôøng chuaån Vitamin C
Noàng ñoä 1ppm
Noàng ñoä 2ppm
Noàng ñoä 5ppm
Töø baûng 5 phaàn phuï luïc, ta thaáy dieän tích peak vaø thôøi gian löu thu ñöôïc coù ñoä laëp laïi cao. Cho thaáy keát quaû coù heä soá tin caäy cao.
Hình 3.22. Ñöôøng chuaån Vitamin C trong 90%heä ñeäm KH2PO4-10%methanol
Phöông trình ñöôøng chuaån qua goác toïa ñoä, coù ñoä tuyeán tính cao. Ñöôøng chuaån thu ñöôïc coù heä soá töông quan R= 0.9978> 0.95, laø chaáp nhaän ñöôïc.
Heä soá goùc thu ñöôïc lôùn hôn so vôùi heä soá goùc thu ñöôïc trong luaän vaên khoaù tröôùc [9]. Ñieàu naøy coù theå laø do thao taùc thí nghieäm coù theå khaùc nhau. Hôn nöõa trong luaän vaên naøy quaù trình chuaån bò maãu chuû yeáu thöïc hieän vaøo buoåi toái, maãu ño xong ñem phaân tích ngay neân vieäc maát maùt maãu haàu nhö khoù xaûy ra.
3.4.3. Ñoä thu hoài maãu qua coät cuûa vitamin C ôû caùc noàng ñoä
Ñoä thu hoài Vitamin C qua coät khaù cao, ñieàu naøy chöùng toû hieäu quaû phaân tích cuûa heä pha ñoäng söû duïng.
Hình 3.23. Saéc kyù ñoà Vitamin C 5ppm ôû cheá ñoä khoâng qua coät
Hình 3.24. Saéc kyù ñoà Vitamin C 5ppm ôû cheá ñoä qua coät
Baûng 3.12. Ñoä thu hoài maãu qua coät cuûa Vitamin C
Noàng ñoä maãu, ppm
Maãu qua coät
Maãu khoâng qua coät
Ñoä thu hoài maãu qua coät, %
Dieän tích peak
RSD%
Dieän tích peak
RSD%
1
30427
2,28
35170
4,88
86,51 ± 4,66
2
57752
1,57
65252
4,2
88,51 ± 3,97
5
143544
2,0
157669
0,27
91,04 ± 1,84
10
281456
1,02
302972
0,35
92,9 ± 1,00
20
559646
0,48
598297,3
0,58
93,54 ± 0,07
Ñoä thu hoài sau coät taêng cuøng vôùi vieäc taêng noàng ñoä cuûa maãu phaân tích. Ñieàu naøy laø do vôùi maãu noàng ñoä nhoû, moät löôïng Vitamin C bò giöõ laïi trong coät cuõng laøm cho keát quaû giaûm xuoáng. Ñoä thu hoài cuûa Vitamin C qua coät khaù cao chöùng toû heä pha ñoäng coù khaû naêng röûa giaûi Vitamin C ra khoûi coät toát.
3.5. PHAÂN TÍCH HAØM LÖÔÏNG VITAMIN C TRONG CAÛI XANH BAÈNG PHÖÔNG PHAÙP SAÉC KYÙ LOÛNG CAO AÙP
3.5.1. Quy trình trích Vitamin C töø caûi xanh
Quy trình trích ly ñöôïc xaây döïng döïa vaøo taøi lieâïu tham khaûo [5], coù taêng soá baäc trích ly leân laø 2 baäc.
Ngoaøi ra trong quaù trình tieán haønh thí nghieäm ñaõ löïa choïn thôøi ñieåm trích laø vaøo buoåi toái nhaèm giaûm aûnh höôûng cuûa aùnh saùng, maãu sau khi trích ly ñöôïc ñem ñi sieâu loïc vaø phaân tích ngay, thôøi gian trích ly chæ khoaûng 10 phuùt moät maãu neân söï maát maùt Vitamin C laø khoâng ñaùng keå.
Xaùc ñònh ñoä thu hoài maãu cuûa quy trình trích ly
Keát quaû phaân tích haøm löôïng Vitamin C trong rau chòu aûnh höôûng cuûa hieäu suaát thu hoài maãu sau coät HPLC vaø hieäu suaát thu hoài maãu sau quaù trình trích (tröôùc khi ñöa vaøo coät HPLC). Do ñoù, ñeå xaùc ñònh hieäu suaát thu hoài maãu cuûa qui trình trích löïa choïn, caàn laøm ñoàng thôøi qui trình naøy vôùi maãu rau, vaø vôùi maãu rau coù theâm chuaån ñeå so saùnh.
Hình 3.25. Saéc kyù ñoà phaân tích maãu caûi xanh khoâng boå sung Vitamin C
Hình 3.26. Saéc kyù ñoà phaân tích maãu caûi xanh khoâng boå sung Vitamin C
Baûng 3.13. Ñoä thu hoài maãu cuûa quaù trình trích ly Vitamin C töø rau
Maãu boå sung
Thôøi gian löu , phuùt
Thôøi gian löu trung bình, phuùt
RSD, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak trung bình
RSD, %
Ñoä thu hoài maãu (%)
0 ppm
2,355
2,356
0,05
425563
421916,7
3,52
2,355
405563
2,357
434624
10 ppm
2,358
2,357
0,07
673505
672224,7
2,31
85,28 ± 3,59
2,355
687040
2,357
656129
15 ppm
2,35
2,354
0,19
804972
805601,3
0,48
87,15 ± 3.10
2,358
809706
2,353
802126
20 ppm
2,35
2,352
0,13
947575
947197,3
0,24
89,48 ± 3,17
2,355
949256
2,35
944761
Vôùi maãu rau khoâng theâm chuaån dieän tích peak thu ñöôïc laø 421916.7, döïa vaøo phöông trình ñöôøng chuaån, vaøo heä soá pha loaõng, coâng thöùc tính trong phaàn thöïc nghieäm ta coù theå xaùc ñònh ñöôïc haøm löôïng Vitamin C coù trong maãu rau ban ñaàu laø 36mg trong 100g rau. Haøm löôïng naøy nhoû hôn nhieàu so vôùi trong taøi lieäu tham khaûo (71mg vitC/100g caûi xanh).
Maëc duø ñoä thu hoài maãu cuûa quy trình trích ñaõ xaùc ñònh ôû treân laø khaù cao (gaàn 90% ñoái vôùi noàng ñoä 20ppm), nhöng khi trích vôùi rau thì ñoä thu hoài naøy nhoû. Ñieàu naøy coù theå do quy trình naøy hieäu quaû vôùi Vitamin C ôû daïng töï do (trong chuaån boå sung vaøo) nhöng chöa thöïc söï hieäu quaû vôùi Vitamin C ôû traïng thaùi lieân keát vôùi rau, caàn caûi thieän ñeå naâng cao hieäu quaû trích vitamin C lieân keát trong rau.
Beân caïnh ñoù coøn coù moät vaøi yeáu toá coù theå aûnh höôûng ñeán löôïng Vitamin C coù trong rau nhö khoaûng thôøi gian töøø luùc thu hoaïch ñeán khi phaân tích, söï khaùc nhau veà gioáng caây…
Keát quaû khi boå sung tröïc tieáp vaøo dòch trích:
Khi boå sung tröïc tieáp chuaån vaøo dòch ta thaáy ñoä thu hoài maãu taêng leân so vôùi khi boå sung vaøo rau. Ñieàu naøy chöùng toû maëc duø ñaõ coá gaéng ñeå haïn cheá vieäc maát Vitamin C trong quaù trình trích ly nhöng vieäc thaát thoaùt naøy laø khoù traùnh khoûi.
Baûng 3.14. Ñoä thu hoài Vitamin C khi boå sung chuaån vaøo dòch
Maãu boå sung
Thôøi gian löu , phuùt
Thôøi gian löu trung bình, phuùt
RSD, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak trung bình
RSD, %
Ñoä thu hoài maãu (%)
0 ppm
2,355
2,356
0,05
425563
421916,7
3,52
2,355
405563
2,357
434624
10 ppm
2,35
2,349
0,05
682450
680286
2,32
88.02 ± 3,71
2,348
663547
2,35
694861
15 ppm
2,345
2,343
0,09
814972
818934,7
1,15
90,17 ± 3,34
2,341
829706
2,342
812126
20 ppm
2,342
2,347
0,22
964379
962691
3,71
92,12 ± 4,72
2,35
997565
2,35
926129
KEÁT LUAÄN VAØ KIEÁN NGHÒ
Keát luaän
Keát quaû luaän vaên coù theå ñöôïc toùm taét nhö sau:
Ñaõ khaûo saùt laïi phoå haáp thu cuûa Carbaryl, Dimethoate, Vitamin C trong vuøng böôùc soùng UV, keát quaû phuø hôïp vôùi keát quaû thu ñöôïc trong luaän vaên khoùa tröôùc.
Ñaõ khaûo saùt ñoä thu hoài cuûa Carbaryl, Dimethoate khi qua coät HPLC vôùi thaønh phaàn Acetonitrile/nöôùc trong pha ñoäng khaùc nhau. Thaønh phaàn pha ñoäng Acetonitrile/nöôùc laø 55/45 cho ñoä thu hoài maãu Carbaryl qua coät khaù cao, tôùi 98%. Ñoái vôùi Dimethoate, ñoä thu hoài maãu ñaït ñöôïc thaáp hôn, trong khoaûng töø 32,21% ñeán 98%. Ñoä thu hoài maãu Dimethoate qua coät HPLC seõ lôùn hôn haún khi duøng thaønh phaàn pha ñoäng acetonitrile/nöôùc: 70/30 tôùi 85/15.
Ñaõ ñöa ra ñöôïc quy trình ly Carbaryl, Dimethoate vaø Vitamin C töø caûi xanh. Quy trình naøy naâng soá baäc trích töø rau leân 2 baäc, vaø soá baäc taùch pha leân 2 baäc.
Ñaõ khaûo saùt ñöôïc ñoä thu hoài maãu ñoái vôùi quy trình phaân tích Carbaryl, Dimethoate vaø Vitamin C ñaõ choïn. Keát quaû ñoä thu hoài maãu cuûa caùc chaát vôùi quy trình choïn phaân tích laø khaù cao töø 74%-84% ñoái vôùi Carbaryl, töø 66%-72% ñoái vôùi Dimethoate vaø töø 85%-89% ñoái vôùi Vitamin C.
Ñaõ aùp duïng quy trình trích ñeå ño haøm löôïng Carbaryl, Dimethoate vaø Vitamin C trong maãu rau caûi xanh mua ôû chôï. Keát quaû dö löôïng cuûa Carbaryl vaø Dimethoate ñeàu an toaøn döôùi möùc giôùi haïn cho pheùp. Haøm löôïng Vitamin C nhoû hôn trong caùc taøi lieäu tham khaûo khaù nhieàu.
Ñaõ aùp duïng quy trình phaân tích ñaùnh giaù aûnh höôûng cuûa chieáu xaï leân söï phaân huûy Carbaryl trong caûi xanh. Keát quaû ñoä phaân huûy Carbaryl taêng cuøng vôùi söï taêng lieàu chieáu, vôùi lieàu chieáu 1kGy hieäu suaát phaân huyû cuûa Carbaryl trong maãu rau coù boå sung 10ppm chuaån laø 67,51%.
Kieán nghò
Do thôøi gian vaø ñieàu kieän thöïc hieän luaän vaên coù haïn maø khoái löôïng ñoøi hoûi phaûi khaûo saùt khoâng ít neân ñeå thuaän lôïi vaø giaûm thôøi gian phaân tích, ñaõ choïn cuøng heä pha ñoäng cho phaân tích caû 2 chaát Carbaryl vaø Dimethoate.Vì vaäy ñoä thu hoài qua coät cuûa Dimethoate coøn thaáp. Do ñoù ñeå naâng cao ñoä thu hoài qua coät coù theå choïn heä pha ñoäng vôùi tyû leä Acetonitrile/nöôùc laø 70/30 thay vì 55/45 nhö ñaõ khaûo saùt.
Dòch trích cuûa Carbaryl vaø Dimethoate ñem phaân tích treân maùy HPLC coøn chöùa nhieàu taïp chaát, aûnh höôûng ñeán khaû naêng taùch cuûa pha ñoäng, hình daïng cuûa saéc kyù ñoà khoâng ñeïp. Do ñoù caàn söû duïng coät, laøm saïch dòch trích dòch tröôùc khi phaân tích treân HPLC, ñeå keát quaû thu ñöôïc toát hôn vaø baûo veä coät saéc kí.
TAØI LIEÄU THAM KHAÛO
[1]. Phaïm Thò AÙnh Hoàng, Kyõ thuaät sinh hoùa, Nhaø xuaát baûn Ñaïi hoïc Quoác gia Tp.HCM, 2003.
[2]. Nguyeãn Thò Thu Vaân, Phaân tích ñònh löôïng, Nhaø xuaát baûn Ñaïi hoïc Quoác gia Tp.HCM, 2004.
[3]. Phaïm Vaên Hai, Giaùo trình hoaù baûo veä thöïc vaät, Nhaø xuaát baûn Ñaïi hoïc Caàn Thô.
[4]. Leâ Ngoïc Tuù, Hoùa sinh coâng nghieäp, Nhaø xuaát baûn Khoa hoïc vaø Kyõ thuaät Haø Noäi, 2002.
[5]. Caùc taùc giaû, Giaùo trình thí nghieäm phaân tích thöïc phaåm - Phaàn 2, Tröôøng Ñaïi hoïc Baùch khoa Tp.HCM, 2005.
[6]. Caùc taùc giaû, Kyõ thuaät troàng moät soá loaïi caây rau vitamin, Nhaø xuaát baûn Noâng nghieäp, 2003.
[7]. Löu Thò Thu Trang, Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa chieáu xaï lieàu thaáp leân dö löôïng Carbaryl trong döa leo, caûi baép vaø caûi xanh, Luaän vaên toát nghieäp Ñaïi hoïc, ÑH Baùch Khoa Tp.HCM, 2007.
[8]. Traàn Thò Mai Traâm, Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa chieáu xaï lieàu thaáp leân dö löôïng Dimethoate trong döa leo, caûi baép vaø caûi xanh, Luaän vaên toát nghieäp Ñaïi hoïc, ÑH Baùch Khoa Tp.HCM, 2007.
[9]. Nguyeãn Thò Ngoïc Linh, Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa chieáu xaï lieàu thaáp leân haøm löôïng Vitamin C trong döa leo, caûi baép vaø caûi xanh, Luaän vaên toát nghieäp Ñaïi hoïc, ÑH Baùch Khoa Tp.HCM, 2007.
[10]. Eloisa Dutra Caldas, Carbaryl (008), University of Brasilia and Central Laboratory of Public Health of the Federal District Brasilia, BRAZIL
[11]. AOAC Official Method 964.18, Carbaryl Insectiside Residuses. Colorimetric Method, AOAC Official Method of Analysis, 1995.
[12]. AOAC Official Method 975.40, N-Methyl CarbarmateInsectiside Residuses. Gas Chromatographic Method, AOAC Official Method of Analysis, 1995.
[13]. A Primer , HPLC for food analysis, Agilent Technologies, 1996 – 2001, 134 trang
[14]. Multiresidue analysis of pesticides in fresh fruits & vegetables by Supercritical fluid Extraction & HPLC, Journal of health Science, 46(5), 2000, 336-342 trang.
[15]. Chemical, Toxicity, Safety and Environment Analysis Information for Carbary (Sevin).
[16]. www.chemistrymag.org/cji/2005/index.htm
[17]. www.pickeringlabs.com, Expanded HPLC Method for N-methyl Carbarmates: Post-column Analysis of Pesticides in food & potable water samples.
[18].
[19].
[20]. www.skcinc.com/nioshdbs/oshameth/org063/org063.html
[21].
[22].
[23].
[24].
[25].
[26].
[27]. /3123/2496.
[28].
[29].
[30].
PHUÏ LUÏC
Baûng 1. Thôøi gian löu vaø dieän tích peak cuûa maãu Carbaryl10ppm vôùi tyû leä Acetonitrile/nöôùc khaùc nhau trong thaønh phaàn pha ñoäng
Tyû leä Acetonitrile/nöôùc
Thôøi gian löu TB, phuùt
RSD%
Dieän tích peak TB
RSD%
40/60
11,374
0,34
1270426
4,78
55/45
6,291
1,34
1507740,7
0,53
70/30
5,502
3,03
1775789,7
1,06
85/15
3,359
0,24
2016552
2,61
Baûng 2. Thôøi gian löu vaø dieän tích peak cuûa maãu Dimethoate 10ppm vôùi tyû leä Acetonitrile/nöôùc khaùc nhau trong thaønh phaàn pha ñoäng
Heä pha ñoäng
Thôøi gian löu trung bình, phuùt
RSD%
Dieän tích peak trung bình
RSD%
40/60
6,549
1,54
184982,3
0,52
55/45
3,973
1,61
219896
3,40
70/30
3,654
1,34
342067,7
4,48
85/15
2,971
0,14
364542
4,8
Baûng 3. Thôøi gian löu vaø dieän tích peak cuûa caùc maãu chuaån Carbaryl
Noàng ñoä, ppm
Thôøi gian löu , phuùt
Thôøi gian löu trung bình, phuùt
RSD, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak trung bình
RSD, %
1
6,313
6,256
1,02
357834
354334,3
3,40
6,187
364234
6,267
3409350
2
6,333
6,255
1,12
408334
419413,3
2,70
6,198
418948
6,233
430958
5
6,367
6,284
1,44
977156
966139,3
1,05
6,297
964026
6,187
957236
10
6,363
6,291
1,34
1995450
1971850
1,06
6,198
1964401
6,313
1955700
20
6,385
6,320
0,89
3507441
3636452
1,58
6,288
3767607
6,288
3634308
Baûng 4. Thôøi gian löu vaø dieän tích peak khi phaân tích maãu chuaån Dimethoate
Noàng ñoä, ppm
Thôøi gian löu , phuùt
Thôøi gian löu trung bình, phuùt
RSD, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak trung bình
RSD, %
1
4,128
4,031
2,09
14363
15126,7
4,37
3,987
15496
3,977
15521
2
3,975
4,035
1,45
33184
35091,3
4,72
4,038
36145
4,092
35945
5
3,998
4,054
3,42
75348
75669,7
0,41
4,212
75693
3,952
75968
10
4
3,988
0,97
147474
145063,3
1,89
3,945
145644
4,02
142072
20
4,143
4,1
2,03
319871
328434,3
2,3
4,005
331201
4,155
334231
Baûng 5. Thôøi gian löu vaø dieän tích peak cuûa caùc maãu chuaån Vitamin C
Noàng ñoä, ppm
Thôøi gian löu , phuùt
Thôøi gian löu trung bình, phuùt
RSD, %
Dieän tích peak
Dieän tích peak trung bình
RSD, %
1
2,397
2,397
0,00
42426
42758,7
0,76
2,397
43072
2,397
42778
2
2,408
2,404
0,14
78163
79162,7
1,10
2,402
79714
2,402
79611
5
2,407
2,402
0,17
161823
160330,3
0,89
2,4
160171
2,4
158997
10
2,403
2,402
0,02
287161
287319,0
0,07
2,402
287528
2,402
287268
20
2,407
2,404
0,12
582738
584031,0
0,29
2,402
585951
2,402
583404
Baûng 6. Ñoä thu hoài maãu Carbaryl khi theâm chuaån vaøo rau
Maãu boå sung
Dieän tích peak trung bình cuûa maãu Carbaryl-nöôùc
RSD, %
Dieän tích peak trung bình cuûa maãu rau theâm chuaån
RSD, %
Ñoä thu hoài maãu (%)
0
0
0
71514,3
1,74
10ppm
1913548,8
1,55
1489454
0,69
74,10 ± 1,80
20ppm
3634358,98
1,48
3018616
0,24
81,09 ± 1,86
25ppm
4430726,3
1,17
3803251
3,06
83,99 ± 3,12
Baûng 7. Ñoä thu hoài maãu Dimethoate khi theâm chuaån vaøo rau
Maãu boå sung
Dieän tích peak trung bình cuûa maãu Carbaryl-nöôùc
RSD, %
Dieän tích peak trung bình cuûa maãu rau theâm chuaån
RSD, %
Ñoä thu hoài maãu (%)
0,0ppm
0
0
2720,33
4,43
2,5ppm
45405,52
1,95
32579
1,35
65,76 ± 3,30
5,0ppm
80315,33
2,42
58162
3,00
69,03 ± 4,05
10,0ppm
164367,33
3,03
121196,3
1,49
72,08 ± 4,01
Baûng 8. Hieäu suaát phaân huûy Carbaryl ôû lieàu chieáu cao
Noàng ñoä (ppm)
Lieàu chieáu
Thôøi gian löu trung bình
RSD%
Dieän tích peak trung bình
RSD%
Hieäu suaát phaân huyû (%)
20ppm
1,5 kGy
5,955
0,19
1338152,5
3,19
55,67
3,0 kGy
5,895
0,07
963240,4
2,25
68,09
Baûng 9. Hieäu suaát phaân huyû Carbaryl ôû lieàu chieáu thaáp
Noàng ñoä (ppm)
Lieàu chieáu
Thôøi gian löu trung bình
RSD%
Dieän tích peak trung bình
RSD%
Hieäu suaát phaân huyû
10ppm
0,2 kGy
6,168
0,49
816071,85
1,52
45,21
0,4 kGy
6,035
0,05
728491,95
0,75
51,09
0,6 kGy
6,142
1,04
637784,20
3,26
57,18
0,8 kGy
6,027
0,18
533224,53
3,07
64,2
1,0 kGy
6,08
1,15
483923,60
1,71
67,51
Các file đính kèm theo tài liệu này:
Luan van.doc
